ICS65.160 X85 备案号：29841—2010 YC 中华人民共和国烟草行业标准 YC/T365-2010 烟草病毒的测定 逆转录-聚合酶链反应法 Tobacco virus detection-Reverse transcription-polymerase chain reaction 2010-10-11发布 2010-10-15实施 国家烟草专卖局 发布 YC/T365-2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本标准由国家烟草专卖局提出. 本标准由全国烟草标准化技术委员会农业分技术委员会(SAC/TC144/SC2)归口. 本标准起草单位：中国烟草总公司黑龙江省公司牡丹江烟草科学研究所. 本标准主要起草人：颜培强、武常青、闫新甫、万秀清、乔婵、孙剑萍、郭兆奎、李丽杰、邱恩建、 王春军、元野、刘德育、陈荣平、黄磊. I YC/T365-2010 烟草病毒的测定 逆转录聚合酶链反应法 1范围 本标准规定了用逆转录聚合酶链反应法测定烟草种子、幼苗及鲜烟叶样品中的烟草花叶病毒 (TMV)、马铃薯Y病毒(PVY)、黄瓜花叶病毒(CMV)和烟草蚀纹病毒(TEV). 本标准适用于烟草种子、幼苗和鲜烟叶样品中烟草花叶病毒(TMV)、马铃薯Y病毒(PVY)、黄瓜 花叶病毒(CMV)和烟草蚀纹病毒(TEV)的测定. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T24310一2009烟草及烟草制品转基因检测方法 3术语和定义 GB/T24310一2009界定的以及下列术语和定义适用于本文件.为了便于使用，以下重复列出了 GB/T24310一2009中的一些术语和定义. 3.1 聚合酶链式反应扩增polymerase chain reaction amplification 模板DNA序列在含有4种脱氧核糖核酸(dNTPs)、引物、DNA聚合酶等的反应体系中，在仪器中 通过多次高温变性、退火和延伸的循环过程，最终使目标DNA片段以几何倍数扩增. [GB/T24310一2009，定义3.6] 3.2 逆转录-聚合酶链反应reverse transcription-polymerase chain reaction 提取组织或细胞中的总RNA 以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT18)(5.1)或随机引物 利用逆转录酶(5.2)反转录成cDNA 再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测 基因表达. 3.3 阳性对照positive control 经鉴定为含有检测目标成分的对照烟草样品. [GB/T...
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