中华人民共和国国家标准
GB/T 20188-2006
小麦粉中溴酸盐的测定 离子色谱法
Determination ofbromate inwheat flour-Ionchromatographymethod
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布
前言
本标准的附录A为资料性附录.
本标准由国家质量监督检验检疫总局提出.
本标准由全国粮油标准化技术委员会归口.
本标准参加起草单位：中国科学院生态环境研究中心化学与生态毒理学国家重点实验室、上海天美科学仪器有限公司、浙江方圆检测集团.
本标准主要起草人：潘炜、郑顺利、崔海容、牟世芬、徐国平、陈自立、于利军、胡德聪、王棚林、李伟明、陈建华、郭坚.
小麦粉中溴酸盐的测定离子色谱法
1范围
本标准规定了采用离子色谱测定小麦粉和小麦粉品质改良剂中澳酸盐的原理、试剂和材料、仅器、样品制备、离子色诺测定、计算及精密度.
本标准适用于小麦粉和小麦粉品质改良剂中溴酸盐的测定.
本标准检出限为0.5mg/kg（以BrO计）.
2原理
用纯水提取样品中溴酸根离子（BrO），经Ag/H柱除去样品提取液中干抗氯离子（CI）超滤法除去样品提取液中水溶性大分子，采用离子交换色谱-电导检测器测定，外标法定量.
3试剂和材料
3.1硫酸溶液c（H;SO）=50 g/L.3.2硝酸银溶液c（AgNO）=50 g/L.3.3氯化钠溶液c（NaC1)=0.5%（质量分数）.3.4强酸型阳离子交换树脂（H型）：732"强酸型阳离子交换树脂（总交换容量≥4.5mmol/g）用水浸泡，用5倍体积去离子水洗涤3次、用1倍体积甲醇洗涤、再用5倍～10倍体积高纯水分数次洗涤，至清洗水无色澄清后，尽量倾出清洗水，加人2倍体积的硫酸溶液（3.1)，用玻璃棒搅拌1h，使树脂转为H型，先用去离子水洗至接近中性，然后用高纯水洗，至清洗水的pH值约为6，将树脂转人广口瓶中覆盖高纯水备用.
注：可采用商品化的H型阳离子交换树脂柱OnGuardⅡH柱（1 0cc），或同等性能的其他柱子.
3.5强酸型阳离子交换树脂（Ag型）：取一定量处理好的H型阳离子交换树脂（3.4)，加人2倍体积的硝酸银溶液（3.2)，用玻璃榜搅拌1h，使树脂转成Ag型，先用5倍体积去离子水分数次洗涤，然后用5倍～10倍体积的高纯水分数次洗涤树脂，用0.5%氯化钠溶液检验清洗水，直至不出现白色浑浊为止，将树脂转人广口瓶中覆盖高纯水备用.
注：可采用商品化的Ag型阳离子交换树脂柱OnGuardIl Ag柱（1.0cc)，或同等性能的其他柱子.
3.7BrO标准储备溶液（1000μg/mL）：准确称取KBrO，基准试剂（相对分子质量167.00，含量≥99.9%）0.1310g，用高纯水溶解并定容至100mL，配成含BrO1000μg/mL标准储备液，置于棕色瓶中4C下保存，可稳定2个月.3.8BrO标准稀释液（100pg/mL):吸取BrO标准储备液10.0mL 用高纯水定容至100mL，BrO 浓度为 100μg/mL.2.0mL.2.5mL、3.0mL，用高纯水定容至50mL，该标准工作曲线浓度为：0pg/ml、1.0pg/ml、 3.9BrO标准工作曲线溶液：分别取BrO标准稀释液（3.8）0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2. 0 μg/mL、3.0μg/mL、4.0μg/mL、5.Oμg/mL、6. 0μg/mL.若采用 200μL大体积进样时，标准工作曲线溶液需进行适当稀释.
3.6层析柱：0.8cm（内径）×10cm（高）层析管.
GB/T20188-2006
3.10相关阴离子标准储备溶液：配制与小麦粉基底相关的阴离子储备液（见表1）.注：可选项，该储备溶液供配制阴离子标准混合工作溶液时使用.
表1相关离子标准储备液的配制
序号 1 2 3 4 5 6名称 NaF KNO KBr NaCI ON"N Na; SO 称量/g 0.221 0 163 0 149 0 165 0 150 0 148定容体积/ml 100阴离子浓度/（pk/mL） 1 000序号 7 10 118 9名称 HCOXNs 2H:O CH COXNa 甲酸钠 乙酸钠 磷酸氢二钠 N; HPO 12H:O C;H;Q • 2HO 享酸 CHO • H;O 柠檬酸称量/g0 231 0 139 0 373 0 143 0 111定容体积/mL 100阴离子浓度/（pg/mL） 1 000
3.11注：可选项，该标准溶液供调整柱分离条件和观察柱清洗条件时使用.
表2相关离子标准混合工作液的浓度
序号 1 2 3 4 5 6 7 8 g 10 11 12离子种炎 F" BrO CI" NO; NO Br” SO- HPO 乙酸根甲酸根 草酸根 柠棕酸根吸取储各液/ 0 6 2 0 2 5 2 0 2 0 2 0 2 0 2.0 2 0 1 0 2.0 3 0 m.定容/ml. 100阴离子浓度/(μR/mL) 6 20 25 20 20 20 20 20 20 10 20 30
3.12石油醚：分析纯，沸程（30~60）C.3.13除另有说明外，所用试剂为分析纯，所用高纯水质量为18.2MΩcm，
4仪器
4.3振荡器.4.4离心机：4000r/min（50mL离心管）：10 000 r/min（1.5mL离心管）.2
4.1离子色诺仪：配电导检测器.
4.2超声波清洗器.
4.50.2m水性样品过滤器.4.6超滤器：截留相对分子质量10000（MWCO10000），样品杯容量0.5mL，进样量为200pL时使用容量为4mL样品杯.注：可采用 milipore microcon YM-10 型、Amicon Ultri-4 型及同等性能的超滤器.
4.7分析天平：感量0.1mg.
4.8移液器：0.1mL~1mL.
5样品制备
5.1提取
5.1.1小麦粉
置振荡器上振荡20min（或在间歇搅拌下于超声波中提取20min），静置，转移20mL上层液于50mL 准确称取10g（精确至0.1g）小麦粉于250mL具塞三角瓶中，加人100.0mL高纯水，迅速摇匀后离心管中，3000r/min离心20min，上清液备用.
5.1.2含油脂较多的试样
准确称取10g（精确至0.1g）于100mL烧杯中，加人30mL×3次石油醚（3.12）洗去油脂，倾去石油醚，样品经室温干燥后按5.1.1中“加人100.0mL高纯水，-上清液备用"操作.
5.1.3包子粉、面包粉等小麦粉品质改良剂
根据BrO含量的不同准确称取（0.2~1）g（精确至0.001g），用高纯水溶解并定容至50.0mL，经0.2pm的水性样品滤膜过滤后直接进行色谱测定.
5.2净化
5.2.1Ag/H柱去除样品提取液中的CI：将H型树脂（3.4）慢慢倒入关闭了出水口的层析柱（3.6）中，用玻璃棒搅动树脂赶出气泡，并使树脂均匀地自然沉降，装人2mL树脂后（约3cm高），再慢慢装人2mLAg型树脂（3.5），不要冲击已沉降的H型树脂，尽量保持两层树脂界面清晰，待Ag型树脂完全沉降后，打开出水口，控制流速为2mL/min，加10mL高纯水冲洗，待柱中的水自然流尽后，立即将5.1.1中准备好的样品溶液沿柱内壁加人，不要冲击树脂表面，弃去前5mL流出液，收集其后2mL流出液进行下一步净化.若使用商品化的（OnGuardⅡlAg/H）脱CI柱时，按产品说明书操作.对含C1量在1g/kg以下的小麦粉，也可省略此条操作.
5.2.2超滤法去除样品提取液中的水溶性大分子：将5.2.1中收集液经0.2pm的水性样品滤膜过滤后注入4.6中超滤器样品杯中，于10000r/min下离心30min进行超滤，超滤液直接进行色谱分析.按5.1~5.2规定的条件进行空白小麦粉实验.
6离子色谱测定
6.1梯度色谱条件
护柱）. 6.1.2流动相：DIONEXEG50自动淋洗液发生器，OH-型.6.1.3抑制器：DIONEXASRS4mm阴离子抑制器：外加水抑制模式，抑制电流100mA.6.1.4检测器：电导检测器，检测池温度：30C.
6.1.1 色谱柱;DIONEX IonPac AS19 4mm× 250 mm （带 lonPac AG19 4mm×50 mm 保
