DB15/T 2149-2021 革兰氏阴性菌群体感应信号分子的气相色谱-质谱检测方法.pdf

ICS65.020.30
CCS B40
DB15
内蒙古自治区地方标准
DB15/T2149-2021
规模化羊场绒山羊舍饲管理技术规程色谱-质谱检测方法
Test method for quorum sensing molecules of N-acyI homoser ine lactones by gas chromatography-mass spectrometry
2021-04-15  发布
2021-05-15  实施
内蒙古自治区市场监督管理局  发布

前言
本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC19)归口。本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、伊金霍洛旗文兵农业机械服务企业。本文件主要起草人：孙海洲、李胜利、张春华、桑丹、金鹿、张崇志、王泽平、刘和平、韩文兵、王永荣、刘要仙、王生云、敖特更达赖。

内容摘抄：

革兰氏阴性菌群体感应信号分子的气相色谱-质谱检测方法
1范围
本文件规定了革兰氏阴性菌群体感应信号分子的气相色谱一质谱检测方法。本文件适用于反刍动物瘤胃液或肠道食糜中革兰氏阴性菌群体感应信号分子一酰基高丝氨酸内酯的测定。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1群体感应quorum sensing
在环境中，当微生物种群密度达到一定阈值时，由微生物群体产生的感应信号分子也达到一定浓度，并通过受体蛋白的信号传递，将诱导或抑制信号传递到细胞内，来影响其特定基因的表达，以调控微生物群体生理特征、种群数量和分布的一种微生物群体相互影响行为。
3.2N-酰基高丝氨酸内脂acyl-homoser ine|actones
由革兰氏阴性菌产生的一类化合物。作为革兰氏阴性细菌中主要群体感应信号分子来调控微生物许多生理特性基因的表达。
4试剂和材料
4.1乙酸乙酯(C4H803):色谱纯.
4.2无水硫酸钠(Na2S04):分析纯，在马福炉中于450℃下灼烧2h,冷却后，贮于磨口玻璃瓶中密封保存备用。
4.3N-丁酰基高丝氨酸内酯(C4-HSL):色谱纯。
4.4-己酰高丝氨酸内酯(C6-HSL)：色谱纯。
4.5-辛酰基-高丝氨酸内酯(C8-HSL):色谱纯。
4.6-癸酰基-高丝氨酸内酯(C10-HSL):色谱纯。
4.7N-十二烷酰基-高丝氨酸内酯(C12-HSL):色谱纯。

4.8N-十四烷酰基-高丝氨酸内酯(C14-HSL)：色谱纯。
4.9N-（B-酮己酰)-L-高丝氨酸内酯(3-oxo-C6-HSL)：色谱纯。
4.10N-3氧辛酰-L-高丝氨酸内酯(3-0x0-C8-HSL):色谱纯。
4.11N-3氧癸酰-L-高丝氨酸内酯(3-0x0-C10-HSL)：色谱纯。
4.12N-3氧十二烷酰-L-高丝氨酸内酯(3-0x0-C12-HSL)：色谱纯
4.13N-3氧十四烷酰-L-高丝氨酸内酯(3-0x0-C14-HSL):色谱纯。
4.14高丝氨酸内酯标准储备液制备：准确称取高丝氨酸内酯标准品10.0mg,置于100mL的容量瓶中，用乙酸乙酯溶解，定容为浓度为100mg/L的标准储备液，置于-18℃冰箱中密封保存，最长保存期为30d。
4.15高丝氨酸内酯标准工作液制备：分别吸取一定量的标准储备液(4.14)，用乙酸乙酯稀释成不同浓度的混合标准工作液。各混合标准工作液浓度分别为1μg/L、5μgL、10μg/L、50μgL、100μg/L和250μg/L,共6个不同梯度，且现配现用。

（略）

投稿会员：巧克力布丁