NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 5400.1-2026
病毒微生物农药草地贪夜蛾核型多角体病毒 第1部分：草地贪夜蛾核型多角体病毒母药
Virus-based insecticides-Spodoptera frugiperda nucleopolyhedrovirus(SfNPV)Part 1:Spodoptera frugiperda nucleopolyhedrovirus technical concentrate (TK)
中华人民共和国农业农村部发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
本文件是NY/T5400《病毒微生物农药草地贪夜核型多角体病毒》的第1部分.NY/T5400已
经发布了以下部分：
第1部分：草地贪夜蛾核型多角体病毒母药：
一第2部分：草地贪夜蛾核型多角体病毒悬浮剂.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部种植业管理司提出.
本文件由全国农药标准化技术委员会（SAC/TC133）归口.
病毒微生物农药草地贪夜蛾核型多角体病毒 第1部分：草地贪夜蛾核型多角体病毒母药
1范围
本文件规定了草地贪夜蛾核型多角体病毒母药的要求，试验方法，产品的检验与验收，标志、标签、包装、储运和质量保证期.
本文件适用于以病毒包涵体为主要成分的草地贪夜蛾核型多角体病毒母药.
2规范性引用文件
件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文本文件.
GB/T1601农药pH值的测定方法GB/T1604商品农药验收规则GB/T1605商品农药采样方法 GB3796农药包装通则GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定GB/T16150农药筛析试验方法 GB/T20813农药产品标签通则GB/T30361农药干燥减量的测定方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
草地贪夜娥核型多角体病毒母药Spodoptera frugiperda nucleopolyhedrovirus（SINPV）technicalconcentrate(TK)
以草地贪夜蛾核型多角体病毒包涵体为主要成分，有效成分含量为草地贪夜蛾核型多角体病毒包涵体的含量，通常情况还会包含伴随病毒扩增而产生的宿主昆虫或细胞的生物组分.
3.2
病毒包涵体occlusionbody（OB）
病毒水平传播的主要载体形式，其结构特征是病毒粒子包埋于蛋白质基质的包涵体中.
生测效价比Potency ratio
生物学活性. 根据药物的药理和对生物体的作用设计试验，比较样品、标准品引起的生物反应，测定药物效价或其
3. 4
菌落形成单位colony forming units（CFU）
由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落.在琼脂平板上在一定温度下，经过一定时间培养后形成的每一个菌落，是计算细菌或真菌数目的单位
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3. 5
杂菌菌落总数numberofmicrobial contaminants
将草地贪夜蛾核型多角体病毒母药样品稀释后涂布在琼脂营养培养基上，在一定温度下，经过一定时间培养所得到的微生物（真菌和细菌）菌落数之和.
4要求
4.1外现
通常为灰白色至棕褐色均匀粉状物，无可见机械杂质，不应有结块；或者灰白色至棕褐色液体，存放过程中可能出现沉淀，经搅动能恢复为均匀的悬液，不应有结块.
4.2规范项目及指标
草地贪夜蛾核型多角体病毒母药还应符合表1的要求.
表1草地贪夜核型多角体病毒母药控制项目指标
项目 指标病毒包函体数量OB/mL（（OB/g） 100 亿杂菌菌落总数.CFU/ml.（CFU/g） 生测效价比（标准品LC/待测样品LC）.% ≤1. 0 ×10 ≥80 0pH范围 5. 0 ~7. 5干燥减量，% 细度（通过75μm标准第）.% ≥95. 0 ≤5.0当母药为固体时.
5试验方法
5.1一般规定
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，所述溶液均为水溶液，试验用水为GB/T6682中规定的三级水.
5.2抽样
按GB/T1605中"固体制剂采样”液体制剂采样”方法进行.用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量固体应不少于100g，液体不少于200mL.
5.3病毒毒种的签定
提取试样中病毒DNA作为模板，分别使用根据草地贪夜蛾核型多角体病毒me53基因序列设计的特异性引物（已连接m13通用引物序列），以及根据核型多角体病毒Ief-9基因设计的简并引物（已连接m13通用引物序列），进行PCR扩增反应并进行琼脂糖凝胶电泳检测为单电泳条带后，用or13通用EF035042=NC_009011）的me53基因和lef-9基因的核苷酸序列进行比对分析，除引物序列外的核昔 引物对PCR产物进行测序，将测序结果与草地贪夜核型多角体病毒3AP2株（GenBenk序列号：酸一致性均大于98%，即认定试样中的病毒为草地贪夜核型多角体病毒.
草地贪夜蛾核型多角体病毒有效成分描述见附录A.
草地贪夜蛾核型多角体病毒毒种的鉴定按照附录B的规定执行.
5.4病毒包涵体含量的测定
5.4.1方法提要
草地贪夜蛾核型多角体病毒包涵体含量的测定采用血球计数板计数法.称取少量病毒试样，用定量的水稀释成水悬浮液，并稀释至适当倍数后，滴加在血球计数板上，在光学显微镜下计数.根据血球计数板上病毒包涵体的数量以及稀释倍数，计算出单位质量（体积）病毒包涵体的数量.
5.4.2仪器、设备
分析天平：精确至0.0001g.
