ICS11.220 B41 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T1950-2010 片形吸虫病诊断技术规范 Diagnostic techniques for fascioliasis 2010-09-21发布 2010-12-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T1950-2010 片形吸虫病诊断技术规范 1范围 本标准规定了片形吸虫病（肝片吸虫病和大片吸虫病）临床诊断方法、病原检查方法和酶联免疫吸 附试验免疫学诊断方法. 本标准适用于牛、羊片形吸虫病的诊断、流行病学调查及检疫. 2临床诊断方法 牛、羊患本病时多呈慢性型，主要症状为体态消瘦，食欲减退，颌下、前胸、下腹部水肿，贫血，结膜与 口黏膜苍白，生长受阻，产奶量降低，孕畜可能流产.急性型仅偶见于羊，可出现微热，肝脏浊音区扩大， 肝部有压痛，有时突然死亡. 病理变化：在急性型时，可见到急性肝炎，肝肿大，包膜有纤维素沉积，有2mm~5mm长的暗红色 虫道，内有凝周的血液和很小的童虫，常伴有腹膜炎.慢性型时，主要呈现慢性肝炎和慢性胆管炎.早 期肝脏肿大，以后萎缩硬化，小叶间结缔组织增生，胆管扩张、肥厚、变粗，呈绳索样突出于肝脏表面.胆 管内壁有盐类沉积，内膜粗糙，切时有沙沙声，在牛多见. 本病呈地方性流行，多发生在有中间宿主椎实螺的低洼和沼泽地带的放牧地区.以多雨年份特别 严重.感染季节多在夏、秋两季，秋末及冬季发病较多，在湿暖和多雨地区则要早些.肝片吸虫在我国 各地均有分布，主要感染牛、羊；而大片形吸虫偏于热带或亚热带分布，在我国多发生在南方地区，以感 染牛特别是水牛为多见，山羊等亦有感染. 3病原检查 3.1虫卵检查诊断方法 3.1.1水洗沉淀法（或称彻底洗净法） 3.1.1.1材料 200mL玻璃杯，60目铜丝筛，玻璃棒，镊子，胶帽吸管，载玻片和盖玻片，天平，显微镜. 3.1.1.2方法 取新鲜粪便10g放人玻璃杯中，先加10mL水搅成糊状，然后再继续加水20倍.经充分混合后， 用60目铜丝筛网滤人另一玻璃杯中，把滤过的粪便混悬液静置沉淀30min后，倒掉上清液，再继续加 水混合，静置沉淀.静置的时间可逐渐缩短，但至少要10min.这样反复进行，直到上清液透明为止. 最后吸取沉淀物放在载玻片上，加盖玻片在显微镜下作定性检查. 若作定量检查，须将沉淀物全部镜检（不加盖玻片，用低倍显微镜检查），统计全部虫卵数.或 按3.1.2进行定量检查. 3.1.1.3结果判定 肝片形吸虫(Fasciola hepatica)虫卵呈长卵圆形，大小为116um~132gumX66μm~82um(长× 宽)，黄褐色.前端较窄，有一个不明显的卵盖，后端较钝.卵壳较薄而透明，卵内充满卵黄细胞和一个 胚细胞（参见图A.1). 大片形吸虫(Fasciola gigantica)虫卵的形态与肝片形吸虫虫卵相似，卵呈深黄色，大小为 150gm~190mX75um~90m(长×宽)（参见图A.2). 片形吸虫虫卵与前后盘吸虫(Paramphistomum)虫卵的形态和大小相似，鉴别要点为：前后盘吸虫 1 NY/T1950-2010 虫卵呈灰白色，有透明感，卵黄细胞松散地分布在卵内，可见到许多空隙. 3.1.2片形吸虫虫卵定量计数法 3.1.2.1材料 300mL带刻度的三角烧瓶，1.6%氢氧化钠溶液，玻璃棒，10mL吸管，10mL离心管，离心机，饱和 盐水，胶帽吸管，镊子，天秤，载玻片和盖玻片，显微镜. 3.1.2.2方法 羊：称取羊粪10g 放入300mL容量的三角烧瓶中，加人20mL1.6%浓度的氢氧化钠...
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