GH
中华人民共和国供销合作行业标准
GH/T1316-2026代替GH/T 1316-2020
蜂蜜、蜂蜜制品及蜂蜜水中10种低聚糖含 量的测定高效液相色谱法
Determination of 10 oligosaccharides in honey honey product and honeywater--HPLCmethod
中华全国供销合作总社 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
本文件代替GH/T1316-2020《蜂蜜中松二糖、松三糖、毗喃葡糖基蔗糖、异麦芽糖和棉子糖含量的测定高效液相色谱法》.与GH/T1316-2020相比，除结构调整和编辑性修改外，主要技术变化如下：
a）增加了检测的低聚糖种类，包括蔗糖、麦芽酮糖、麦芽糖、曲二糖、麦芽三糖.
b）增加了适用基质类型，包括液态蜂蜜制品、蜂蜜水.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中华全国供销合作总社提出.
本文件由全国蜂产品标准化技术委员会（SAC/TC601）归口.
本文件起草单位：秦皇岛海关技术中心、上海冠生园蜂制品有限公司、北京百花蜂业科技发展有限高淳区综合检验检测中心. 公司、北京知蜂堂健康科技股份有限公司、陕西国蜂健康科技集团有限公司、中国蜂产品协会、南京市
本文件主要起草人：崔宗岩、刘晓茂、付琳、黄学者、朱晓丽、刘彩萍、陈云、孙荣捐、李亮、孙艳艳、祖铁红、贾英杰、贾光群、刘媛飞、孙国峰、谭丽蕊.
本文件所代替文件的历次版本发布情况为：
-GH/T .
蜂蜜、蜂蜜制品及蜂蜜水中10种低聚糖含量的测定高效液相色谱 法
1范围
本文件规定了蜂蜜、蜂蜜制品及蜂蜜水中蔗糖、松二糖、麦芽酮糖、麦芽糖、曲二糖、异麦芽糖、吡响葡糖基蔗糖、松三糖、棉子糖和麦芽三糖等10种低聚糖含量测定的高效液相色谱-蒸发光散射检测法.
本文件适用于蜂密、液态蜂密制品及蜂密水中10种低聚糖含量的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
以蜂蜜为主要原料（在成品中含量大于50%），添加其他食品原料经加工制成的产品.
3.2蜂蜜水honey water以蜂蜜、水为主要原料，添加或不添加其他食品原料制成的产品.
4原理
试样用水溶解和/或稀释后，其中的低聚糖用高效液相色谱-蒸发光散射检测器检测，外标法定量.
5试剂和材料
5.1试剂
5.1.1乙睛（CHN）：色谱纯.
5.1.2水：GB/T6682规定的一级水.
5.1.3三乙胺（CgHisN）：优级纯.
5.2溶液
5.2.1乙晴-水（46）：分别量取40mL乙腊和60mL水，混匀.5.2.20.1%三乙胺乙晴溶液：移取1mL三乙胺至1000mL容量瓶中，用乙腊定容，摇匀.
5.3标准品
蔗糖、松二糖、麦芽酮糖、麦芽糖、曲二糖、异麦芽糖、吡喃葡糖基蔗糖、松三糖、棉子糖和麦芽三糖标准品：纯度≥98%，信息见附录A.
5.4标准溶液
5.4.1标准储备溶液：称取蔗糖、松二糖、麦芽酮糖、麦芽糖、曲二糖、异麦芽糖、毗嘀葡糖基蔗糖、松三糖、棉子糖和麦芽三糖标准品各0.2g（精确至0.1mg）至10mL烧杯中，用适量水溶解后转移至10mL容量瓶中，用水洗涤3次并转移至容量瓶中，加入4mL乙，用水定容，摇匀，配制成单一标准储备溶液，浓度均为20gL.4C避光保存，有效期6个月.
5.4.2混合标准工作溶液：分别准确吸取蔗糖、松二糖、麦芽酮糖、麦芽糖、曲二糖、异麦芽糖、吡喃葡糖基蔗糖、松三糖、棉子糖和麦芽三糖标准储备溶液50gL、100uL、250gL、500guL、750μL至10mL容量瓶中，用乙晴-水（46）（5.2.1）稀释并定容，混匀，配制成浓度为0.1g/L、0.2g/L、0.5g/L、1.0g/L、1.5gL的10种低聚糖混合标准工作溶液，用于绘制标准工作曲线.该工作溶液现用现配.
5.5滤膜
0.22um，尼龙或等效材质.
6仪器和设备
6.1高效液相色谱仪：配有蒸发光散射检测器.
6.2天平：感量0.1mg和0.001g.
7试样制备与保存
对无结晶的蜂蜜、蜂蜜制品或蜂蜜水样品，混匀.对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60°C的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，冷却至室温.分出200g作为试样.制备好的试样置于样品瓶中，密封.
蜂蜜和蜂蜜制品试样于室温下保存.蜂蜜水试样于4C保存.
8测定步骤
8.1试样前处理
8.1.1蜂蜜和蜂蜜制品
称取蜂蜜或蜂蜜制品试样5g（精确至0.001g），置于100mL烧杯中，加入30mL水，用玻璃棒搅拌使试样完全溶解，转移至100mL容量瓶中，再用30mL水分3次洗烧杯并转移至上述容量瓶中，然后用乙晴定容，混匀.用0.22um滤膜将样液过滤入样品瓶中，供高效液相色谱仪测定.
8.1.2蜂蜜水
称取蜂蜜水试样5g（精确至0.001g），置于10mL容量瓶中，加入4mL乙，用水定容，混匀.用0.22um滤膜将样液过滤入样品瓶中，供高效液相色谱仪测定.
8.2测定
8.2.1液相色谱参考条件
液相色谱参考条件如下：
a)色诺柱：酰氨基型，150mmx2.1mmi.d，粒径1.7μm，或相当者：b)流动相：A为0.1%三乙胺乙晴溶液，B为水，梯度洗脱条件见表1；e)漂移管温度：55°℃：f)气体压力：氮气，30psig)喷雾器模式：加热，动力水平为60%：h)进样量：3μL.
c)流速：0.25mL/min;
d)柱温：60°℃：
表1梯度洗脱条件
时间（min） A (%) B (%)0 90 103 90 1010 80 2023 08 2026 65 3528 65 3529 90 1036 90 10
8.2.2液相色谱测定
将混合标准工作溶液按照上述色谱条件上机测定，记录色谱峰峰面积，以峰面积为纵坐标，以标准工作溶液浓度为横坐标，采用幂函数方程绘制标准曲线，或根据色谱工作站自动化计算.以目标物的保留时间定性，被测试样中目标物色谱峰保留时间与相应标准溶液色谱峰的保留时间相比，相差应在土0.1min内.在上述色谱条件下，蔗糖、松二糖、麦芽酮糖、麦芽糖、曲二糖、异麦芽糖、吡响葡糖基燕糖、
