NY
中华人民共和国农业行业标准
微生物肥料酶活效应测定方法
Detectionmethodsforthe enzyme activity effect ofmicrobialfertilizer
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
本文件由农业农村部种植业管理司提出.
本文件由农业农村部肥料标准化技术委员会归口，
本文件起草单位：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所、农业农村部微生物肥料和食用菌菌种质量检验测试中心、农业农村部微生物产品质量安全风险评估实验室（北京).
刘孝额. 本文件主要起草人：马鸣超、姜昕、李俊、曹风明、关大伟、李力、毛聪琳、贾聪、杨小红、陈慧君、朱玲玲、
微生物肥料酶活效应测定方法
1范围
法、结果计算及精密度要求. 本文件规定了微生物肥料酶活效应测定的原理、试剂和溶液、仪器设备、样品采集与试样制备、测试方
本文件适用于施用微生物肥料的土壤常见酶活力测定，施用其他肥料的土壤可参照执行.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文文件.
GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T1113-2006微生物肥料术语 GB/T35538-2017工业用酶制剂测定技术导则NY/T1121.1土壤检测第1部分：土壤样品的采集、处理和贮存
3术语和定义
NY/T1113一2006界定的以及下列术语和定义适用于本文件.
3.1
微生物肥料microbial fertilizer
含有特定微生物活体应用于农业生产的制品，通过其中所含微生物的生命活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长，增强抗逆性，提高产量，改善农产品品质及农业生态环境.
[来源：NY/T1113-2006 2.1，有修改]
注：包含农用微生物菌剂、复合微生物肥料和生物有机肥三大类产品.
3.2
施用微生物肥料引起土壤酶活力变化的效果，
3.3 酶活力enzyme aetivity酶在一定条件下催化某一特定反应的能力.[来源：GB/T35538-2017.3.2]
3.4
将尿素（脲）分解为氨和二氧化碳或碳酸铵的酶.
3.5过氧化氢酶catalase
将过氧化氢催化分解成氧和水的酶.
蔗糖酶sacrase
NY/T 4549-2025
将蔗糖水解成为果糖和葡萄糖的酶.
将纤维素分解成寡糖或单糖的酶.
硝酸盐还原酶nitrate reductase
将硝酸盐还原成亚硝酸盐的一种含钼的酶.
催化蛋白质水解成肽并进一步水解成氨基酸的酶.
3.10
水解底物实现去磷酸化的酶.
3.11
催化几丁质水解生成N-乙酰葡萄糖胺反应的酶.
4试验方法
放装置.在整个实验过程中，操作者应按照接触剧毒物的要求采取相应的保护措施. 警示一一整个分析操作过程应在指定区域内进行，避免阳光直射，具备相对独立的操作台和废弃物存
4.1土壤脲酶活力的测定（苯酚钠-次氯酸钠比色法）
4.1.1原理
本方法以尿素为底物，根据酶促产物氨与苯酚-次氯酸钠作用生成蓝色的靛酚，通过比色测定，表征脲酶活力.在37C、pH6.7条件下，24h水解尿素产生1mgNH-N的酶量为一个酶活力单位，单位以U表示.
4.1.2试剂和材料
除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂，实验用水应符合GB/T6682中三级水的规定.4.1.2.1甲苯（C；H）.4.1.2.2尿素溶液（10%）：称取10.0g尿素（CHN：O）.用水溶解并定容至100mL.4.1.2.3柠橡酸盐缓冲液（pH=6.7）：称取184.0g柠橡酸（C H O ）和147.5g氢氧化钾（KOH）分别溶于水中，然后将两溶液混合，用10%氢氧化钠溶液将pH调至6.7，用水稀释并定容至1000mL.醇和18.5mL丙酮，用乙醇定容至100mL，此为A液，冰箱冷藏保存；称取27.0g氢氧化钠（NaOH），用水溶解并定容至100mL，此为B液，冰箱冷藏保存：使用时，将A液、B液各取20.0mL混合，用水定容至100 mL.4.1.2.5次氯酸钠溶液（有效氯0.9%）：量取有效氯浓度10%次氯酸钠（NaCIO）溶液9mL.用水定容至4.1.2.6氮标准溶液（100pg/mL)：称取0.4717g经干燥保存的硫酸铵[（NH）SO ].用水溶解并定 100 mL 容至1000 mL.4.1.2.7氮标准工作溶液（10gg/mL)：吸取10.0mL氮标准溶液（4.1.2.6）定容至100ml.4.1.3仪器设备4.1.3.1电子天平：感量0.001g和感量0.1g.4.1.3.2试验筛：孔径1mm. 2
