SN/T 5101-2019 国境口岸阿穆尔病毒实时荧光RT-PCR检测方法.pdf

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ICS01.040.11 C62 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5101-2019 国境口岸阿穆尔病毒实时荧光RT-PCR 检测方法 Detection method of Amur virus by real-time fluorescence RT-PCR at frontier ports 行业标准信息服务平台 2019-09-03发布 2020-03-01实施 中华人民共和国海关总署发布 SN/T5101-2019 前言 本标准依据GB/T1.1一2009给出的规则编写. 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本标准起草单位:中华人民共和国长春海关、中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国长白海关. 本标准主要起草人:刘阳、洪晓坤、姚李四、王玮琳、丁旭、刘勇先、孙舒、张吉、孙晶莹. 行业标准信息服务平台 SN/T5101-2019 国境口岸阿穆尔病毒实时荧光RT-PCR 检测方法 1范围 本标准规定了国境口岸入出境人员及鼠类感染阿穆尔病毒的荧光RT-PCR检测方法,包括样本采 集、处理,检验、结果判定、报告和生物安全措施. 本标准适用于国境口岸人出境人员及鼠类感染阿穆尔病毒的荧光RT-PCR检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本 文件.凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件. GB19489实验室生物安全通用要求 WS/T230临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用 人间传染的病原微生物名录(原中华人民共和国卫生部) 可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定(原中华人民共和国卫生部令第 45号) 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 阿穆尔病毒Amur virus 行业标准 属于布尼亚病毒科(Bunyaviridae) 汉坦病毒属(Hantavirus. 一种新发现的种群分型,是分节段的 负链RNA病毒.引起以鼠类为主要传染源的肾综合征出血热,典型临床表现为发热、出血、充血、低血 压休克及肾脏损害. 3.2 逆转录聚合酶链反应reverse transcription polymerase chain reaction 将RNA的逆转录(RT)和CDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术.本标准采用一步法逆 转录聚合酶链式反应(RT-PCR).在一步法RT-PCR中,首先以RNA为模板,利用下游特异性引物, 在依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)的作用下转录合成互补DNA(cDNA) 该步称作“逆转录”;随 后,再以cDNA为模板,利用上游和下游特异性引物,在DNA聚合酶的作用下进行PCR循环扩增;最 终使RNA分子的某个特定区域(目的片段)被扩增达几百万倍. 3.3 实时荧光RT-PCR real-time fluorescence RT-PCR 通过荧光染料或荧光标记的特异性荧光探针,对反转录后PCR扩增的产物进行标记跟踪,利用荧 光信号累积实现实时在线监测整个PCR反应过程,结合相应的软件可以对结果进行定性和定量分析. 1 ...

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