中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 1203-2003
Protocol of the qualitative polymerase chain reaction for detecting genetically modified plant ponents in edible oil
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准由国家认证认可应督管理委员会振出并归口. 本标准思草单位：中华人民共和医广州出人资检验投疫局.本标准主要起草人，取文，重洁、邓铃、图均究， 本标准系首次发布的检验检疫行业标准.
食用油脂中转基因植物成分定性 PCR检测方法
1范围
本标准现定了食用治脂中转基因植物成分的定性PCR检测方法，
本标准适用于由转基因火亚（Roundap Reedy）、王8（Bt176.Bt11 Mon810 T14/25) 油菜彤和棕好为家科加工而成特想务独和精练演中特基因成分的检面，
2编范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，凡是挂目期的引用文件，其随后的修放手（不包近谢误的内容）波参订版均不适用于本标准，然百敬助校据本标遵达成物试的各方研究 否可便用这业文件的最新版本，凡是不性目期的引用文件，其最新斯本逐用于本部车.
SN/T11时基因检验实新室批术要求 SN/T11H植物及其产品转基因成分检测抽种和制种方告SN/T115大豆袋基医或分定性PCR检离方 SN/T1196玉米中持基因成分定性PCR检岗方5N/T1197油票杆中转基图成分笔生PC8检揭方提 SN/T119花转基器成分定推验岗PCR方载SN/T1204植物及其加工产品中转基因藏分实时发光PCR定性推轮方法 SN/T1202食品中转基器框物成分定性PCK检方法
3推赔
下列编畸语适用于本标准，
3. 1 PCR polymerase chain rettios Rf PCR 3.2DNA.deoayribonudeic scid.段氧械胞核能. 3. 3 dNTP deoxyribomcleoside triphosphate-鼠氟根资三确酸.3.5 dCTP:deexycyriine tripbosphete-&K的管三需部 3.4cATP:decxyadeNOSine uiphosphate.取银s三确& 3.6dGTP deoxyguaNOSine triphosphane，鼠航A1三磷数. 3. 7 dUTP;deoxyuridne triphosphatt 显氧果世三桶 3.8bpibase pair，基对.3.97eg M.DNA 聚合. 3. 10Tris:tris(hydroxymethyDaminomethane三(帮甲基)氨福甲能.3. 11 TE Tris-CI.EDTA 9冲&. 3.12Lectin输物凝基军.3.13ZEIN，植物醇济蛋白.
2002-C0Z11/NS
3.14PEs-PEPcestphohoenmveCarboxlast，错酸好那式丙酮能化别.3.15tRNALen提物叶绿体基区. 3.16CaMV 35S35Spromoter fromeauliflower mic virus，案自于花得尾花叶病毒的35S启动子.3.17NOS:terminatoe of sopaline synthase gene显国合或酮基四终止子. 3. 18 FMV35S 3SS prometer from e mo&fied figeort mtsaie virus (caulimovirus group) 鲁 花3. 19NPTIl neomyeir-3-phosphstrensfease gese 影等紧-3'-确酸转移募基因. 病粤35s店动子.3.20BAR ghoghinoteidn aoetyltransfense gnme fro Bacillo aylaliguefecis 来 B F F 贵 Berilai cmyofigarfaceu革T确乙能转移蒸因.3.21PATphosphinothritin acetyltrans5erase gent.单T乙能转移M基器 3.22GOXglyphosete osidoreductase geme.事甘期氧化迁源脂基因.
4防污染推施
食用油清中转基因植智或分检最过程的助污乘播施应养合SN/T1193的规定.
5抽样与制杆
食用淮脂中转基因植管或分检验的抽样与制样方然按展SN/T1194规定的方助执行.
6到定方准
6.1原理
过聚合胸值式反应（PCR）教术，特异性扩增外源基团的DNA片新.福据PCR扩增继果，判断试食用编 植物性食用往墅经过提取DNA后，根据布油用的转基器植物距料所输人的外显基因设计引物.通中是否含有转基园成分.
6.2主要质
6.2.4消毒灭菌.
6.2.5核股蛋白分析仅.
6.2.6商速冷陈离心机，台式小星离心机，Mini个人两心机.
6.2.7低温冰箱，玲藏冷冻冰箱，
6.28纯水福，双要水器
6.2.9制冰机.
6.2.10浆买.
6.2.11恒温塔养柜
6.2.12智疆水脂.
6.3主要试剂
除另有我定外医有试列均米用分所纯税生化试用.
6.3.1实验用水：应符合GB/T6582中版水的规格.
6.3.2RNae 拖液：用寄过的去高子水或双盛水据然RNAse-A球干品，格解的依度为10 g/1分装后干一20℃保存，准免发复东基
6. 3.3 CTAB B取B:CTAB 20 g/L 其ft情 1 4 mol/L Tris 0. 1 mol/L Na EDTA 0. 02 mol/LM2
盐缴或氧氧化情调节pH至6.0
6.3.5无水乙醇、员丙醇等有机试期，6.3.8引1物
6.3.4担体：非转基器、非民一物种的植物或动物基因组DNA.
转基四推物性食用油脂检测内票基因和外据基因带选检测医用的引物序列见表1，
表1检测植参性食用波腊中内源基因和持选检到外源基因的引物序列
PCR产物 大小/ 器性版PE>PEPoo E：5'-gtgpngt3 ：5'-agrgccgcagn3Leesin gg E:5'-guetctactaecoocets-3 118 内家基 大豆 大型152 236ZEIN VR E:Fgpgmnguappwgwguo-3 373 内送基园 玉米狼RNALee E:5’cgastgggacgctarg-3′ 380 推物[5'-catgapetetgcet? 叶体 U.装墨国大（RoundapCaCV31s EF'-mreectegggeng-1 i5'-cstarngcgalaagg-3’ 166 Mee1 T14/25) # 8 肝为原科的 Reedy) 3 东 (Bt176 Be11;Bgcageg- 5′agetccsaagect°FMV35S E-goctemggtotg- :5′ngctcgatgigacaag-3” 196 外源区 :5tetargta3 E:5gcetgnpxgtg- 180 认基调大豆(Rouro Resy) 3 来 (B1 GAI1.) NOS E5'aomg 区，5 365 外源 创和核好为原料的他NPTII iE 5'-aaatrtectguatet-3′ I71 外源区L5′gocgnggmgggtr 183 科的理PAT i5gmgcetmogesee-3’ 为思的油BAR 区.-tgigtag IE 5'-acasgacgmaacmoe-3’ 175 外源生：以维叠孵 大交.五术，都样为原系加工的业用始是争其他务目的基提验测矿物序列死5N/T1202 SN/T 1196 S%/T 1197 B SN/T 1199
