NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 4476-2025
大豆抗疫霉根腐病鉴定技术规程
Technical code of practice for resistance evaluation of soybeanagainstphytophthora rootrot
中华人民共和国农业农村部发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020（标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则>的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口.
本文件起草单位：吉林省农业科学院.
本文件主要起草人：张金花、张伟、苏前富、李小宇、田成丽、李启云、李茂海、高月波、王永志、刘金文、张春雨、李建平.
大豆抗疫霉根腐病鉴定技术规程
1范圆
病情调查、抗性评价、无害化处理等阶段的操作指示，描述了建立鉴定记录的追溯方法. 本文件确立了大豆抗疫霉根腐病人工接种法鉴定程序，规定了试验条件、菌种来源及保存、鉴定方法、
本文件适用于大豆品种/种质对疫霉根腐病抗性的人工接种鉴定及评价.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
NY/T2114大豆疫霉病菌检疫检测与签定方法 NY/T3059-2016大豆抗孢囊线虫鉴定技术规程NY/T3114-2017大豆抗病虫性鉴定技术规范
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3. 1
大豆疫霉根腐病soybean phytophthora root rot
由大豆疫霉（Phytophthora sojaeKaufman&.Gerdemann）侵染大豆引起根或茎基部腐烂、叶片变黄萎、严重时猝倒死亡的病害.
注：大豆疫霉根腐病菌和症状芜附录A
3.2
抗病性disease resistance
植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状.
抗病性鉴定evaluation of disease resistance
通过适宜的技术方法鉴定大豆对疫霉根腐病的抵抗水平.
3. 4
接种体inoculum
用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分.
4大豆抗疫霉根腐病鉴定程序的构成
如图1所示. 大豆抗疫霉根腐病鉴定程序包括试验条件及材料准备、接种、调查、抗性评价4个阶段.程序流程图
5试验条件
2 000 1x~2 500 1x 试验要求在可控条件的温室或大棚中进行.温度20℃～30℃，相对湿度75%～90%，光照度
6菌种来源及保存
6.1菌种来源
图1大豆抗疫霉根腐病鉴定程序流程
选用有代表性大豆疫霉菌株，非发生区开展工作时应取得主管部门的许可.
6.2菌种保存
将生长于胡萝卜琼脂培养基（CA培养基）菌种置于10℃~17C冰箱中短期（1个~2个月）保存或用液氮长期保存.见附录B.
7鉴定方法
7.1试验材料种植
将试验材料播种在装有无菌土的营养钵（直径10cm~15cm，高度10cm）中，等距、等深插种，每份签种，可选取”九农21"作为感病对照.出苗前温室或大棚温度控制在25℃~30℃，出苗后温度控制在 定材料5体为1个重复，重复3次，每钵保苗3株，即每个材料插种15钵，保苗45株.设置感病对照品20 ℃~25 ℃
7.2接种体准备
选取分离纯化的大豆疫霉菌株，将保存的菌种在CA培养基上，25℃条件下活化1d~2d，然后转接到CA培养基上繁殖6d~7d.
7.3接种时期和方法
7.3.1接种时期
在大豆的真叶完全展开时.
7.3.2接种方法
口，深度不超过茎秆直径的1/3.取菌落前缘5mm×5mm菌丝块菌面朝下贴在植株伤口上，以只划伤 采用下胚轴伤口接种法.用灭菌后的刀片在大豆子叶节下方1cm处纵向轻划长度约为1cm的伤口不接种为空白对照组，接种后在25℃黑暗条件保湿培养48h.
8病情调查
8.1调查时间
结束保湿后第4d~第6d调查，同一批次当天完成调查.
8.2调查方法
按公式（1)计算植株死亡率.
..(1)
式中：
P-植株死亡率的数值，单位为百分号（%）；
n死亡病株数；N接种株数.
9抗性评价
9.1有效性判别
当设置的感病对照品种达到P≥70%，视该批次鉴定有效.
9.2抗性评价标准
根据鉴定材料的植株死亡率确定其对大豆疫霉根腐病的抗性水平，划分标准如下：
表1大豆对疫霉根腐病抗性评价标准
植株死亡率，$ 0≤P≤30 抗病 Resistant(抗/R) 抗性评价30<P<′0 中间类型Intermediate(中间里/1)70≤P<100 感病Susceptible(感/S) 9.3重复鉴定 参鉴材料中初次鉴定表现为抗病的品种/种质需进行3次～5次重复签定，以进一步确定其抗病性. 9.4抗性判断 对初次鉴定结果和重复签定结果进行比较，以记载的最高死亡率为最终鉴定结果，并依此结果确定签定材料最终抗性水平. 10鉴定记录 大豆抗疫霉根腐病鉴定结果记载表见附录C. 11无害化处理 剩余的接种体带回实验室经灭菌处理将抗性鉴定测定后的大豆植株和营养钵集中楚烧处理，用于栽培大豆的基质带回实验室进行160℃千热灭菌处理.
