中华人民共和国国家标准
GB/T22288-2008
植物源产品中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、 三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸的测定 气相色谱-质谱法
Determination ofmelamine.ammeline.ammelide and cyanuricacidin originalplantproducts-GC-MSmethod
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准附录A、附录B和附录C均为资料性附录.本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局.本标准主要起草人：李淑娟、李刚、李建中、安娟、陈冬东、蔡会霞、丁涛、蒋原、彭涛、代汉慧、唐英章.
植物源产品中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、 三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸的测定 气相色谱-质谱法
1范围
本标准规定了植物源产品中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸测定的气相色谱/质谱检测方法.
本标准适用于小麦粉、玉米粉、大米粉中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸含量的测定.
2原理
试样用溶剂提取，提取液经氮吹仪浓缩后用硅烷化试剂衍生，使用GC-MS在选择监测离子模式下对三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸进行检测和确证，外标法定量.
3试剂与材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或相当纯度的水.
3.1二乙胺.3.2乙晴：色谱纯.3.4硅烷化试剂：含有1%三甲基一氯硅烷（TMCS）的N.O-双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）. 3.3吡啶：纯度≥99%3.5提取溶剂：二乙胺-水-乙睛（104050，体积比）.3.6三聚氰胺：纯度≥99.0%，CAS编号：108-78-1.3.7三聚氰酸二酰胺：纯度≥99.0%，CAS编号：645-93-2.3.8三聚氰酸一酰胺：纯度≥99.5%，CAS编号：645-92-13.9三聚氰酸：纯度≥99.0%.CAS编号：108-80-5 3.10标准储备溶液：分别称量10.0mg（精确到0.1mg）的标准品，用二乙胺-水（2080，体积比）.超声溶解并分别定容于100mL容量瓶中，一18C以下冷冻避光保存，有效期3个月.3.11混合标准中间溶液：分别移取1.0mL四种标准储备液于同一10mL容量瓶中，用提取溶剂（3.5）定容，充分摇匀，得到浓度为10.0μg/mL的混合标准工作液.0℃~4℃C冷藏避光保存，有效期1个月.
4仪器和设备
4.1气相色谱-质谱联用仪：配有电子轰击（EI）源.4.2天平：感量为.0.1mg和0.001g4.4氮吹仪. 4.3超声波清洗器.4.5离心机.4.6涡旋混合器.
GB/T 22288-2008
4.7样品粉碎机：配40目样品筛.
4.8恒温培养箱.
5试样制备和保存
取有代表性的样品，用密封袋或样品瓶封装后于0C～4℃保存，每份样品量应大于100g，并标明标记.如果样品颗粒较大，应用样品粉碎机将其粉碎并使其全部通过40目的样品筛后再保存.制样操作过程中应防止样品受到污染或发生含量的变化.
6分析步额
6.1提取
称取试样0.5g（精确至0.001g）于50mL具塞离心管中，加人20mL提取溶剂（3.5）涡旋1min，超声提取30min.然后于4000r/min下离心5min，取200L上层清液于10mL尖底具塞玻璃比色管中，在70℃下经氮气吹干.
6.2衍生化
向吹干后的比色管中加入300guL毗啶（3.3）和200μL硅烷化试剂（3.4），超声1min，涡旋1min后于70C下衍生45min，衍生化溶液供气相色谱-质谱测定.
6.3测定
6.3.1气相色谱-质谱条件
a）色谱柱：HP-5MS毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm，5%-苯基-甲基聚硅氧烷）或相当者； b）程序升温：初始温度为70℃C，保持1min；先以15C/min的速率升至250℃；再以30C/min的速率升至300℃并保持5min；c）进样口温度：280℃；d）色谱/质谱接口温度：280C；f)流速：1.0mL/min; e）载气：氮气；g）电离方式：EI；h）电离能量：70eV；i）离子源温度：230℃：j）四级杆温度：150C； k）监测方式：选择离子监测（SIM）方式：1）进样方式：不分流方式，溶剂延迟6min；m）进样量：1L;n）待测物保留时间、监测离子及相对丰度参见附录A.
6.3.2标准工作曲线
将混合标准中间溶液（3.11)逐级稀释至20 ng/mL 40ng/mL、100ng/mL 200ng/mL、400ng/mL的混合标准工作溶液，分别移取各浓度混合标准溶液0.5mL，于70C经氮气吹干后，按照6.2进行衍生化，供气相色谱-质谱分析测定.以标准工作溶液浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线.
6.3.3定性测定
在6.3.1仪器条件下，如果样品中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸的选择离子质量色谱图的保留时间与标准工作液相同，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选离子均出现， 并且所选择离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比在允许范围内（所选范围见表1），则可判定样品中存在对应的待测物.相关标准物质谱图参见附录B.
表1定性确证时相对离子丰度的最大允许相对偏差
相对高子丰度 %020% ~50% >10%~20% ≤10%允许的相对偏差 ±10% ±15% ±20% %05干
6.3.4定量测定
根据样液中被测物的含量情况，选定浓度相近的混合标准工作溶液.标准工作溶液和样液中被测物的浓度均应在标准曲线线性范围内.如果样液中被测物的浓度超出标准曲线线性范围，应按比例提高6.1中提取溶剂的体积，在6.3.1仪器条件下，三聚氰酸、三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚 氰胺的保留时间依次为9.9min、10.7min、11.4min和11. 9min.
6.3.5空白实验
除不称取试样外，均按上述分析步骤进行.
7结果计算
试样中待测物的含量按式（1)计算：
式中：
X-试样中待测物含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；ci-从标准工作曲线上得到的样液中待测物含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）；从标准工作曲线上得到的空白实验中待测物的含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）；V一样品溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）； s-稀释倍数；m-所称样品的质量，单位为克（g）.
8测定低限
本方法中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸的测定低限均为2.0mg/kg
9回收率与精密度
回收率及精密度数据参见附录C.
