中华人民共和国国家生态环境标准
HJ1468-2026
基于环境DNA的内陆水体外来入侵 水生动物调查与分布评估技术指南
Technical guidelines for investigation and distribution assessment of invasivealien aquatic animals in inlandwaters based on environmental DNA
本电子版为正式标准文件，由生态环境部环境标准研究所审校排版.
2026-09-01实施
生 态 环境 部发布
目次
前言.. I1适用范围 12规范性引用文件 .13术语和定义.4试剂、仪器设备和材料 5目标物种 26评估程序 .3 27资料收集.8外来入侵水生动物采样 9外来入侵水生动物分布评估 410质量控制与质量保证 .6 .811 废弃物处理.. .812评估报告编制. 8附录A（资料性附录） 附录B（资料性附录） 环境DNA试剂、仪器设备和材料 主要外来入侵水生动物名单 II ..9附录C（资料性附录） 基于环境DNA的内陆水体外来入侵水生动物调查与分布评估资料收集清单...12附录D（资料性附录） 河流、湖库外来入侵水生动物环境DNA采样点布设示意图 13附录E（资料性附录） 附录F（规范性附录） 环境DNA固定剂.. 14附录G（资料性附录） qPCR检测信息记录表 目标物种引物特异性验证 15 16附录H（资料性附录） 最低检测限确定方法 17附录1（规范性附录） 野外质量控制与保证 18附录J（规范性附录） 附录K（资料性附录） 基于环境DNA的内陆水体外来入侵水生动物调查与分布评估报告编写格式...21 实验室质量控制与保证
前言
为贯彻《中华人民共和国生态环境法典》《中华人民共和国生物安全法》等法律法规和《外来入侵物种管理办法》，落实《中国生物多样性保护战略与行动计划（2023-2030年）》，规范我国外来入侵水生动物调查、分布评估及监督管理工作，制定本标准.
本标准规定了基于探针法实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）的环境DNA技术，评估外来入侵水生动物区域分布的程序、内容、方法和技术要求.
本标准为首次发布.
本标准的附录A～附录E、附录G、附录H、附录K为资料性附录，附录F、附录I、附录J为规范性附录.
本标准由生态环境部自然生态保护司、法规与标准司组织制订.
本标准主要起草单位：中国环境科学研究院、云南大学、中国环境监测总站.
本标准生态环境部2026年5月8日批准.
本标准自2026年9月1日起实施.
本标准由生态环境部解释.
基于环境DNA的内陆水体外来入侵水生动物调查与
分布评估技术指南
1适用范围
本标准规定了基于探针法实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）的环境DNA技术，评估外来入侵水生动物区域分布的程序、内容、方法和技术要求.
本标准适用于河流（不含入海口）、湖泊、水库、水田等内陆水体外来入侵水生动物调查与分布评估.
2规范性引用文件
本标准引用了下列文件或其中的条款.凡是注明日期的引用标准，仅注日期的版本适用于本标准.凡是未注日期的引用标准，其最新版本（包括的修改单）适用于本标准.其他文件被新文件废止、 修改、修订的，新文件适用于本标准.
GB/T34797核酸引物探针质量技术要求GB/T37874核酸提取纯化方法评价通则GB/T42077生物技术核酸靶序列定量方法的性能评价要求qPCR法和dPCR法 GB/T40226一环境微生物宏基因组检测高通量测序法GB/T43650野生动物及其制品DNA物种鉴定技术规程HJ 494 水质采样技术指导HJ 710.7 生物多样性观测技术导则内陆水域鱼类HJ 1295 HJ 1296 水生态监测技术指南湖泊和水库水生生物监测与评价（试行） 水生态监测技术指南河流水生生物监测与评价（试行）SN/T 4835 实验室生物废弃物管理要求
3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准.
3.1
水生动物aquaticanimals
甲壳动物、软体动物等. 生活史全部或主要阶段生活在水中的各类动物（包括卵和配子），包括爬行动物、两栖动物、鱼类、
3.2
外来水生动物alien aquaticanimals
在我国无天然分布，经直接或间接人为途径传入的水生动物，包括该动物可能存活和繁殖的部分、配子或繁殖体.
3.3
外来入侵水生动物invasivealienaquaticanimals
传入定殖并对生态系统、生境、物种带来威胁或者危害，影响我国生态环境，损害农林牧渔业可持续发展和生物多样性的外来水生动物.
3.4
环境DNAenvironmentalDNA（eDNA)
环境介质（水、土壤、沉积物、生物膜、空气等）或混合生物组织中直接提取到的生物DNA的集合.本标准特指从水环境中（如水、沉积物等）直接提取到的外来入侵水生动物脱落、释放的细胞或游离DNA.
阳性对照positive control
确定含目标物种DNA的样本，与受试样本平行进行，用于判断整个反应体系和反应过程是否可靠.
阴性对照negative control
确定不含目标物种DNA的样本（例如无菌水），与受试样本平行进行，用于判断受试样本是否被污染.
3.7
最低检测限limitofdetection（LOD）
一定置信水平下可以检测到的目标物种DNA的最低浓度.
实时荧光定量聚合酶链式反应 quantitative real-time polymerase chain reaction(qPCR)
而释放荧光信号，依据荧光信号的强度对扩增产物进行实时监测， 行定量分析的技术. 从而实现对初始环境DNA模板量进
定量循环 quantification cycle(Ca)
qPCR反应时每个管内产生的荧光信号达到设定阀值时所经历的循环数.
3.10
技术重复technicalrepetition
对同一个来源的样本DNA模板进行多次独立的gPCR检测，用于判断实验操作本身引入的随机误差，提高检测结果的精确度和可靠性.
3.11
引物primer
在DNA复制过程中，结合于模板链上并作为复制延伸的起始位点和/或终止位点的，具有一定长度和顺序的人工合成寡核苷酸链.
4试剂、仪器设备和材料
包括野外采样和室内实验所需试剂、仪器设备和材料.资料清单参见附录A.
5目标物种
目标物种依据农业农村部、生态环境部等公开发布的外来入侵物种管理名单确定，并根据最新公开2
