SC
中华人民共和国水产行业标准
海藻及其制品中L-岩藻糖的测定 液相色谱法
Determination of L-fucose in seaweed and its products-Liquidchromatography
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020（标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部渔业渔政管理局提出.
本文件由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会（SAC/TC156/SC3）归口.
本文件起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、青岛明月海藻集团有限公司、青岛海之林生物科技开发有限公司、日照健安检测技术服务有限公司、山东海之宝海洋科技有限公司、山东省海洋资源 与环境研究院.
本文件主要起草人：孙伟红、郭莹莹、孙占一、陈宏、王联珠、郭晓华、申培丽、刘晓勇、徐英江、刘兴勇、李文刚、朱文嘉、邢丽红、孙晓杰、冷凯良、苗钧魁、彭吉星.
本文件为首次发布.
海藻及其制品中L-岩藻糖的测定液相色谱法
1范围
本文件描述了用液相色谱法测定海藻及其制品中L-岩藻糖含量的原理、试剂和材料、仪器设备、样品的制备与保存、测定步骤、数据处理、方法灵敏度和精密度.
本文件适用于鲜海藻、盐渍海藻、干海藻及岩藻多糖中L-岩藻糖含量的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T30891-2014水产品抽样规范
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样中岩藻多糖在酸性条件下水解为L-岩藻糖，经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化，液相色谱-紫外检测器或二极管阵列检测器测定，外标法定量.
5试剂和材料
除另有说明，试剂均为分析纯，试验用水应符合GB/T6682一级水的规定.
5.1试剂
5.1.1甲醇（CHOH）：色谱纯.5.1.2三氯甲烷（CHCI）.5.1.3乙晴（CH CN)：色谱纯，5.1.4硫酸（H;SO ）：含量95%~98%.5.1.5氨水（NHH:O）：含量25%~28%5.1.6磷酸二氢钾（KHPO）.5.1.7氢氧化钠（NaOH).5.1.81-苯基-3-甲基-5-毗唑啉酮（CHNO PMP CAS号：89-25-8)：化学纯，纯度≥99.0%.5.1.9冰乙酸（CHO）. 5.1.10磷酸（HPO )：含量≥85%.
5.2.1L-岩藻糖标准品（C HO，CAS号：2438-80-4），纯度≥98.0%.
5.3.11mol/1.硫酸溶液：移取硫酸5.4mL.缓缓注人适量水中，冷却至室温后用水定容至100ml，混匀.
5.3.20.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液：称取磷酸二氢钾6.80g.加入约400mL水溶解用氨水调节pH
SC/T 3064-2025
为6.8~7.0，再用水定容至500mL，混匀.5.3.31mol/L氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠4.00g，用适量水溶解，冷却至室温后用水定容至100ml，5.3.40.3mol/1.氢氧化钠溶液；称取氢氧化钠1.20g，用适量水溶解，冷却至室温后用水定容至 混匀.100 mL，混匀.5.3.50.5mol/1.PMP-甲醇溶液：称取4.36gPMP 用甲酵溶解井定容至50mL，现用现配.5.3.60.3mol/1.冰乙酸溶液：移取冰乙酸1.7ml.用水定容至100ml，混匀.5.3.750mmol/L磷酸溶液：移取磷酸333pL.用水定容至100mL，混匀.为6.8~7.0.再用水定容至11，过0.45pm滤膜，备用.
5.4标准溶液配制
5.4.1L-岩藻糖标准储备液（1.0mg/mL)：称取1-岩藻糖标准品约10mg（精确至0.01mg）.用水溶解并定容于10mL容量瓶中，4C密封保存，有效期15d.5.4.2L-岩藻糖标准中间液（100μg/mL）：准确量取L-岩藻糖标准储备液（5.4.1)适量，用水稀释配制成浓度为100μg/mL的L-岩藻糖标准中间液，现配现用.
5.5.1具塞消化管：20mL螺旋盖玻璃试管，配置聚对苯二甲酸丁二醇酯（PBTP）耐压盖.5.5.2精密pH试纸：测量范围4.5~9.0和0 0~6.0. 5.5.3具塞试管：10mL.聚丙烯材质.5.5.4针式滤器：水相，0.22cm.
6仪器设备
6.1液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器.6.2分析天平：感量分别为0.01g、0.1mg和0.01mg. 6.3涡旋混合器.6.4电热恒温效风干燥箱.6.5离心机：转速不低于4000r/min.6.6恒温水浴锅.
7样品的制备与保存
7.1试样制备
湿基试样制备按GB/T30891-2014附录B的规定执行；干制品试样粉碎后全部过0.425mm孔径分析筛，充分混匀后装人洁净容器中密封备用.
7.2试样的保存
鲜海藻、盐渍海藻置于一18℃以下保存，干海藻和岩藻多糖试样置于常温干燥环境下保存.
8测定步骤
8.1水解
8.1.1鲜海藻、盐渍海藻
称取试样1g~2g（精确至0.01g）于20 mL具塞消化管中，加人1mol/L硫酸溶液（5.3.1)5mL，充分涡旋，充氮封管，置于电热恒温干燥箱中，110C水解2h，取出消化管冷却至室温，将水解液全部转移至50mL离心管中，用0.1mol/1磷酸二氢钾缓冲液（5.3.2）5mL分2次冲洗消化管，冲洗液合并于上2
