SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4874-2017 葡萄金黄化植原体检疫鉴定方法 Detection and identification of Grapevine flavescence doree phytoplasma 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T4874-2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国二连浩特出入境检验检 疫局、中华人民共和国天津出入境检验检疫局. 本标准主要起草人：王有福、李鑫、张永宏、曹冬梅、姜一、胡强、刘卉秋、王秀芬、徐凤敏. I SN/T4874-2017 葡萄金黄化植原体检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了葡萄金黄化植原体的检疫和鉴定方法. 本标准适用于进境葡萄及其繁殖材料中葡萄金黄化植原体的检疫和鉴定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. SN/T1157进出境植物苗木检疫规程 3葡萄金黄化植原体基本信息 中文名：葡萄金黄化植原体 英文名：Grapevine flavescence doree phytoplasma 分类地位：软壁菌门(Tenericutes) 柔膜菌纲(Molicutes) 非固醇菌原体目(Acholeplasmatales) 非固醇菌原体科(Acholeplasmataceae) 植原体属(Phytoplasma)16SrV植原体组. 葡萄金黄化植原体的其他信息参见附录A. 4方法原理 葡萄金黄化植原体生物学特性和基因特性作为本标准鉴定方法的主要依据. 以组织材料症状观察、DAPI染色的形态学为初步筛查方法；以植原体核糖体16SDNA序列特征 为主要的判定依据. 5仪器设备和主要试剂 5.1仪器设备 定性PCR仪、超净工作台、高压灭菌锅、台式冷冻离心机、纯水仪、台式小型离心机、冰箱、旋涡震荡 器、微量进样器、电泳仪、水浴锅、凝胶成像系统等. 5.2主要试剂 除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂和去离子水.PCR反应体系用双蒸水.其他试剂比如 各种溶液、缓冲液和培养基都是检测方法特有的，都应按附录要求准备.商品化试剂参见其使用 说明. 植物DNA提取试剂盒、PCR Premix、超纯水、DNA marker及DNA提取试剂等. 核酸提取研磨液(100mL):K2HPO43H2O 2.17g;KH2PO4 0.41g;蔗糖，10g;BSA (Fraction V) 0.15g;PVP-10 2g.pH7.6高温灭菌，4℃保存. 1 ...
SN/T 4874-2017 葡萄金黄化植原体检疫鉴定方法.pdf
