GB 中华人民共和国国家标准 GB5009.259—2016 食品安全国家标准 食品中生物素的测定 2016-08-31发布 2016-09-20实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会 .发布 GB5009.259-2016 前言 本标准代替GB5413.19一2010《婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定》. 本标准与GB5413.19一2010相比，主要变化如下： 一一标准名称修改为“食品安全国家标准食品中生物素的测定”； —修改了标准曲线管和待测液管制备的表述方式； ——修改了测定步骤表达方式； 一增加了谷薯类、肉类、新鲜果蔬、藻类试样、蛋类、豆类、坚果类、内脏、强化生物素的食品处理 过程； ——删除了仪器和设备中通用玻璃器皿的描述. I GB5009.259-2016 食品安全国家标准 食品中生物素的测定 1范围 本标准规定了食品中生物素的测定方法. 本标准适用于食品中生物素的测定. 2原理 生物素是植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)生长所必需的营养素.在生物素测定培养基中， 植物乳杆菌的生长与待测试样中生物素含量呈线性关系，根据透光率与标准工作曲线进行比较，即可计 算出试样中待测物质的含量. 3试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水. 3.1试剂 3.1.1无水乙醇(C2HO). 3.1.2氢氧化钠(NaOH). 3.1.3盐酸(HC1). 3.1.4柠檬酸盐. 3.1.5a-淀粉酶：≥1.5U/mg. 3.1.6木瓜蛋白酶：≥5U/mg. 3.1.7硫酸(H2SO1). 3.2试剂配制 3.2.1乙醇溶液(50%)：量取500mL无水乙醇与500mL水混匀. 3.2.2氢氧化钠溶液(0.5mol/1):称取20g氢氧化钠，溶于1000mL水中，混匀. 3.2.3氯化钠溶液(0.85%)：称取8.5g氯化钠，加水溶解并稀释至1000mL 混匀. 3.2.4盐酸溶液(1mol/L):吸取83mL盐酸，用水稀释至1000mL 混匀. 3.2.5柠檬酸盐缓冲液(H4.5):称取1.5g柠檬酸至一个100mL带磁力搅拌器的烧杯中，加入约 50mL蒸馏水至溶解，再加入12mL的NaOH(1mol/L) 调节pH至4.5（用0.1mol/LHC1) 将溶液 转入100mL容量瓶中，并用蒸馏水定容.该缓冲液可在2℃~8℃储存3d. 3.2.6蛋白酶-淀粉酶液：分别称取200mg木瓜蛋白酶和a-淀粉酶，加人20mL水研磨至匀浆， 3000r/min离心5min~10min.现用现配. 3.2.7硫酸溶液(3%)：量取30mL硫酸加入到1000mL水混匀. 1 ...
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