KJ 食品快速检测方法 KJ 202301 动物源性食品中甲氧苄啶的快速检测 胶体金免疫层析法 2023-06-13发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202301 动物源性食品中甲氧苄啶的快速检测 胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了动物源性食品中甲氧苄啶快速检测胶体金免疫层析法. 本方法适用于猪、牛、羊、鸡、鸭、鱼等动物性食品肌肉组织中甲氧苄啶的快速定性测定. 2原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理，样品中的甲氧苄啶经提取后与胶体金标记的甲氧苄啶特异性 抗体结合，抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线(T线)上抗原的结合，从而导致检测线(T线)颜色深浅 的变化.通过检测线(T线)与控制线(C线)颜色深浅比较，对样品中甲氧苄啶进行定性判定. 3试剂与材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水. 3.1试剂 3.1.1无水磷酸二氢钾(KH2PO4). 3.1.2无水磷酸氢二钠(NazHPO4). 3.1.3甲醇(CHOH). 3.2试剂配制 样品提取液：称取无水磷酸二氢钾(3.1.1)3.40g和无水磷酸氢二钠(3.1.2)3.55g 加水溶解并定容 至1000mL 混匀. 3.3参考物质 甲氧苄啶参考物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量见表1，纯度≥99.5%. 注：或等同可溯源物质. 表1甲氧苄啶参考物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量 中文名称 英文名称 CAS号 分子式 相对分子质量 甲氧苄啶 Trimethoprim 738-70-5 Cu HIsN.O 290.32 3.4标准溶液配制 3.4.1甲氧苄啶标准储备溶液(100μg/mL):准确称取甲氧苄啶参考物质(3.3)10mg(精确至 1 KJ202301 0.01mg) 用甲醇(3.1.3)溶解并定容至100mL 混匀.该标准储备溶液一18℃避光保存，有效期 12个月. 3.4.2甲氧苄啶标准工作溶液(1g/mL):准确移取甲氧苄啶标准储备溶液(100μg/mL)(3.4.1)1mL 于100mL棕色容量瓶中，用甲醇(3.1.3)定容至刻度，混匀.临用现配. 3.4.3标准溶液为外部获取时，管理及使用应符合相关规定. 3.5材料 甲氧苄啶胶体金免疫层析试剂盒：一般包含金标微孔、胶体金试纸条或检测卡及配套的试剂，适用 于动物源性食品肌肉组织，按产品要求保存. 4仪器和设备 4.1电子天平：感量分别为0.01g和0.01mg. 注：当实验室可获得符合规定的标准溶液时，无须配备感量为0.01mg的电子天平. 4.2组织匀浆机. 4.3涡旋混合器. 4.4离心机：转速≥4000r/min. 4.5移液器：100L、200rL、1mL和5mL 4.6胶体金读数仪（可选）：产品配套可使用的检测仪器. 5环境条件 温度15℃~40℃. 6分析步骤 6.1试样制备 畜禽：去骨、内脏、皮、肥肉、筋膜. 鱼：去头、骨、内脏、鱼皮. 取约100g肌肉，用组织粉碎机充分粉碎混匀，均分成2份，分别装入洁净容器作为试样和留样，密 封，标记，于一18℃保存. 6.2试样提取 准确称取试样1g(精确至0.01g)于10mL离心管中，加入5mL样品提取液(3.2)，涡旋或振荡提 取5min 4000r/min离心3min 上清液即为样品处理液. 6.3测定步骤 6.3.1试纸条测定步骤 取350uL样品处理液于2mL离心管，加人1.0mL样品提取液(3.2)，混匀，即待测液.吸取 200uL待测液于金标微孔中，反复抽吸5次~10次至微孔试剂...
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