BJS
食品补充检验方法
BJS 202503
国家市场监督管理总局 发布
小麦粉及其制品和小麦粉添加剂中 乙酰氧肪酸的测定
1范围
方法.
本方法适用于小麦粉及其制品中乙酰氧酸的测定，也适用于小麦粉及其制品使用的食品添加剂中乙酰氧酸的测定，
2原理
试样经无水乙醇提取，离心，过滤膜后，滤液采用配有氮磷检测器（NPD）的气相色谱仪检测，保留时间定性，外标法定量.
3试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水，
3.1试剂
3.1.1无水乙醇（CHOH）：色谱纯.
3.2标准品
3.2.1乙酰氧酸（CHNOCAS号：546-88-3）：纯度≥98%，或经国家认证并授予标准物质证书的 标准品，相关信息见附录A.
3.3标准溶液配制
3.3.1标准储备液（1000μg/mL）：准确称取10mg（精确至0.01mg）乙酰氧肪酸标准品（3.2.1），用无
水乙醇（3.1.1）溶解并定容至10mL，配制成质量浓度为1000pg/mL的乙酰氧孵酸标准储备液.在4℃避光保存，有效期6个月，10mL容量瓶中，用无水乙醇（3.1.1）定容至刻度，混匀，得到质量浓度为100μg/mL的乙酰氧污酸标准 中间液.在4℃避光保存，有效期3个月.3.3.3系列标准工作液：分别准确吸取100gg/mL的乙酰氧肪酸标准中间液（3.3.2）0.06mL、0.10ml、0.20mL、0.40ml0.60mL0.80mL、1.00mL至10mL容量瓶中，用无水乙醇（3.1.1）定容至刻度，摇与]得到质量浓度为 0 60μg/mL、1.00 μg/mL 2.00μg/mL、4 00μg/mL6 00μg/mL8.00μg/mL 和 10.00μg/mL的系列标准工作液，现用现配.或依仪器响应情况配制适当质量浓度的系列标准工作液.
3.4材料
3.4.2滤膜：有机系.0.45gm. 3.4.1离心管：15ml
4仪器和设备
4.1气相色谱仪：配有氮磷检测器（NPD）.4.2电子天平：感量为0.01mg和0.01g. 4.3超声波发生器.4.4涡旋混合器.4.5离心机：转速≥8000r/min.4.6食品粉碎机.
5分析步骤
5.1试样制备和保存
称取具代表性小麦粉、小麦粉及其制品使用的食品添加剂样品约200g，混合均匀，干燥避光密封保存备用.对于小麦粉制品，称取代表性样品约200g湿度较低的样品，用食品粉碎机打碎混匀：湿度较 高的样品，先剪碎，再用食品粉碎机混匀.4℃下冷藏避光密封保存备用，有效期7天.
5.2样品前处理
准确称取1g（精确至0.01g）试样，置于15mL具塞离心管中，准确加人无水乙醇（3.1.1)10ml，涡旋振荡10min.超声提取10min混匀，8000r/min离心5min.上清液经0.45μm有机系滤膜过滤， 弃去初滤液2滴～5滴后备用.
5.3仪器参考条件
气相色谱条件如下.
载气：高纯氮气， 色谱柱：键合/交联聚乙二醇石英毛细管柱（60m×0.32mm×0.25pm）或其他等效柱.载气流速：2.5mL/min，尾吹气流速：7.5mL/min.进样口温度：200℃C.进样方式：脉冲不分流，脉冲压力20psi（1psi=6.895kPa），维持时间0.75min，不分流时间 1 min.进样量：1L升温程序：起始温度150C，保持1min，15C/min升温至200℃，保持1min，10C/min升温-检测器：氮磷检测器（NPD），温度320℃C，空气流量60mL/min，氢气流量3mL/min， 至230℃，保持2min，240C后运行2min.
5.4标准曲线的制作
将系列标准工作液（3.3.3）按浓度由低到高分别注人气相色谐仪中，测定相应的峰面积，以系列标准工作液的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线.
5.5试样溶液的测定
将试样溶液注人气相色谱仅中，得到相应的峰面积.试样溶液中目标物色谱峰的保留时间与对应标准溶液色谱峰的保留时间偏差应在土0.5%之内.根据标准曲线，外标法定量，得到试样溶液中乙酰氧酸的浓度，试样溶液中乙酰氧肪酸的浓度应在标准曲线线性范围以内，超出线性范围则应稀释后 2
重新上机测定.乙酰氧酸标准溶液特征色谱图见附录B.
5.6空白试验
除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行操作.
6结果计算
试样中乙酰氧酸的含量按公式（1）计算：
..(1）
式中：
X 试样中乙酰氧酸的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；p 由标准曲线得到的试样溶液中乙酰氧肪酸的质量浓度，单位为微克每毫升（pg/mL）； 由标准曲线得到的空白溶液中乙酰氧肪酸的质量浓度，单位为微克每毫升（pg/mL）；P 试样溶液的体积，单位为毫升（mL）：f 试样溶液的稀释倍数；1000换算系数；以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，计算结果保留三位有效数字. 试样的质量，单位为克（g）.
7精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%.
8其他
本方法的检出限为2mg/kg，定量限为6.00 mg/kg.
9结果表述
当乙酰氧酸的检测结果大于定量限时，可认为存在使用乙酰氧酸防止返色褐变的可能，并应结合现场执法证据进行综合研判.
V
（资料性）乙酰氧房酸相关信息
乙酰氧肪酸相关信息见表A.1.
表A.1乙酰氧酸中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式
中文名称 英文名称 SV 分子式 相对分子质量 结构式乙酰氧肪酸 Acetohydroxamic acid 0-88-915 C;H;NO; 75 07
