ICS65.020.30 B41 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T7238-2020 对虾偷死野田村病毒(CMNV)检测方法 Detection methods for covert mortality nodavirus (CMNV) 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 SC/T7238-2020 全自农业公品标准 前 公共服务平台 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 典通 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的火 不承担识别这些专利的责任. 本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出. 本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口. 本标准起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所. 本标准主要起草人：张庆利、黄健、万晓媛、李小平、刘爽、梁艳、杨冰、邱亮、李晨. I SC/T7238—2020 对虾偷死野田村病毒(CMNV)检测方法 1范围 本标准给出了对虾偷死野田村病毒(CMNV)逆转录套式PCR检测、逆转录环介导等温扩增检测、 TaqMan荧光定量RT-PCR检测所需的试剂和材料、器材和设备，规定了操作步骤和结果判定的要求. 本标准适用于CMNV的检测和监测 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 P凡是题内用文件，仅注日期的版本适用于本文件. 凡是不注日期的引用文件，其最新版本？包括所 SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范 ING 3缩略语 N 下列缩略语适用于本件 RE Bst DNA聚合酶：BC.热启动NA聚合酶(Bst2.oW后nSiart DNA eblymerase) CMNV:偷死野田村病(covert morlality nodavirus) dNTP:脱氧核苷磷酸(deoxyrihonucleoside triphosphate M-MLV酶：M-MV道转酶reverse transctiptase M-MLV RNaseg EAR nested RT-POR:送转录套式PCR(nested reverse trauseription PCR qRT-PCR:实时荣光定量PCR(quantitative real time reverse ttanseription PC下 RT-LAMP:逆转录f环个导等温增(reverse transeription loop mediated isothermal amplification) 4试剂和材料 4.1 RNase-ree水：商品化试剂，4保存，或其他等效的无RNA前水 4.2 RNAiso Plus试剂！博品化试剂保存，或其他等效的RNA提取试剂 1N3O 4.3RNA酶抑制剂(RNasin或RNase Inhibitor40L/L):商品化试剂 保存，或其他等效试剂. 4.4三氯甲烷：分析纯 4.5异丙醇：分析纯. 4.675%乙醇：见附录A中的A.1 4.7阳性对照：感染了CMNV的对虾组织或细胞培养物或含有日的片段的核酸，一80℃保存. 4.8阴性对照：不含CMNV的对虾组织或细胞培养物，一80℃保存. 4.9空白对照：可用RNase-free水作为空白对照. 4.10dNTP(各2.5mmol/L):含dATP、dTTP、dGTP、dCTP各2.5mmol/L的混合物，一20℃保存. 4.11dNTP(各10mmol/L):含dATP、dTTP、dGTP、dCTP各10mmol/L的混合物，一20℃保存. 4.12dNTP(各20mmol/L):含dAT...
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