ICS65.020.01 B04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3427-2019 棉花品种枯萎病抗性鉴定技术规程 Technical code of practice for identification of cotton variety resistance to Fusarium wilt 2019-01-17发布 2019-09-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3427-2019 棉花品种枯萎病抗性鉴定技术规程 1范围 本标准规定了棉花品种对枯萎病[病原菌：尖孢镰刀菌萎蔫专化型Fusarium oxysporum Schlect- end:Fr.F.sp.asinfectum(Atk.)W.C.Snyd&H.N.Hans.]抗性的人工接菌鉴定技术方法和 程序. 本标准适用于棉花品种区域试验枯萎病抗性 2规范性引用文件 RD 、PUBLIS H 下列文件对于本文件的应用是心不 可少的.凡是注日期的引用 文州，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件真最新版（包括的修改单）适用于本区件 GB4407.1经济作物种子第1部分：纤维类 GB/T221014棉花抗病虫性评价投术规范第4部分：菱病 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 RESEAR 3.1病株率disease incidence 衡量发病植株多少的指标.用发病植株数占全部调查植株数的百分率表示，记作.本标准中病 株率仅作为辅助指标 3.2病情指数disease index 衡量发病株率和严重度的综合指标.用发病植株的总病级数与全部调查植株的理论最高总病级数 的比较相对数表示，记作D. 3.3病情指数校正系数一correction coefficient of disease index 修正病情指数使其准化的系数、用标准病情指数(500)与当次鉴定感病对照品种病情指数的比 值表示，记作K. 3.4相对病情指数relative disease index 0 为消除地区间、年度间、批次间鉴定结果的差异，使鉴定结果间具有可比性而对病情指数进行标准 化的指标，用供试棉花品种的病情指数与病情指数校正系数的乘积表示，记作RDI. 4鉴定条件要求 4.1病原菌培养所需仪器设备 恒温摇床、恒温培养箱、超净工作台、高压灭菌锅、冰箱、培养皿、试管、剪刀、镊子、广口瓶、酒精 灯等. 4.2鉴定温室所需条件 鉴定温室应具备控制温度在20℃~28℃，能够随时通风，不同部位光照一致. 5鉴定前准备 5.1病原菌选择与培养 5.1.1病原菌选择 1 NY/T3427-2019 选用棉花枯萎病菌7号小种；如当地的枯萎病菌小种相对于7号小种为优势小种，则选择当地优势 小种作为鉴定用病原菌. 5.1.2病原菌培养 在超净工作台上，将保存的棉花枯萎病菌试管斜面菌种，转接到马铃薯琼脂培养基(PDA)平板上， 置25℃下培养6d.挑取菌落边缘2mm2的新鲜菌块，接种到查比克(Czapek)液体培养基中，置25℃ 下，150r/min 黑暗培养6d备用.吸取15mL上述菌液转接至装有玉米沙粒培养基的聚丙烯菌种袋 中，混匀后置25℃培养箱中静置培养7d 待枯萎病菌的菌丝布满后，取出培养物，自然风干备用. 培养基配制见附录A. 5.2带菌土准备及纸钵制作 将沙壤土过筛（孔径5mm)后，和泥炭土、沙子分别经0.1MPa、121℃、湿热灭菌30min 按3：1：1 混匀称重，加人总干重0.8%的枯萎病菌玉米沙粒培养物，混合均匀. 用干净的纸做直径6cm、高10cm的纸钵，均匀排列在塑...
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