ICS11.220 CCS B41 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5282—2020 虾偷死野田村病毒病检疫技术规范 Quarantine protocol for infection with covert mortality nodavirus 2020-12-30发布 2021-07-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5282-2020 虾偷死野田村病毒病检疫技术规范 1范围 本文件规定了虾偷死野田村病毒病临床症状、组织病理、套式聚合酶链反应、实时荧光逆转录 聚合酶链反应和原位杂交的检测方法. 本文件适用于虾偷死野田村病毒病的流行病学调查、诊断、检疫和监测. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适 用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T18088出入境动物检疫采样 SN/T1193基因检验实验室技术要求 3术语、定义和缩略语 本文件没有需要界定的术语和定义.下列缩略语适用于本文件. 3.1CMNV:偷死野田村病毒(covert mortality nodavirus) 3.2RT-PCR:逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction) 3.3 Nested PCR:套式聚合酶链反应(nested polymerase chain reaction) 3.4Ct:达到值的循环数(cycle threshold) 3.5cDNA:互补脱氧核糖核酸(plementary deoxyribonucleic acid) 3.6DEPC:焦碳酸乙二酯(diethypyrocarbonate) 3.7PBS:磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline) 3.8PBST:磷酸盐吐温缓冲液(phosphate buffer saline with tween) 3.9 RNase:RNA酶(ribonuclease) 3.10 dNTPs:三磷酸脱氧核苷酸(deoxynucleotide triphosphates) 3.11EB:溴化乙锭(ethidium bromide) 3.12MAB:马来酸缓冲液(maleic acid buffer) 3.13BCIP:5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐(5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate) 3.14NBT:氯化硝基四氮唑蓝(nitroblue tetrazolium chloride) 3.15DTT:二硫苏糖醇(DL-Dithiothreitol) 3.16EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraaceticacid) 4疾病概述 虾偷死野田村病毒病也叫虾病毒性偷死病，其病原为偷死野田村病毒(CMNV) 属于野田村病 1 SN/T5282-2020 毒科(Nodaviridae)甲型野田村病毒属(Alphanodavirus) 详细资料参见附录A. 5试剂和材料 5.1水：符合GB/T6682中一级水的规格，用DEPC处理以除掉RNase..PCR实验应在符合SN/T 1193要求的实验室进行. 5.2CMNV病毒参考株. 5.3 Davidson'sAFA固定液：见附录B.1. 5.41%盐酸乙醇：浓盐酸和70%乙醇配制. 5.5梯度乙醇：70%...
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