中华人民共和国国家标准
GB/T35798-2018
Determination of coumarin and its derivatives in cosmetics-High performanceliquid chromatography
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由中国轻工业联合会提出.本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所. 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口本标准主要起草人：孟宪双、马强、王宏伟、吕庆、李俊芳、李亚辉、王峰、沈敏.
引言
氧基-4-甲基香豆素和环香豆素）是我国《化妆品安全技术规范》规定的禁用物质.
定：若技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时，应进行安全性风险评估，确保在正常、合理及可 禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质.《化妆品安全技术规范》规预见的使用条件下不得对人体健康产生危害.
目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定，仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法.
化妆品中香豆素及其衍生物的测定 高效液相色谱法
1范围
本标准规定了化妆品中香豆素及二氢香豆素等7种香豆素衍生物的高效液相色谱测定方法.
的测定. 本标准适用于水剂、膏霜、香波、散粉和唇膏类化妆品中香豆素及二氢香豆素等7种香豆素衍生物
本标准的检出限和定量限：香豆素的检出限为4mg/kg，定量限为8mg/kg：二氢香豆素的检出限为10mg/kg，定量限为20mg/kg：7-甲氧基香豆素、7-甲基香豆素、7-乙氧基-4-甲基香豆素、环香豆素、双香豆素和醋硝香豆素的检出限为5mg/kg，定量限为10mg/kg.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
试样经溶剂提取、离心、微孔滤膜过滤后，用高效液相色谱测定，外标法定量，液相色谱-质谱确认.
4试剂和材料
4.1乙晴：色谱纯. 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.4.2甲醇：色谱纯.4.3二氯甲烷.4.4四氢味喃.4.5乙酸铵. 4.6冰醋酸.4.7氢氧化钠.4.80.05mol/L乙酸铵溶液：称取1.925g乙酸铵（4.5），加水溶解后转移至500mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，备用.4.90.1mol/L氢氧化钠溶液：称取0.400g氢氧化钠（4.7）.加水溶解后转移至100mL容量瓶中，定容 至刻度.4.100.1mol/L氢氧化钠-乙晴混合溶液（19）（体积体积）：量取90mL乙晴（4.1）至100mL容量瓶中，加人0.1mol/L氢氧化钠溶液（4.9）至刻度，混匀.4.11香豆素、二氢香豆素、7-甲氧基香豆素、7-甲基香豆素、7-乙氧基-4-甲基香豆素、环香豆素、双香豆
素和醋硝香豆素的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、结构式和相对分子质量参见附录A中的
表A.1，标准品纯度均不小于98%.4.12香豆素及其衍生物的标准储备溶液（1000mg/L）：分别称取各标准品（4.11)10mg（精确至0.1mg）至10mL容量瓶中，除双香豆素先用5mL二氯甲烷（4.3）溶解，再用乙晴（4.1）定容至刻度外，4.13香豆素及其衍生物的混合标准溶液：分别移取1mL.香豆素及其衍生物的标准储备液（4.12）至 10 mL容量瓶中，用甲醇（4.2）定容至刻度，根据需要用甲醇（4.2）稀释成适宜浓度的混合标准工作溶液，于4°C避光保存，可使用3个月.
5仅器和设备
5.1高效液相色谱（HPLC）仅：配有二极管阵列检测器.5.2液相色谱-质谱/质谱（LC-MS/MS）仪：配有电喷雾离子源（ESI）.5.3超声波水浴.5.4离心机：转速不低于5000r/min.5.6分析天平：感量为0.0001g和0.001g. 5.5涡旋混合器.5.7具塞比色管：25mL.5.8具塞塑料离心管：10mL.5.9微孔滤膜：0.45μm，有机相.
6测定步骤
6.1样品处理
6.1.1水剂、膏霜、香波和散粉类样品
称取0.5g（精确至0.001g）试样于25mL具塞比色管（5.7）中，加人8mL0.1mol/L氢氧化钠-乙晴混合溶液（4.10），涡旋混合后，在超声波水浴（5.3）中超声提取30min，以冰醋酸（4.6）调节pH至中性，并用乙晴定容至10mL刻度，混匀.取部分溶液转移至10mL具塞塑料离心管（5.8）中，以 5000r/min离心10min，上清液经0.45μm微孔滤膜（5.9）过滤，供高效液相色谱测定.
6.1.2唇膏类样品
称取0.5g（精确至0.001g）试样于25mL具塞比色管（5.7）中，加人2mL四氢呋哺（4.4），涡旋混合后再加入6mL0.1mol/L氢氧化钠-乙混合溶液（4.10），涡旋混合，以下步骤同6.1.1.
6.2测定条件
高效液相色谱测定条件如下：
b）流动相：见表1； c）流速：1.0 mL/min;d）柱温：30°℃；f）进样量：10pl. 306nm.7-甲氧基香豆素和7-乙氧基-4-甲基香豆素：320nm；
