中华人民共和国国家标准
GB/T28076-2011
Detection and identification of Liriomyza trifolii(Burgess)
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）提出并归口.
本标准起草单位：中国检验检疫科学院、中华人民共和国广东出人境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中华人民共和国云南出入境检验检疫局、中华人民共和国北京出人境检验检疫广西出人境检验检疫局.
本标准主要起草人：陈乃中、吴佳教、魏晓棠、刘海军、刘忠善、张俊华、江丽解、卢建、姜金林、黄丽莉、冯贤.
三叶斑潜蝇检疫鉴定方法
1范围
本标准明确了三叶斑潜蝇的检测、饲养、标本制作和室内鉴定等方法.本标准适用于进出境植物检疫、国内植物检疫和大田防治工作中的三叶斑潜蝇的检测、饲养和鉴定.
2术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
2. 1 内顶景inner verticals单眼三角区后侧面2对黎靠内的1对.
2.2外顶蔡outer verticals 单眼三角区后侧面2对黎靠外的1对累.
2.3后顶景postverticals位于单眼三角区后方的1对黎.
2.4 vibrissae位于口器上面颊下角部位最粗的1对累.
2.5上眶架upper orbitals 位于眼眶上半部的黎.
2.6下眶蔡lower orbitals位于眼眶下半部的黎.
2.7 旺毛orbital setulae着生于眼眶部位的细毛.
2.8盾片scutum 双翅目昆虫中胸节背板位于盾间沟和小盾沟之间的骨片.
2.9中侧片 anepisternum中胸节的上前方侧片，是位于背侧片与腹侧片之间、翅侧片之前的大型骨片.
2.10 腹侧片katepisternum中胸节的下前方侧片.是位于中侧片下方的一近似三角形的骨片.
2. 11
端阳体distiphallus
雄成虫阳茎的端部构造，又称阳茎端.
3三叶斑潜蝇基本信息
学名 ;Liriom yza rrifolii (Burgess 1880) .
异名 ;I alliorora Frick 1925.
俗名 ： American serpentine leafminer serpentine leaf miner 和 chrysanthemum leaf miner.
斑潜蝇属在全世界已知共370余种，属内形态上与三叶斑潜蝇近似的重要多食性种类还有美洲斑潜蝇L. sazivuze Blanchard、南美斑潜蝇L.hxidobreasis（Blanchard）和番茄斑潜蝇L. bryoniae Kalten-bach.
三叶斑潜蝇的其他信息参见附录A
4方法原理
虫或蝇虫样，何养获得成虫，解剖制作雄外生殖器标本，用显微镜观察，根据形态特征对种类进行判定. 根据三叶斑潜蝇的危害状，在检疫现场或发生疑似三叶斑潜蝇的田地，肉眼观察寄主叶片，取得幼
5器材和试剂
5.1器材
昆虫针、滴管、培养Ⅲ、载玻片、盖玻片、体视显微镜. 可封口塑料袋、标签、培养Ⅲ、吸水纸、镊子、生物培养箱、小毛笔、指形管、纱布、冰箱、三角纸剪刀、
5.2试剂
荷燕尔胶（用阿拉伯树胶30g：蒸馏水50mL水合氯醛200g甘油20mL配方配制面成）、树脂胶、无水乙醇、氢氧化钠或氢氧化钾、蒸馏水.
6检测与饲养
6.1检测
在检疫现场或发生疑似三叶斑潜蝇的田地，观察有关寄主植物叶片（参见附录A），如发现上表发圆形长约2.0mm的黄褐色粒.如发现疑似粒，用指形管盛装：如发现上述幼虫，摘取叶片，用可封 白、由细变租、弯曲甚至缠绕的疑似虫道，观察虫道末尾有无半通明的幼虫，并进一步查找附近有无长椭口塑料袋装，上述管、袋均加标签，或编号，记录时间、地点、寄主、采集人等，带回实验室.
6.2饲养
带虫叶片置于Ⅲ底铺有吸水纸的培养Ⅲ中，蛹盛于指形管中，用纱布扎口，防止羽化成虫逃逸，放人生物培养箱中25℃～30℃下培养.成虫羽化24h后可将指形管置于冰箱-1℃下不短于1h将成虫冷冻条死，
7标本的制作准备
7.1成虫标本
7.1.1针插标本
干的树脂胶作为粘虫胶：成虫翅向外方、头部露出、侧身粘在三角纸尖上：要有注明地点、寄主、羽化时间 成虫标本可制作为针插标本.其中，粘虫用的三角纸应用三角纸剪刀制作；可用荷燕尔胶或其他快等信息的标签.
7.1.2浸泡标本
保存. 也可以用无水乙醇浸泡保存成虫标本.但如果要备分子试验用，则可用无水乙醇浸泡，并冷冻
7.2雄外生殖器玻片标本
用昆虫针取下雄虫腹部（见附录B）投人5%氢氧化钠或氢氧化钾溶液中煮沸3min~5min（体视显微镜下观察，以骨质部分保留深色、肌肉脂肪等溶解为佳）；用滴管吸移至培养血装薄层蒸馏水中浸洗： 在体视显微镜下（载物台为白色背景）用细针解剖，除去背腹板等物，仅剩第9背板及其附属构造（雄外生殖器）：用针尖粘取第9背板及其附属构造至载玻片上荷燕尔胶滴中，体视显微镜下整姿，尽量使雄外生殖器构造在视野中为正面图像：封片：自然干燥或用烘箱45C24h烘干.
8实验室鉴定
将成虫标本置于体视显微镜下，雄外生殖器玻片标本置于显微镜下，观察是否符合以下鉴定特征（见附录B和附录C）.
8.1潜蝇科成虫的鉴别特征
体小或微小，长1.5mm～4.0mm.有，后顶黎分歧，上眶黎分歧，下眶祭内向.翅C脉仅在Sc脉端处折断，Sc脉端部退化为一祸痕或与R脉合并，R脉3分支直达翅缘.腹部扁平，雌第7节长而骨化，不能伸缩.
8.2植潜蝇亚科Phytomyzinae成虫的鉴别特征
Sc脉端部退化为一精痕，独立于R脉之基仲达前缘脉.
横脉. 上额眶架2对，眶毛后倾；小盾片通常为黄色：建C脉伸达M-脉端，它们终止于翅端附近，有第2
8.4三叶斑潜蝇的鉴别特征
8.4.1成虫
8.4.1.1头部
触角各节亮黄色；内、外顶均着生于黄色区域，至少外顶黎着生于黑黄交界处.
