NY/T 3624-2020 水稻穗腐病抗性鉴定技术规程.pdf

中华人民共和国农业行业标准

NY/T3624-2020

水稻穗腐病抗性鉴定技术规程

Technical code of practice foridentification ofrice resistance to spikeletrot disease[Fusarium proliferatum (Matsushima)Nirenberg]

中华人民共和国农业农村部发布

平台食典通本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口.本标准起草单位：中国水稻研究所全国农业技 务中心.本标准主要起草人：王玲、黄世文、刘连盟、郭荣、通、朱智伟.

水稻穗腐病抗性鉴定技术规程

1范围

本标准适用于水稻品种、材料对水稻穗腐病的抗性鉴定和抗性评价. 本标准规定了水稻品种、材料对水稻穗腐病抗性的鉴定方法和评价方法.

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不 岁的 是注日期的引用文件-仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件， 最新版

3术语和定义

3.1

Gibberella fujikuro 水稻穗腐病由 cg有性态为藤仓赤霉菌 水稻穗部枯死症状的真菌病害.水稻穗属 楠图形小斑点，后逐渐扩大至谷粒大部或全部 褐色 或揭色，水稻成熟时变成黑褐色，局部病穗伴有灰白色

3.2

分离物isolate

从发病部位通过人工培养、纯化、再接种和分离等方法获得的病原菌培养物.

3.3

致病力pathogenicity

病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力.

3.4

剑叶叶枕距flagleafpulvinus interval

水稻剑叶从倒二叶的叶鞘中抽出后，剑叶叶枕与倒二叶叶枕之间的距离.剑叶叶枕高于倒二叶叶枕时，为正叶枕距：剑叶叶枕低于倒二叶叶枕时，为负叶枕距，

3.5

花粉内容充实期pollenfilling stage

花粉母细胞减数分裂完成后，四分体分散并随即变成小球形的花粉粒，花粉外壳逐渐形成，体积继续

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增大，出现花粉发芽孔，花粉内容逐渐充实，直到内容物充满之前，为花粉内容充实期.此时内外科纵向伸长接近停止，横向则迅速增大，雄蕊和雌蕊迅速增长，柱头上依次出现羽状突起，而颖片退化.

4试剂与材料

本标准所用试剂在未加说明时均采用分析纯试剂.实验室用水应符合GB/T6682中规定的三级水要求.

4.1PDA培养基

马铃薯200g.洗净去皮切碎，加水煮沸20min，纱布过滤，加人葡萄糖20g和琼脂20g.用水定容至1000mL，搅拌均匀，高压灭菌（121C，20min）.

4.2YEPD培养基

5仪器设备

5.1超净工作台

洁净等级：100级@≥0.5pm，平均风速：0.25m/s~0.6m/s.

5.2高压灭菌锅

温度范围：0°℃~135C，灭菌时间范围：4min~120min，最高工作压力：0.22MPa~0.25MPa.

5.3恒温培养箱

温度范围：0℃~50°℃，温度波动：±1℃，光照度：01x~75001x

5.4振荡摇床

温度范围：0°℃~50°C，温度波动：±1°℃，振动频率：0r/min~300r/min，振动幅度：20mm.

5.5光学显微镜

目镜：10×；物镜：10×、40×.5.6电子天平：感量0.01g.5.7医用注射器：10mL.

6接种体制备

6.1病原菌分离与鉴定

从发病稻穗上切取病组织，用常规组织分离法获得分离物.分离物的鉴定见附录A.确认为层出镰菌Fusarim proliferatum(Matsushima）Nirenberg，有性态：Gibberella fujikuroi(Sawanda）Wollen-weber]后，采用单孢分离法进行病原菌菌株纯化，经科赫法则（Koch’spostulates）验证后，保存备用.

6.2病原菌保存

将层出镰刀菌菌株接种于PDA斜面培养基上.28C下培养7d，置4C冰箱内保存；或在斜面上加一层灭菌矿物油（超过斜面顶部1cm）后，置于冰箱或室温保存.

6.3接种体选择

根据试验需要选取附录B的鉴别菌株或当地致病力强的菌株作为接种体.

6.4接种体准备

将接种菌株转接于PDA平板培养基上，置于恒温培养箱28C培养3d后，自菌落边缘切取菌饼，接种于100mL的YEPD培养基，在振荡摇床中180r/min、28C培养3d，过滤菌丝，用灭菌的三级水配成浓度为5×10个/mL的分生孢子悬浮液，作为接种体以备用.

7水稻穗腐病抗性鉴定

7.1鉴定病围

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7.1.1鉴定圆选择

具备良好的自然发病条件.土壤环境质量应符合GB15618中二级标准的要求，田间灌溉用水水质应符 鉴定圃应设置在水稻穗腐病适发区.土壤肥力水平中等偏上，肥力均匀，排灌方便，地势平坦较低洼，合GB5084的要求.

7.1.2田间管理

肥料施用应符合NY/T496、NY/T1105的规定.农药使用应符合GB4285、GB/T8321的规定.按当地大田生产习惯对虫、草害进行防治，应及时采取有效的防护措施防治鼠、乌、畜、禽等对试验的危害.鉴定材料在全生育期内不使用杀菌剂，接种前后避免施用任何药剂.

7.2鉴定材料的种植

7.2.1种子质量

鉴定材料种子质量应符合GB440 示准.不应带检疫性病虫.

7.2.2种植要求

鉴定材料播种时间与大田 度：70号 调条 鉴定结果的准确性，鉴定 病期能够与适宜水稻材料经浸种催芽后插于田间税板 63 有苗，待秧龄25d 相对 5117 的规定进行移栽.同一组试验同期移规，移裁 及早进行

定材料设附录C中已知 鉴定材料随机排列或顺序排列氧份 材料 品种和感病 正复栽植 6株.每50份鉴和越病对惠

在鉴定材料四 行距与鉴定材料相网 停 应选择相对抗病的对照品种

7.3接种

7.3.1接种时期

接种时间选择在傍晚进行. 接种时期为水和 有的花R

7.3.2接种方法

接种采用穗苞注 中充满菌液，并从穗尖溢出为宜，每份鉴 种重 重复 接种 的生育进程基本一致.

7.3.3接种前后的田间管

接种前后使田间保持正 培稻的水 种后 时进行田间淮溉，保证病害发生所需条件的满足.

7.4病情调查

7.4.1调查时间

在水稻进人蜡熟期进行调查.

7.4.2调查与记载

观测鉴定材料的发病情况，根据病害症状描述，逐份材料进行调查，记载每个接种稻穗全部谷粒的病情严重度，原始数据记载参见附录D的表D.1.

7.4.3水稻穗腐病病情级别划分

依据鉴定材料稻穗上谷粒的发病程度，进行病情分级，病情级别及其对应的症状描述见表1.

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