SN/T 4053-2014 鸡传染性贫血检疫技术规范.pdf

SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4053-2014 鸡传染性贫血检疫技术规范 Quarantine protocol for chicken infectious anemia 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国发布 国家质量监督检验检疫总局 刮涂层查真伪 SN/T4053-2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由国家认证认可监督委员会提出并归口. 本标准起草单位：中华人民共和国珠海出入境检验检疫局、中华人民共和国东莞出入境检验检 疫局. 本标准主要起草人：沙才华、杨素、陈轩、许彩芸、梁玉英、王岚、陈进会、徐海聂、罗宝正、廖秀云. SN/T4053-2014 鸡传染性贫血检疫技术规范 1范围 本标准规定了鸡传染性贫血(CIA)病毒分离与鉴定、聚合酶链式反应(PCR)、荧光聚合酶链式反应 (荧光PCR)、间接免疫荧光(IFA)以及酶联免疫吸附试验(ELISA)的技术要求. 本标准适用于鸡传染性贫血的检疫. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3病毒分离与鉴定 3.1试剂 3.1.1改良最低要素营养液(DMEM)培养基，配制方法见A.1. 3.1.2马立克氏病病毒转化的淋巴细胞系MDCC-MSB1细胞. 3.1.3标准阳性血清：用CIAV抗原免疫SPF鸡获得的血清. 3.1.4标准阴性血清：无CIAV感染的SPF鸡血清. 3.1.5新生牛血清、青霉素、链霉素. 3.2仪器与器材 3.2.1二氧化碳培养箱. 3.2.2水浴锅. 3.2.3普通冰箱及低温冰箱. 3.2.4离心机. 3.2.5倒置显微镜. 3.2.6微量移液器，容量2gL~20L 20L~200gμL. 3.2.7细胞培养瓶、吸管、离心管、研磨器械、0.2μm微孔滤膜. 3.3样品的采集及处理 CIAV存在于病鸡肝脏、皮肤、脾脏、胸腺、法氏囊、肾脏和骨髓等组织器官中.无菌采集上述组织， 用无血清DMEM制成20%组织悬液，3000r/min离心30min 取上清于70℃处理5min后，加等量 10%三氯甲烷室温处理15min 10000r/min离心20min 取上清用于CAV病毒分离. 1 ...