NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 4895-2025
西番莲（百香果）脱毒种苗生产技术规程
Technical code for virus-free plantlet production ofpassion fruit (Passiflora edulis)
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部农垦局提出.
本文件由农业农村部热带作物及制品标准化技术委员会归口.
本文件起草单位：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所、中国热带农业科学院热带生物技术研究所、广西壮族自治区农业科学院、福建省农业科学院果树研究所、三亚碧兰春花卉发展有限公司、海南 美丽乡村果业有限公司.
本文件主要起草人：邢文婷、宋顺、黄东梅、吴斌、王健华、许奕、杨柳、应东山、魏秀清、韦晓霞、马伏宁、蒋萍、蒋邦增、赵军涛.
西番莲（百香果）脱毒种苗生产技术规程
1范围
本文件规定了西番莲（百香果，Paxsifloraedulis）脱毒种苗生产技术的术语和定义、脱毒组培苗培养、脱毒组培苗驯化、脱毒种苗繁育、种苗质量、包装储运和育苗档案等要求.
本文件适用于西番莲（百香果）紫果和黄果品种及其杂交种的脱毒种苗生产.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，文件.
GB/T8321（部分）农药合理使用规则GB/T42478农产品生产档案记载规范NY/T525有机肥料NY/T1276农药安全使用规范总则 NY/T2517植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南西番莲NY/T3972西番莲种苗
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
特定病毒specificvirus
黄瓜花叶病毒（CMV）、夜来香花叶病毒（TeMV）、西番莲木质化病毒（PWV）、东亚西番莲病毒（EAPV）、西番莲大载曲叶病毒（EuLCV）、西番莲潜隐病毒（PLV）、广东番木瓜曲叶病毒（PaLCuGDV）7个西番莲常见病毒，
3.2
脱毒组培苗virus-free tissue-cultured plantlet
经脱毒处理且无特定病毒的组培苗.
生物隔离大棚biological isolationgreenhouse
配备60目以上防虫网、通风系统、遮阳和喷雾系统等设施大棚.
3. 4
脱毒原种苗virus-free pre-elite stock
在生物隔离大棚内，移栽成活的脱毒组培苗经病毒检测，确认不带特定病毒且性状稳定、未经过代数繁殖的组培苗.
3.5
脱毒种苗virus-free certified seedling
在生物隔离大棚内，由脱毒原种苗生产出符合质量要求的脱毒嫁接苗或扦插苗.
定植planting
在生物隔离大棚中将组培苗种植于含育苗基质的控根器中.
NY/T 4895-2025
4脱毒组培苗培养
4.1外植体消毒
取经脱毒预处理后生长势旺盛的新梢，流水冲洗后用中性洗涤剂浸泡15min~20min.再用流水冲洗干净后，切取长度2cm~3cm的新梢顶芽为外植体，并在无菌环境下用75%酒精浸泡45s.无菌水冲洗2次，用含0.1%吐温（Tween20）的 0.5%~1.0%次氯酸钠溶液浸泡5min~15min或0.1%~0. 15%HgCl:溶液浸泡5min~8min，无菌水洗4次~5次.
4.2外植体无菌体系
4.2.1无菌外植体筛选
取4.1外植体的茎尖，长度≤1.0cm，在MS培养基上培养10d~15d，筛选无污染的茎尖.
4.2.2培养条件
昼/夜温度（26℃~30℃)/（21C~25℃），光照强度25001x~3200Ix，昼/夜（16h/8h）.
4.3茎尖脱毒培养
4.3.1芽诱导
腋芽进行编号.腋芽萌发培养基相关信息见附录A中的A.1. 将4.2茎尖接种至含植物细胞分裂素的腋芽启动培养基中诱导腋芽生长，培养条件见4.2.2：对每个
4.3.2二次茎尖培养
切取芽的茎尖，长度≤0.5cm，接种至增殖培养基上培养.培养条件：（25士1）℃，光照强度30001x~45001x，昼/夜（16h/8h）.增殖培养基相关信息见A.1.
注：每个茎尖编写品种、蒸尖号、接种日期.
4.3.3继代培养
将4.3.2培养材料切成带芽茎段，每30d~45d更换一次新培养基，同一个腋芽的培养材料为同一个芽系，统一编号，继代培养4次～5次，培养条件见4.2.2；对不同芽系材料进行病毒检测，将检测无特定病毒的材料进一步培养.
4.3.4生根诱导培养
选取嫩茎长度≥1.5cm的单芽，在含植物生长素的MS培养基中诱导生根.培养条件：温度（26士1）℃，光照强度4500Ix~50001x昼/夜（16h/8h）.生根培养基相关信息见A.1.
5脱毒组培苗化
5.1炼苗
在生物隔离大棚内，选取主茎高≥3.0cm的组培瓶苗，放置于20℃～30C温度下闭瓶炼苗7d~14d，接着揭盖50%炼苗2d~3d.
5.2移栽
在生物隔离大棚内，流水冲洗组培苗基部培养基，移裁到育苗基质中，用塑料薄膜和遮阳网保湿、遮阳20d~30d，保持温度26℃～28℃，空气相对湿度70%～85%，对移裁成活的组培苗进行特定病毒检测，检测方法见附录B.
5.3定植
将5.2检测无特定病毒的组培苗定植于含育苗基质的控根器中.对定植之后的组培苗按照NY/T2517的规定进行稳定性鉴定，获得性状稳定的组培苗即为脱毒原种苗.
5.4剔化条件
5.4.1生物隔离
生物隔离大棚应减少人员出入，周边应无十字花科、茄科及其他易引诱蚜虫、橘小实蝇、蓟马和粉虱的作物.
