SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2121-2014 代替SN/T21212008 流行性造血器官坏死检疫技术规范 Quarantine protocol for epizootic haematopoietic necrosis 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 到涂层查真伪 SN/T2121-2014 前言 本标准根据GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准代替SN/T2121一2008《流行造血器官坏死病检疫技术规范》. 本标准与SN/T2121一2008相比，主要技术差异如下： ——增加了临床症状的描述； ——增加了间接免疫过氧化物酶法； ——修改了综合判定. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、中华人民 共和国山东出入境检验检疫局. 本标准主要起草人：刘荭、贾鹏、郑晓聪、何俊强、马晓文、王津津、于力、史秀杰、兰文升、陈兵、 王红英. 本标准所代替标准的历次版本发布情况为 —SN/T2121-2008. I SN/T2121-2014 流行性造血器官坏死检疫技术规范 1范围 本标准规定了流行性造血器官坏死的临床症状、病原分离、酶联免疫吸附试验、聚合酶链式反应和 间接免疫过氧化物酶法的检测方法. 本标准适用于流行性造血器官坏死的诊断、检测和监测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T18088出入境动物检疫采样 GB19489实验室生物安全通用要求 3概述 流行性造血器官坏死(Epizootic haematopoietic necrosis EHN)是一种由流行性造血器官坏死病 毒(Epizootic haematopoietic negrosis virus EHNV)引起有鳍鱼类以全身性临床或亚临床感染为特征 的病毒性传染病（参见附录A) 4试剂和材料 4.1水：符合GB/T6682中一级水的规格. 4.2EHNV参考株：由指定单位提供 4.3细胞系：选蓝鳃太阳鱼成纤维细胞系(Bluegill fry BF-2)、胖头鳞细胞系(Fathead Minnow FHM)、鲤鱼上皮瘤细胞系(Epithelioma Papulosum Cyprini EPC)或大鳞大麻哈鱼胚胎细胞系 (Chinook Salmon Embryo CHSE-214)之一. 4.44-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES). 4.5兔抗EHNV抗体或鼠抗EHNV抗体：由指定单位提供. 4.6辣根过氧化物酶标记的抗兔或抗鼠免疫球蛋白(IgG). 4.7 Tag DNA酶：一20℃保存，避免温度剧烈变化. 4.8 dNTPs:含dCTP、dGTP、dATP、dTTP各10mmol/L. 4.9引物：浓度为40μmol/L.其序列如下： M151:5'-AAC CCG GCT TTC GGG CAG CA-3' M152:5'-CGG GGC GGG GTT GAT GAG AT-3’ 扩增EHNV主要衣壳蛋白基因321bp片段. M153:5'-ATG ACC GTC GCC CTC ATC AC-3’ ...
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