SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4289-2015 斑点叉尾鮰病毒病检疫技术规范 Quarantine protocol for channel catfish virus disease 2015-09-02发布 2016-04-01实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 0e2 制涂查真伪 SN/T4289-2015 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准修改采用了0IE《水生动物疾病诊断手册》(2006版)中2.1.6：斑点叉尾病毒病. 本标准与OIE《水生动物疾病诊断手册》(2006版)2.1.6相比，主要差别如下： 一将ELISA流程中的封闭液由脱脂奶粉改为1%明胶； 一去除了在ELISA待检样品中加入Triton X-100的步骤，增加了H2O2去除非特异性过氧化物 酶的步骤； —修改了ELISA检测流程中PBST的洗涤次数； ——增加了酚氯仿法抽提病毒核酸的内容； 将内控DNA的长度改为186bp. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国北京出人境检验检疫局. 本标准主要起草人：张曼、王娜、张利峰、景宏丽、吴绍强、邓俊花. I SN/T4289-2015 斑点叉尾鮰病毒病检疫技术规范 1范围 本标准规定了斑点叉尾病毒病临床症状、病原分离、中和试验、酶联免疫吸附试验和聚合酶链式 反应的检测方法. 本标准适用于斑点叉尾病毒病的检疫. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3概述 斑点叉尾病毒病(channel catfish virus disease CCVD)是由斑点叉尾病毒(channel catfish vi- rus CCV)感染斑点叉尾细等温水鱼而引起的病毒性疾病，发病死亡率可达100%.该病曾被世界动物 卫生组织(OIE)列入水生动物疫病名录，我国农业部和国家质量监督检验检疫总局将该病列入《中华人 民共和国进境动物检疫疫病名录》二类传染病（参见附录A). 4设备和器材 4.1倒置显微镜. 4.2生化培养箱. 4.3普通冰箱和低温冰箱. 4.4离心机和离心管. 4.5超净工作台. 4.6PCR仪. 4.7电泳仪. 4.8凝胶成像仪. 4.9酶标仪. 5试剂和材料 5.1水：应符合GB/T6682中一级水的规格. 5.2CCV病毒参考株（阳性对照），由国家指定机构提供. 5.3羊抗CCV的IgG 由国家指定机构提供. 5.4鼠抗CCV的单克隆抗体，由国家指定机构提供. 5.5内控DNA 是一段长186bp的人工合成DNA片段，其两端的序列和CCV的引物序列互补.由 1 ...
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