中华人民共和国国家标准
GB/T29661-2013
Determination of urea content in cosmetics-Enzymatic method
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由中国轻工业联合会提出. 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口.本标准起草单位：上海市日用化学工业研究所（国家香料香精化妆品质量监督检验中心）、大连市产品质量监督检验所.本标准主要起草人：崔俭杰、李琼、林燕、康薇、孙稚菁、吴海霞、毛希琴.
化妆品中尿素含量的测定 酶催化法
1范围
本标准适用于化妆品中尿素的定量测定，其定量下限为0.025%. 本标准规定了化妆品中尿素含量的测定方法一一酶催化法.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备
3原理
样品在偏酸性条件下，所含尿素被尿素酶分解为铵盐，用酸滴定，由此计算尿素含量.
4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯.水为GB/T6682规定的三级水.
4.1尿素酶：0.5g以下可将0.25g尿素于40℃C~45C在1h内完全分解.按照产品说明保存.4.20.1mol/L盐酸：配制方法按GB/T601.4.30.1 mol/L NaOH溶液：称取0.40 gNaOH固体，溶于100mL水中. 4.4无水乙醇.4.5塑料薄膜，
5仪器和设备
5.1高型烧杯，100mL.5.2酸式滴定管.5.3超声波清洗仪.5.4磁力搅拌器. 5.5pH计：精度0.01.5.6分析天平：感量0.01g.5.7恒温水浴锅.
6分析步骤
6.1试样制备
6.1.1水剂类、乳液类、膏霜类（0/W）样品
称取均匀样品0.5g（精确至0.01g）于高型烧杯中，加人50mL水，用塑料薄膜封口，超声提取20 min.
将高型烧杯放在磁力搅拌器上，边搅拌边滴加盐酸（4.2）中和至pH4.0（用pH计，不计量，若溶液呈pH4.0，再用盐酸（4.2）中和至pH4.0），加人0.2g粉碎较细的尿素酶（4.1）立即用塑料薄膜封口.置于50C水浴中不时的摇晃，30min后取出冷却至室温，边搅拌边用0.1mol/1.的盐酸（4.2）滴定至pH4.0，记录消耗的0.1mol/L盐酸标准溶液的体积V.同 时做一空白试验，记录消耗的0.1mol/L盐酸标准溶液的体积V..
6.1.2膏霜类（W/0）、油溶性样品
称取均匀样品0.5g（精确至0.01g）于15mL离心管中，加10mL无水乙醇（4.4），超声提取20min.以不低于5000r/min离心15min，将上清液全部转移至高型烧杯中，再加入40mL水，摇匀.
余下步骤与6.1.1相同.
6.1.3唇膏类样品
加热3min~5min使唇膏融化，涡旋1min，超声提取 20min.以不低于5000r/min离心15min，将上清 称取均匀样品0.5g（精确至0.01g）于15mL离心管中，加10mL无水乙醇（4.4），在80℃水浴中液全部转移至高型烧杯中，再加人40mL水，摇匀.
余下步骤与6.1.1相同.
6.2平行试验
按上述步骤，对同一样品进行平行实验测定.
7结果计算
按式（1）计算尿素含量，以%表示：
式中：
60.06-尿素的相对分子质量；V 样品消耗0.1mol/L盐酸标准溶液的体积，单位为毫升（mL）；V 空白试验消耗0.1mol/L盐酸标准溶液的体积，单位为毫升（mL）：C 0.1mol/1盐酸标准溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）；-试验样品质量，单位为克（g）.
计算结果保留至小数点后1位.
注：若检测尿累含量超过20%，需要以减少样品称样量的方式重新进行测定.
8方法定量限
化妆品中尿素的定量测定，其定量下限为0.025%.
9回收率
尿素含量在0.1%~20.0%范围内，回收率在95%~110%，相对标准偏差小于10%
10允许差
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%.
