T/CVA 中国蔬菜协会团体标准
T/CVA5-2026
Criteria for evaluating anthracnose resistance in chili pepper after artificial
inoculation
中国蔬菜协会发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准文件的结构和起草规则》的规定起草.
本文件由中国蔬菜协会提出并归口.
本文件起草单位:中国农业科学院蔬菜花卉研究所、重庆市农业科学院、广西壮族自治区农业科学院蔬菜研究所.
本文件主要起草人:周黛媛、王立浩、于海龙、苏强、王日升、张世才、王飞、高升华、张正海、曹亚从、吴华茂.
辣椒炭疽病抗性人工接种鉴定标准
1范围
本文件确立了取样规则、人工接种炭疽菌的方法、平均病斑直径的计算、辣椒炭疽病分级标准、辣椒炭疽病抗性划分标准和辣椒炭疽病抗性鉴定结果记载表.
本文件适用于辣椒抗炭疽病的人工接种鉴定.
2规范性引用文件
的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件:不注日期的引用文件,其最新版本(包括 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的修改单)适用于本文件.
GB/T8321.10农药合理使用准则(十)
NY/T1276农药安全使用规范总则
3术语和定义
3. 1
病斑直径lesiondiameter
取病斑的纵向最大长度和横向最大长度,二者平均值即为病斑直径.
3. 2
平均病斑直径average lesion diameter
全部病斑直径之和与接种点总数的比值.
病情指数disease index
通过对植物个体发病程度即病情级别数值的计算获得的群体发病程度的数值化描述,是描述发病严重程度的综合指标.
3. 4
辣椒炭痘病pepper anthracnose
由半知菌亚门炭疽菌属(Colletotrichum)真菌引起的病害.病原菌分类、菌落形态描述等见附录A.
4取样规则
田间耕作管理应均匀一致,整个生育期不进行病害防治,虫害防治中农药的使用应符合GB/T 8321.10 和 NY/T 1276 的规定.
于辣椒采收期,选择生长状况正常、无病害侵染的植株进行取样.应选择无机械损伤、
T/CVA 5-2026
无病害侵染、未失水和未萎嘉的辣椒青熟果进行取样.采用随机取样法,取15株辣椒,每株辣椒摘取3个果实,取样时应保证果柄与果实一并摘下.
5人工接种炭疽菌的方法
5.1炭痘菌和炭殖菌的活化
炭殖菌为炭疽菌属Colletotrichum致病生理小种.将在固体培养基上的炭疽菌用消毒的手术刀切成长和宽约8~9m的小块,放入新配制的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)中,28C倒置暗培养7~10d.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)的配制详见附录A.2.2.
5.2孢子悬浮液的配制
将8~9mm的炭疽菌菌块转接到马铃薯液体培养基中,将其在28土1C、200rpm的避光摇床上摇3~4d,诱导产生大量孢子,在超净工作台里将液体培养基用4层无菌的纱布过滤,除去菌丝以获得孢子悬浮液,用血球计数板在显微镜下计算孢子数量,用无菌水将孢 子悬浮液的浓度调整为5×10个/m,用于炭殖病的接种.马铃薯液体培养基的配置方法详见附录A.2.1.
5.3微量注射接种炭疽菌的流程
用自来水把果实表面冲洗30s,剪掉果柄.将果实在75%酒精中浸泡30s,期间不停翻滚果实使其表面充分与酒精接触.果实表面晾干.用10uL微注射器在果表面扎出一个深1m、直径0.4m的伤口,并注入1uL的孢子悬浮液.分级每株接种3个果实,每个果实接种3-5个点.病情指数调查15株.3次生物学重复.
5.4接种后保存条件
在26C下进行暗培养,湿度为80%~100%,接种炭疽菌7d后,对果实的病斑直径进行统计.
6平均病斑直径的计算
平均病斑直径以“ALD”计,数值以“mm”表示,按式(1)计算:
.(1)
式中:L一一病斑横向最大长度:L-一病班纵向最大长度:d-一果实接种总点数.计算结果精确到小数点后两位.
7辣椒炭疽病分级标准
辣椒炭殖病分级标准参见表1.
表1辣概炭疽病病情分级标准表
病情级别 0 无病症 病症1 0.4mm<单株平均病斑直径≤3mm3 3mm<单株平均病斑直径≤6mm5 9mm<单株平均病斑直径≤12mm 6m12m
8辣椒炭疽病抗性划分标准
辣椒炭疽病抗性评价标准参见表2.
病情指数以“DI”计,按式(2)计算:
S一一最高病情级别的代表数值:计算结果精确到小数点后两位. 式中:s--各病情级别的果实数:n--相对应病情级别的数值:N--调查总果数;
表2辣概炭疽病抗性评价标准表
病情指数(DI) 抗性评价DI=0 免疫(1)5<DI≤20 0<DI≤5 高抗(HR) 抗病(R)2040 感病(S)
9辣椒炭疽病抗性鉴定结果记载表
辣椒炭疽病抗性鉴定结果记载表参见附录B.