中华人民共和国国家标准
GB/T30087-2013
Determination of pheylbutazone in cosmetics by high performanceliquid chromatography method
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草.
本标准由全国质量监管重点产品检验方法标准化技术委员会（SAC/TC374）归口，
本标准起草单位：国家化妆品质量监督检验中心（北京）、北京市海淀区产品质量监督检验所、中检联盟（北京）质检技术研究院.
本标准主要起草人：王浩、刘艳琴、史海良、杨红梅、穆同娜、田艳玲.
化妆品中保泰松含量的测定方法 高效液相色谱法
1范围
本标准规定了化妆品中保泰松含量的高效液相色谱测定方法.本标准适用于水剂类、膏霜乳液类、唇膏类等化妆品中保泰松的测定.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
样品经含2%氨水的甲醇溶液超声提取，富集提取液后，用高效液相色谱仪测定，外标法定量，液相色谱/质谱确证.
4试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.
4.1氨水. 4.2乙酸铵.4.3氯化钠.4.4四氢呋哺：色谱纯.4.5甲醇：色谱纯. 4.6乙晴：色谱纯.4.72%氨水的甲醇溶液：移取10mL氨水（4.1）至500mL容量瓶中，甲醇（4.5）定容.4.8乙晴甲醇（12，V/V）：量取250ml乙晴（4.6）与500mL甲醇（4.5）混合.4.920mmoL/L.乙酸铵溶液：称取1.54g乙酸铵（4.2）置于烧杯中，加水溶解并定容至1000mL.4.10保泰松标准样品：具体信息见表1.
表1保泰松标准样品信息
中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子质量 纯度保奉松 Plenylbutazone 50-33-9 C HN O; 308.38 99%
4.11标准储备液：准确称取0.1g标准样品（4.10），精确至0.0001g.于50mL烧杯中，加适量甲醇（4.5）溶解后移人100mL棕色容量瓶中，用甲醇（4.5）定容，该溶液于一18C以下保存，可保存六个月，
GB/T 30087-2013
4.12标准工作溶液：取适量的标准储备液（4.11）.用含2%氨水的甲醇溶液（4.7）配制成系列标准工作溶液，质量浓度分别为：0.200μg/mL、1.00μg/m1、2.50μg/mL、5 00μg/mL、10.0μg/mL、20.0 μg/ml
4.13滤膜；0.45μm，有机相.
5仅器与设备
5.1高效液相色诺仪：配二极管阵列或紫外检测器.5.3分析天平：感量分别为0.0001g和0.001g. 5.2液相色谱/质谱仪：配有电喷雾离子源.5.4超声波清洗器.5.5旋转蒸发仪.5.6涡旋混合器.
6分析步骤
6.1样品制备
6.1.1水剂类样品
称取1.0g样品，精确至0.001g，置于10mL比色管中，用含2%氨水的甲醇溶液（4.7）定容.超声提取10min，经滤纸过滤，过0.45pm有机相滤膜（4.13），滤液用液相色谱仪测定.
6.1.2膏霜乳液类样品
称取0.5g样品，精确至0.001g，置于25mL比色管中，用含2%氨水的甲醇溶液（4.7）定容.超声100mL蒸发瓶内，于45C水浴中减压蒸馏至近干，用3mL含2%氨水的甲醇溶液（4.7）溶解，过0.45gm有机相滤膜（4.13），滤液用液相色谱仪测定.
6.1.3唇膏类样品
称取0.5g样品，精确至0.001g-置于25mL比色管中，先加人1mL四氢呋哺（4.4），涡旋混匀，再用含2%氨水的甲醇溶液（4.7）定容.超声提取20min，经滤纸过滤[如有浑浊或乳化现象，加人约0.2g2%氨水的甲醇溶液（4.7）溶解，过0.45pm有机相滤膜（4.13），滤液用液相色谱仅测定. 的氯化钠（4.3）]，吸取15mL滤液至100mL蒸发瓶内，于45℃水浴中减压蒸馏至近干，用3mL含
6.2测定
6.2.1液相色谱条件
a）色谱柱：ODSC色谱柱，250mm×4.6mm（i.d.)，5μm，或性能相当者：b）柱温：25℃；e）检测波长：270nm; d）进样量：10pl;e）流速：1.0mL/min;1）流动相：流动相及液相色谱梯度洗脱条件见表2.
表2色谱梯度洗脱条件
时间 乙晴甲醇（4.8） 20 mmol/1. 乙酸铵(4 9)min % %0 45 45 55 5520 18 100 025 100 025.1 45 55
6.2.2标准工作曲线绘制
分别移取 10 pL 浓度为 0 200μg/mL、1 00μg/mL、2.50μg/mL、5 00μg/mL 10 0μg/mL20.0μg/mL的标准工作溶液（4.12)，按液相色谱条件（6.2.1）进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线.
标准样品色谱图参见图A.1.
6.2.3定量分析
用微量注射器准确吸取10gL处理后的样品溶液（6.1）注人液相色谱仪，按液相色谱条件（6.2.1）进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积，由色谱峰的峰面积可从标准工作曲线上求出相应的色谱峰浓度.样品溶液中被测物的响应值应在仪器测定的线性范围之内，含量高的样品可取适量样品溶液用含 2%氨水的甲醇溶液（4.7）稀释后进行测定.
6.2.4定性确证
进行样品测定时，如果检出样品的色谐峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品色谱图中，该物质的紫外吸收图谱与标准样品的紫外吸收图谱相一致，则样品中可能存在保泰松.阳性 样品需用液相色谐/质谱进行确证试验（参见附录B）.
6.3空白试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行.
6.4平行试验
按以上步骤，对同一样品进行平行试验测定.
7结果计算
样品中保泰松的含量按式（1）计算：
(1 )
式中：
X 《一样品中保泰松的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）：
样品中保泰松面积对应的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；
