SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2982—2011 牙鲆弹状病毒病检疫技术规范 Quarantine protocol for hirame rhabdovirus disease 2011-09-09发布 2012-04-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 SN/T2982-2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、中华人民 共和国山东出入境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局. 本标准主要起草人：史秀杰、刘荭、孙颖杰、岳志芹、吴斌、李叶、兰文升、何俊强、贾鹏、郑晓聪、王红英、 叶奕优、陈兵. I SN/T2982-2011 牙鲆弹状病毒病检疫技术规范 1范围 本标准规定了牙鲆弹状病毒病病原分离、酶联免疫吸附试验和聚合酶链式反应检测方法. 本标准适用于牙鲆弹状病毒病的检疫. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T18088出入境动物检疫采样 3概述 牙鲆弹状病毒病(hirame rhabdovirus disease;HRVD)是由牙鲜弹状病毒(hirame rhabdovirus; HRV)引起的一种海水鱼类疾病，主要危害牙鲜等海水鱼类（参见附录A) 4试剂和材料 4.1HRV参考株. 4.2细胞系：BF-2(铜吻鳞鳃太阳鱼细胞系)FHM(海水鲤科鱼类细胞系)、EPC(鲤鱼上皮瘤细胞系)、 CHSE-214(大鳞大麻哈鱼胚胎细胞系)用199培养液（见附录B.2)培养. 4.3 HEPES:4-羟乙基哌嗪乙磺酸 4.4HRV参考抗血清（单克隆抗体）. 4.5兔抗HRV抗体. 4.6酶标羊抗鼠IgG:按照说明书使用 4.7引物：浓度为40μmol/L.其序列如下： GF:5’-GTG-CCA-ATG-GTA-CAC-GGA-CAA-3' GR:5'-TGA-TCT-CCG-CAT-GTG-CCT-CTA-3’ 扩增HRV糖蛋白G基因中515bp的片段. 5器材和设备 5.1酶标测定仪. 5.2倒置显微镜. 5.3恒温培养箱. 5.4PCR扩增仪. 5.5凝胶成像仪. ...
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