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GB
中华人民共和国国家标准
GB 23200.71-2016
代替SN/T 2914-2011
食品安全国家标准 食品中二缩甲酰亚胺类农药残留量的测定 气相色谱一质谱法
National food safety standards
Determination of dicondensing-formylimine pesticides residues in foods
Gas chromatography - mass spectrometry
中华人民共和国农业部 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局
发布
前言
本标准代替SN/T2914-2011《出口食品中二缩甲酰亚胺类农药残留量的测定》. 本标准与SN/T2914-2011相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准名称中“出口食品”改为“食品”：一标准范围中增加“其它食品可参照执行”.本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T .
食品安全国家标准
食品中二缩甲酰亚胺类农药残留量的测定气相色谱一质谱法
1范围
本标准规定了食品中乙烯菌核利、乙菌利、腐霉利、异菌残留量的气相色谱-质谱检测方法.
乙烯菌核利、乙菌利、腐霉利、异菌豚残留量的测定，其它食品可参照执行. 本标准适用于茶叶、大米、大蒜、苹果、菠菜、板栗、葡萄酒、蜂蜜、鱼肉、鸡肉、猪肾、猪肉中
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
试样用丙酮-正已烷混合溶剂提取，经凝胶色谱柱净化和固相萃取柱净化，气相色谱-质谱测定，外标法定量.
4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1丙酮（CHO）：残留级.4.1.2正已烷（CgHμ）：残留级.4.1.3环已烷（CH2）：残留级. 4.1.4乙酸乙酯（CHgO）：残留级.4.1.5氯化钠（NaC1）.4.1.6无水硫酸钠（NaSOg）：经650C灼烧4h，置干燥器中冷却，密封保存.
4.2溶液配制
4.2.1丙酮-正已烷溶液（14，WK）：取100mL丙酮，加入400mL正已烷，摇匀备用.4.2.3乙酸乙酯环己烷（11，VK）：取100mL乙酸乙酯，加入100mL环已烷，摇匀备用. 4.2.2丙酮-正已烷溶液（11，VK）：取100mL丙酮，加入100mL正已烷，摇匀备用.
4.3标准品
4.3.1乙烯菌核利标准品（Vinclozolin，CHCNO，CASNO：50471-44-8)、乙菌利标准品（Ethephon，CHCNO，CAS NO:84332-86-5)、腐霉利标准品(Procymidone CHCNOCAS NO:32809-16-8)、 异菌豚标准品（iprodione，CsHCgN;O，CASNO：36734-19-7）纯度均>99%.
4.4标准溶液配制
4.4.1乙烯菌核利、乙菌利、腐霉利、异菌豚标准储备溶液：准确称取适量乙烯菌核利、乙菌利、腐 霉利、异菌脲标准品，用丙酮配制成100ug/mL标准储备液，再根据检测要求用正已烷稀释成适当浓度的混合标准工作溶液.标准储备溶液避光于0-4"C保存.
4.4.2异菌脲基质标准工作溶液：异菌豚基质标准工作溶液是用样品空白溶液配成不同浓度的基质标 准工作溶液，用于做标准曲线.基质标准工作溶液现用现配.
4.5材料
4.5.1凝胶净化柱：400mm×25mm:填料Bio-BeadsS-X3 38-75um 使用前做淋洗曲线. 4.5.2石墨化炭黑固相萃取小柱：250mg，3mL或相当者.使用前做淋洗曲线，用前用3mL丙酮-正已烷（4.2.2）预淋洗.
5仪器和设备
5.1气相色谱-质谱联用仪：配电子轰击离子源（EI源）.
5.2均质器：转速大于10000r/min.5.3旋转蒸发仪. 5.4凝胶净化仪.5.7分析天平：感量0.01g和10.0001g. 5.6氮吹仪.
5.5离心机：转速大于4000r/min.
6试样制备与保存
6.1试样制备
6.1.1苹果、大蒜、菠菜、板栗
取有代表性样品约500g（不可水洗），用粉碎机粉碎，装入洁净容器作为试样，密封，标明标记.
6.1.2茶叶、大米
取有代表性的茶叶、大米样品约500g，用粉碎机粉碎至全部通过20目筛，装入洁净容器作为试样，密封，标明标记.
6.1.3蜂蜜
取有代表性样品约500g，对未结晶的样品将其搅拌均匀：对有结晶析出的样品，在密闭情况下，将样品瓶置于不超过60℃的水浴中温热，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温，在融化时必须注意防止水分挥发.装入洁净容器作为试样，密封，标明标记.
6.1.4鸡肉、鱼肉、猪肾、猪肉
取代表性样品约500g，经搞碎机充分搞碎均匀，装入洁净容器，密封，标明标记.
6.1.5葡萄酒
取代表性样品500mL，摇匀，装入洁净容器内，密封，标明标记.注：以上样品取样部位按GB2763附录A执行.
6.2试样保存
粮谷类、坚果类、茶叶、蜂蜜、酒类试样于0~4℃下保存，其他类试样于-18℃以下冷冻保存，在制样的操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化.
7分析步骤
7.1提取
7.1.1菠菜、苹果、大蒜、葡萄酒、蜂蜜、鸡肉、鱼肉、猪肾、猪肉
准确称取5g（蜂蜜为10g）试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入20mL丙酮一正己烷，加入2g氯化钠，以10000r/min均质1min，提取液以4000r/min的转速离心5min，上清液经无水硫酸钠过滤并转入浓缩瓶中，残渣中加入20ml丙酮一正已烷再提取一次，合并提取液，将提取液于40C下 减压浓缩至近干，用10mL乙酸乙酯-环已烷溶解残渣，待净化.
7.1.2大米、板栗、茶叶
加入20mL丙酮一正已烷，加入2g氯化钠，以10000r/min均质1min，提取液以4000r/min的转速离心 准确称取10g（茶叶为2g）试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入5mL水，浸泡30min，5min，上清液经无水硫酸钠过滤并转入浓缩瓶中，残渣中加入20mL丙酮一正已烷再提取一次，合并提取液，将提取液于40C下减压浓缩至近干，用10mL乙酸乙酯-环已烷溶解残渣，待净化.
7.2净化
7.2.1凝胶色谱（GPC）净化
b）流动相：乙酸乙酯-环已烷（11，体积比）： a）凝胶净化柱：Bio Beads S-X3 400mm×25mm（内径），或相当者：c）流速：5mL/min;d进样量：5mL: e)收集时间：1100 s~1800s.
7.2.2菠菜、茶叶
压浓缩至近干，用3mL丙酮-正已烷溶解残渣，并加入到石墨化碳黑固相萃取柱中，待提取液全部流出 将上述样品的待净化液（菠菜、茶叶）按7.2.1规定的条件净化，将收集馏分在40C以下水浴减后，再用5mL丙酮-正已烷洗脱，保持1.0mL/min流速，收集全部流出液，全部流出液用氮吹仪吹至近干，用正已烷定容至2.0ml，供气相色谱-质谱联用仪测定.
GB 23200.71-2016
7.2.3苹果、大蒜、蜂蜜、大米、板栗、葡萄酒、鸡肉、鱼肉、猪肾、猪肉
按7.2.1规定的条件净化，将收集馏分在40C以下水浴减压浓缩至近干，用正已烷定容至2.0mL，供 将上述样品的待净化液（苹果、大蒜、蜂蜜、葡萄酒、鸡肉、鱼肉、猪肾、猪肉，大米、板票）气相色谱-质谱联用仪测定.
7.3测定
7.3.1气相色谱-质谱参考条件
a）色谱柱：DB-5MS石英毛细管柱，30mx0.25mm（i.d）×0.25μm，或相当者：b）柱温：初始温度70C，保持2min，以20°C/min升至230°C保持10min： c）进样口温度：220C：d）色谱-质谱接口温度：250℃：e)载气：氮气，纯度大于等于99.995%，1.0ml/min; f）进样量：1μL：g）进样方式：不分流进样：h）电离方式：EI：i）电离能量：70eV： j）检测方式：选择离子监测方式（SIM)：k）选择离子（m/z）：
283，285*），异菌豚（m/z187，314，316*），带*者为定量离子. 定性离子：乙烯菌核利（m/z187，285，287*），乙菌利（m/z188，259，331*），腐霉利（m/z255，
7.3.2定量测定
显，定量用基质标准工作溶液.标准工作溶液和样液中的目标物响应值应在仪器检测的线性范围内，标 根据样液中目标物含量的情况，选择峰面积相近的标准工作溶液比较定量，异菌腺的基质效应明准工作溶液和样液等体积穿插进样测定.在上述色谱条件下，各目标物的保留时间约为：乙烯菌核利色谱图参见附录A中图A-1. （10.97min），乙菌利（12.30min），腐霉利（12.63min），异菌豚（18.11min），标准品的总离子流
7.3.3定性测定
峰出现，则对其进行质谱确证，在扣除背景后的样品谱图中，所选离子全部出现，同时所选的离子的离 对标准溶液及样品溶液均按7.3.1规定的条件进行检测，如果样液与标准溶液在相同的保留时间有子丰度比与标准品相关离子的相对丰度一致，波动范围符合表1的最大容许偏差之内，可判定样品中存在相应目标物.被确证的样品可被判定阳性检出.在7.3.1条件下阳性检出物的碎片离子的离子丰度比 分别为为乙烯菌核利（187：285：287=95:100：64），乙菌利（188：259：331=100：94:75），腐霉利（255：283：285=13:100：65），异菌豚（187:314：316=33：100：64）.乙烯菌核利，乙菌利，腐霉利，异菌脉的标准品的质谱图参见附录A中图A-2.1;A-2.2;A-2.3；A-2.4.
表1使用气相色谱一质谱定性时相对离子丰度最大容许误差
相对丰度（基峰） >50 % >20 %至 50 % >10 %至 20 % ≤10 %允许的相对偏差 ±20 % ±25 % ±30 % ±50 %
7.4空白实验
除不加试样外，均按上述测定步骤进行.
8结果计算和表述
用色谱数据处理机或按下式（1）计算试样中待测物质的含量：
AXOX!VXi= (1)Asi× m
式中：
Xi一一试样中待测物质的残留含量，单位为毫克每干克（mg/kg）：
Ai 样液中待测物质的峰面积：
标准工作液中待测物质的浓度，单位为微克每毫升（ug/mL）：
