ICS11.220 B41 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T27518—2011 西尼罗病毒病检测方法 Diagnostic of west nile virus infections 2011-11-21发布 2012-03-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布 GB/T27518—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国农业部提出. 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口. 本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局、北京百欧赛地生物工程技术开发中心， 本标准主要起草人：杨秀娟、孙福军、丁若愚、田茵、田睿、王飞、杨静. GB/T27518-2011 西尼罗病毒病检测方法 1范围 本标准规定了西尼罗病毒的反转录聚合酶链反应(Reverse Transcription一Polymerase Chain Re- action RT-PCR)、蚀斑减少中和试验(Plaque Reduction Neutralization Test PRNT)和西尼罗病毒的 分离方法. 本标准适用于易感动物的西尼罗病毒病的检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. ABTS diammonium2 2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate):2 2'-连氮基-双-(3-乙基苯 并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐 AMV:鸟类成随细胞白血病病毒(avian myeloblastosis virus) BSA:牛血清白蛋白(bovine serum albumin) CPE:细胞病变效应(cytopathic effect) cDNA:互补DNA(plementary DNA) DEPC:焦碳酸乙二酯(diethylpyrocarbonate) DNA deoxyribonucleic acid:脱氧核糖核酸 dHzO:双蒸水(double distilled water) dNTP:脱氧核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate)含有dCTP、dGTP、dATP、dTTP四 种脱氧核糖核苷 EDTA:乙二胺四乙酸(ethylene diaminetetraacetic acid) 6-FAM:6-羧基荧光素(6-carboxyfluorescein) HEPES:羟乙基呱嗪乙硫磺酸(N-2-hydroxyethylpiperazine-N-ethane-sulphonicacid) MEM:基础培养基(minima essential medium) Oligo dT:多聚T再加上一小段随机碱基（几个碱基）构成的引物，用于RT-PCR PBS:磷酸盐缓冲生理盐水(phosphate belanced solution) PFU:蚀斑形成单位(plaque forming units) PRNT:蚀斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test) RNA:核糖核酸(ribonucleic acid) RNasin:核酸酶抑制剂(RNA enzyme inhibitor) TAE:醋酸盐E...
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