中华人民共和国国家标准
GB/T15670.23-2017部分代GB/T15670-1995
农药登记毒理学试验方法 第23部分：致畸试验
Toxicological test methods for pesticides registration-Part 23:Teratogenicity study
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T15670《农药登记毒理学试验方法》分为以下部分：
第1部分：总则；第2部分：急性经口毒性试验霍恩氏法：第3部分：急性经口毒性试验序贯法； 第4部分：急性经口毒性试验概率单位法；第5部分：急性经皮毒性试验；第6部分：急性吸人毒性试验；第7部分：皮肤刺激性/腐蚀性试验；第8部分：急性眼刺激性/腐蚀性试验； 第9部分：皮肤变态反应（致敏）试验；第10部分：短期重复经口染毒（28天）毒性试验：第11部分：短期重复经皮染毒（28天）毒性试验；第12部分：短期重复吸人染毒（28天）毒性试验：第13部分：亚慢性毒性试验； 第14部分：细菌回复突变试验；一第15部分：体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验；-一第16部分：体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验；第17部分：哺乳动物精原细胞/精母细胞染色体畸变试验； 第18部分：嘀齿类动物显性致死试验：第19部分：体外哺乳动物细胞染色体畸变试验：第20部分：体外哺乳动物细胞基因突变试验：-第21部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS）试验：第23部分：致畸试验； 第22部分：体外哺乳动物细胞DNA损害与修复/程序外DNA合成试验：第24部分：两代繁殖毒性试验；第25部分：急性迟发性神经毒性试验；第26部分：慢性毒性试验；第27部分：致癌试验； 第28部分：慢性毒性与致癌合并试验；第29部分：代谢和毒物动力学试验.本部分为GB/T15670的第23部分.本部分部分代替GB/T15670-1995《农药登记毒理学试验方法》. 本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本部分与GB/T15670-1995的致畸试验部分相比主要变化如下：修改和调整了标准的总体结构和编排格式；增加了部分章节内容（见第1章、第2章、第3章、第5章、第6章、7.1和第9章）；一修改了剂量和分组的内容（见7.3，1995年版的15.5）： 修改了对实验动物的要求（见7.2.1995年版的15.3）；
在体表、内脏和骨骼检查项目中，删去了检查项目表格（见7.4.4.2、7.4.4.3和7.4.4.4.1995年版的15.9.3和15.9.4);一内脏和骨骼观察中，增加了观察程序、骨骼染色方法和家免内脏观察和骨骼观察的内容（见7.4.4.3 和 7 4.4.4 1995 年版的 15 9.4).本部分由中华人民共和国农业部提出并归口. 本部分起草单位：农业部农药检定所.本部分主要起草人：李宁、张丽英、陶传江.本部分所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T 156701995
农药登记毒理学试验方法 第23部分：致畸试验
1范围
GB/T15670的本部分规定了致畸试验的基本原则、方法和要求.本部分适用于为农药登记而进行的致畸试验.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB14925实验动物环境及设施
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
致畸性teratogenicity
在胚胎发育期引起子代永久性结构和功能异常的化学物质的特性.
母体毒性maternal toxicity
引起亲代雌性妊娠动物直接或间接的健康损害效应.
4试验目的
检测妊娠动物接触受试物后引起的子代致畸可能性.
5试验概述
将性成熟期的雌性动物与雄性动物进行交配，将确认怀孕的雌性动物随机分配到各个剂量组，在妊娠动物的胚胎发育器官形成期给予受试物染毒，并在子代预期出生前将母体处死，取出子宫，检查吸收胎、活胎、死胎及胎仔的外观、内脏和骨骼畸形情况.
6仪器与试剂
6.1仪器
实验室常用设备、生物显微镜及体视显微镜、游标卡尺（百分尺）等.
6.2试剂
6.2.1茜素红贮备液：茜素红饱和液（溶剂为50%乙酸）5.0mL、甘油10.0mL、1%水合氯醛60.0mL混合，放入棕色瓶中（适用于不剥皮法骨骼染色）.存于棕色瓶中， 6.2.2茜素红应用液：取贮备液3 mL~5 mL 用1 g/100 mL~2 g/100 mL氢氧化钾液稀释至 1 000 mlL 6.2.3茜素红溶液：茜素红0.1g、氢氧化钾10g.与燕馏水1000mL混合临用前配制（适用于剥皮法骨骼染色）.6.2.4透明液A：甘油200mL、氢氧化钾10g，与蒸馏水790mL混合.6.2.6固定液（Bouins液）：2，4，6-三硝基酚（苦味酸）饱和液75份、甲醛20份，与冰乙酸5份混合. 6.2.5透明液B：甘油与蒸馏水等量混合.
7试验方法
7.1受试物配制
浮于适当的溶剂或介质中，液体受试物可直接使用或稀释后使用.根据受试物的理化性质选择所用的 受试物应新鲜配制，如果有资料表明其溶液储存稳定，也可不必新鲜配制.固体受试物应溶于或悬溶剂或介质，通常首选溶剂为水，不溶于水的受试物可使用食用油（如橄榄油、玉米油等），不落于水或油的受试物可使用甲基纤维素钠、淀粉等配成混悬液.
7.2实验动物
7.2.1动物选择
验开始时动物体重差异不应超过同性别平均体重的土20%.所用动物应注明种类、品系、性别、体重和 试验首选动物为大鼠或家免.选用健康、性成熟的雄性动物和性成熟的未经交配的雌性动物，试周龄.
7.2.2动物性别和数量
动物适应5d~7d，雌性和雄性动物通常按1：1或2：1比例合笼交配，为了获得足够的胎仔来评价受试物的致畸作用，每个剂量水平的妊娠动物，大鼠至少16只，家兔至少12只.
7.2.3饲养条件
饲养， 实验动物饲养条件应符合GB14925的有关规定.实验期间自由饮水和摄食，妊娠动物应单笼
7.3剂量及分组
试验至少设3个试验剂量组、一个阴性对照组和一个阳性对照组（首次开展致畸试验的实验室或人员，应增设阳性对照组）.高剂量原则上应使部分孕鼠或孕兔出现毒性反应，如体重轻度减轻，如果母体 动物有死亡发生，应不超过母体动物的10%；低剂量组不应出现可观察到的毒性作用；在高剂量和低剂量间可按儿何级数设计中间剂量.试验剂量的设计参考急性毒性、短期重复经口染毒毒性、亚慢性毒性、人体实际摄人量等资料进行，最好通过预试验进行剂量设计，阴性对照组除不给受试物外，其余处体重）、呵斯匹林（250 mg/kg体重~300 mg/kg体重）及维生素A(7500μg/kg体重~13 000μg/kg体 理均同剂量组.大鼠常用阳性对照物为敌枯双（0.5mg/kg体重~1.0mg/kg体重）、五氯酚钠（30mg/kg2
