中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.64-2001
实验动物 猴痘病毒检测方法
Laboratory animalMethod for examination ofSimian Poxvirus(SPV)
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前 言
本标准规定了痘病毒的检测方法. 猴痘病毒属人兽共患病原，猕是获症病毒的自然宿主，猴痘病毒是普通级猴和SPF的必检项目，因此增加该病毒的检测方法.本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.本标准起草单位：中国实验动物学会.本标准主要起草人：田克恭.
中华人民共和国国家标准
实验动物 猴痘病毒检测方法
GB/T 14926-64-2001
Laboratory animal-Method for cxamination ofSimian Poxvirus (SPV)
1范围
本标准规定了痘病毒（SPV）的检测方法、试剂等.
本标准适用于SPV的检测.
2引用标准
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.
GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.51-2001实验动物免疫酶试验
3原理
痘苗病毒与SPV有密切的抗原关系.根据免疫学原理，采用痘苗病毒抗原检测猴血清中SPV抗体.
4主要试剂和器材
4.1试剂
4.1.1.1特异性抗原：在生物安全柜内，用痘苗病毒感染BHK21细胞，接种2~3d后，当病变达十十~十十十时收获.冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.
4.1.1.2正常抗原；BHK21细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片面获得的上清液.
痘苗病毒接种BHK21细胞，接种后1~2d.病变达时，在生物安全柜内，用胰酶消化分散，PBS洗涤，涂片，室湿干媒的同时，在紫外线下20cm处照射30min，冷内酮间定10min，一20C保存.
痘苗病毒抗原免疫的猴血清.
4.1.4阴性血清
无SPV、痘苗病毒感染的薪血清.
4.1.5酶结合物
