中华人民共和国国家标准
农业农村部公告第1012号-16-2026
转基因植物及其产品成分检测 实时荧光PCRA△Ct法快速 比较转基因成分含量
Detection ofgeneticallymodifiedplants and derivedproducts-Real-time PCRAACtmethod for rapid parison of transgenicingredients
中华人民共和国农业农村部发布
前言
本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部提出.
本文件由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口.
本文件起草单位：农业农村部科技发展中心、中国农业科学院生物技术研究所、中国农业科学院植物保护研究所.
本文件主要起草人：董美、付伟、谢家建、金芜军、陈红、苗朝华、张继红、黄春蒙、文婷婷、孟丽霞、杨秀英.
转基因植物及其产品成分检测 实时荧光PCRAACt法快速比较转基因成分含量
1范围
本文件规定了利用实时荧光PCR△△C法快速比较转基因成分含量相对高低的方法. 本文件适用于玉米、大豆等产品及其制品与阳性定量质控品中转基因成分含量高低的快速判定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件，
农业部1485号公告-4-2010转基因植物及其产品成分检测DNA提取和纯化
NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求
3术语和定义
3. 1
用于转基因成分含量高低的快速判定的阳性样品，宜优先选用有证标准物质，也可使用经验证的实验室配制样品.阳性定量质控品标准值的测量不确定度应涵盖标识阔值.
3. 2
试样预处理后，从同一试样不同位置随机抽取的独立样品.
Cr值ACr value
3. 4 实时荧光PCR扩增中试样转化体特异性序列平均C值与内标准基因平均C：值的差值.
AACr值AACr value
4原理
采用经验证的方法进行实时荧光PCR扩增.若试样中含有转基因成分，计算试样与阳性定量质控品的△△C值，判定试样与阳性定量质控品相比转基因成分含量的相对高低，
5技术要求
5.1试剂和材料
除非另有说明，仅使用分析纯试剂、蒸馏水或以上等级的水，
5.1.2PCR扩增试剂：Tag DNA聚合酶，PCR扩增缓冲液、25mmol/L氯化镁（MgCL）溶液、dNTPs溶液（浓度为10mmol/L的dATP、dTTP、dGTP、dCTP4种脱氧核糖核苷酸溶液等体积混合）.
注：若不采用上述PCR扩增试剂，也可选用实时荧光PCR试剂盒.
