中华人民共和国国家职业卫生标准
GBZ/T338-2025代替WS/T 25-1996、WS/T 27-1996
尿中汞测定标准
冷原子吸收光谱法
Determination standard of mercury in urine
Cold atomic absorption spectrometric method
中华人民共和国国家卫生健康委员会 发布
前言
本标准为推荐性标准.
WS/T27一1996《尿中有机（甲基）汞、无机汞和总汞的分别测定方法选择性还原-冷原子吸收光谱法》. 本标准代替WS/T25一1996《尿中汞的冷原子吸收光谱测定方法（一）碱性氯化亚锡还原法》和与WS/T25-1996和WS/T27-1996相比，除编辑性改动外，主要技术变化如下：
将WS/T25和WS/T27合并为选择性还原冷原子吸收光谱法（见第4章，1996年版WS/T25和WS/T 27)
增加了直接测定冷原子吸收光谱法（见第5章）：
删除了有机汞标准溶液的配制（见1996年版WS/T27的4.12）：
更改了选择性还原标准曲线配制方法（见4.5.1，1996年版WS/T27的6.3）：
更改了样品保存溶液（见4.4.3，1996年版WS/T25第5章和WS/T27的第5章）：
-更改了样品测定条件（见4.5.2，1996年版WS/T27的6.4）.
本标准由国家卫生健康标准委员会职业健康标准专业委员会负责技术审查和技术咨询，由中国疾病预防控制中心负责协调性和格式审查，由国家卫生健康委职业健康司负责业务管理、法规司负责统筹管理.
本标准起草单位：广东省职业病防治院、深圳市宝安区疾病预防控制中心、贵州省第三人民医院（贵州省职业病防治院）、广州市职业病防治院、武汉市职业病防治院.
本标准主要起草人：吴邦华、张爱华、董明、孙毅、马安萍、刘祖强、李佐祥、周丽屏、江金风、尹江伟.
本标准所替代标准的历次版本发布情况为：
1996年首次发布为WS/T25-1996和WS/T27-1996：
一本次为第一次修订.
尿中汞测定标准冷原子吸收光谱法
1范围
本标准规定了测定尿中汞的冷原子吸收光谱法.本标准适用于职业接触汞人员尿中汞浓度的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本标准必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本标准：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本标准.
GBZ/T 224职业卫生名词术语
GBZ/T295职业人群生物监测方法总则
3术语和定义
GBZ/T224和GBZ/T295界定的术语和定义适用于本标准.
4选择性还原冷原子吸收光谱法
4.1原理
尿样在强碱性和高浓度镉离子条件下，尿中无机汞和有机汞均被氯化亚锡还原成单质汞蒸气：而在强碱性和不加镉离子条件下，只有无机汞被氯化亚锡还原成单质汞蒸气：选择性还原生成的单质汞蒸气 用冷原子吸收光谱法测定，采用外标标准曲线法定量：尿中总汞测定浓度减去尿中无机汞测定浓度即为尿中有机汞的浓度.
4.2仪器
4.2.1缓冲瓶.4.2.3容量瓶：50mL，100mL.4.2.4具塞比色管：10mL.4.2.6具塞聚乙烯塑料瓶或试管：50mL. 4.2.5恒温水浴箱：室温~100C，控温精度：土1C.4.2.7冷原子吸收光谱仪（测汞仪），波长253.7nm，载气流量1.0L/min~2.0L/min.
4.2.2汞蒸气发生瓶.
4.3试剂
4.3.1实验用水：去离子水，电阻率≥18.2MQΩ-cm.4.3.2盐酸（HC1）：pa=1.19g/mL，优级纯.4.3.3氢氧化钠（NaOH）：优级纯.4.3.4磷酸三丁酯（CHPO）：抗泡剂，分析纯.4.3.5DL-半胱氨酸（CH NOS）：优级纯.
4.3.7锡校（Sn）：分析纯. 4.3.6氯化亚锡（SnCL）：优级纯.4.3.8硫酸镉（CdSO）：优级纯.的氢氧化钠溶液.4.3.10DL-半胱氨酸溶液：称取1gDL-半胱氨酸，加入5mL去离子水和1mL盐酸，溶解后加去 离子水至100mL，配制成浓度为10g/L的DL-半胱氨酸溶液.4.3.11汞保存液：将DL-半氨酸溶液用去离子水稀释成浓度为0.5g/L的汞保存液.4.3.12氯化亚锡溶液：称取50g氯化亚锡，加入15mL盐酸，加热助溶后，加去离子水至50mL，4.3.13硫酸镉溶液：称取5g硫酸镉，加去离子水溶解后定容至50mL，配制成浓度为100g/L的硫 配制成浓度为1000g/L的氯化亚锡溶液，加入数粒锡粒，4C条件下保存.酸镉溶液.4.3.14总汞还原剂：临用前将氯化亚锡落液和硫酸镐落液等体积混合.4.3.15无机汞还原剂：临用前将氯化亚锡溶液和去离子水等体积混合.4.3.16汞标准溶液：汞的单元素标准溶液. 4.3.17汞标准应用液：临用前用汞保存液将汞的单元素标准溶液稀释成浓度为0.500μg/mL的标准应用液.
4.4样品的采集、运输和保存
4.4.1样品的采集：依据GBZ/T295的要求采集50mL尿样，分出5mL用于测定尿肌酐，其余尿样按1%的体积比例加入DL-半胱氨酸溶液.4.4.2样品空白的采集：用具塞聚乙烯塑料瓶采集去离子水作为样品空白.4.4.3样品的运输和保存：将采集后的样品和样品空白置于清洁容器中冷藏运输，样品置于4C条件下可稳定保存14d.
4.5分析步骤
4.5.1标准系列溶液的配制与测定：取6支10mL具塞比色管，分别准确量取不同体积汞标准应用液，0.0μg/L～25.0μg/L的汞标准系列溶液.将汞标准系列溶液和汞蒸气发生瓶置于60C恒温水溶箱中 各加入0.5mLDL-半胱氨酸溶液和2.0mL氢氧化钠溶液，用去离子水定容至刻度，配制成浓度为水浴30min，依次将10.0mL标准系列溶液分别全部转入汞蒸气发生瓶中，各加1滴磷酸三丁酯和1.0mL无机汞还原剂，立即盖紧汞蒸气发生瓶瓶盖，参照仪器测定条件用冷原子吸收光谱仪进行检测.以测得的汞吸光度值与汞的浓度（ug/L）计算线性回归方程.
4.5.2样品处理与测定：将尿样和样品空白从冰箱中取出，放置至室温后，充分摇匀.取2支10mL2.0mL氢氧化钠溶液，用去离子水定容至刻度，混匀.将样品溶液、样品空白溶液和汞蒸气发生瓶置 比色管，准确量取2.00mL尿样或样品空白置于比色管中，再分别加入0.5mLDL-半胱氨酸溶液和于60C恒温水浴箱中水浴30min，再将尿样、样品空白分别全部转入汞蒸气发生瓶中待测.
4.5.2.1总汞的测定：向汞蒸气发生瓶中分别加1滴磷酸三丁酯和1.0mL总汞还原剂，立即盖紧汞蒸气发生瓶瓶盖，用测定标准系列落液的仅器条件进行检测，测得样品溶液和样品空白溶液的吸光度值 后，由回归方程得样品溶液中总汞的浓度（μg/L），
4.5.2.2无机汞的测定：向汞蒸气发生瓶中加1滴磷酸三丁酯和1.0mL无机汞还原剂，立即盖紧汞蒸气发生瓶瓶盖，用测定标准系列落液的仅器条件进行检测.测得样品溶液和样品空白落液的吸光度值后，由回归方程得样品溶液中无机汞的浓度（μg/L）.
4.5.2.3若样品溶液中汞的浓度超过测定范围，需要重新取尿样用去离子水进行稀释后，再准确量取 2.00mL稀释后的样品测定，计算时乘以稀释系数.
4.5.3质量控制：检测过程质量控制应按照GBZ/T295的要求进行.
4.6计算
4.6.1按式（1）计算尿液样品中总汞的浓度：
P=P×5×f...(1)
式中：
p尿液样品中总汞浓度，单位为微克每升（μg/L）：测得定容10mL样品溶液中总汞浓度，单位为微克每升（μg/L）：5取2mL尿样定容到10mL比色管中尿样的稀释系数：f尿样超过测定范围取原尿样稀释后检测的稀释系数.
4.6.2按式（2）计算尿液样品中无机汞的浓度：
P=P×5×f.. (2)
式中：
P尿液样品中无机汞浓度，单位为微克每升（μg/L）：P--测得定容10mL样品溶液中无机汞浓度，单位为微克每升（μg/L）：5-取2mL尿样定容到10mL比色管中尿样的稀释系数：f尿样超过测定范围时取原尿样稀释后检测的稀释系数.
4.6.3按式（3）计算尿液样品中有机汞的浓度：
式中：
P-尿液样品中有机汞浓度，单位为微克每升（μg/L）：p尿液样品中总汞浓度，单位为微克每升（μg/L）：p尿液样品中无机汞浓度，单位为微克每升（μg/L）：
4.6.4按式（4）计算尿总汞、无机汞和有机汞的肌酐校正结果：
P=
式中：
尿液样品中总汞、无机汞、有机汞浓度，单位为微克每克肌酐（μggCr）： A尿液样品中总汞、无机汞、有机汞浓度，单位为微克每升（μg/L）：Cr尿液样品中肌酐的浓度，单位为克每升（gL）.
4.7说明
4.7.1本方法尿中总汞的检出限为0.7μg/L，定量下限为2.5μg/L（以取尿液样品2.00mL计）， 定量测定范围为2.50μg/L~125μg/L：方法精密度为1.1%~2.2%，加标回收率为98.7%~100.2%（加标浓度为10.8μg/L~83.5μg/L，n=6）.
4.7.2本方法尿中无机汞的检出限为0.5μg/L，定量下限为1.6μg/L（以取尿液样品2.00mL计），定量测定范围为1.60μg/L~125μg/L：方法精密度为1.4%~2.9%，加标回收率为100.4%~104.2%（加标浓度为5.0μg/L~100.0μg/L n=6）.
