中华人民共和国国家标准
GB 31604.15-2016
食品安全国家标准
食品接触材料及制品2，4，6-三氨基-1，3，5-三嗪（三聚氰胺）迁移量的测定
中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会 发布
前言
本标准代替GB/T23296.15-2009《食品接触材料高分子材料食品模拟物中2.4，6-三氨基-1.3，5-三嗪（三聚氰胺）的测定高效液相色谱法》. 本标准与GB/T23296.15-2009相比，主要变化如下：
标准名称修改为食品安全国家标准食品接触材料及制品2.4，6-三氨基-1，3.5-三嗪（三聚氰胺）迁移量的测定”.
食品安全国家标准
食品接触材料及制品2，4，6-三氨基- 1.3，5-三嗪（三聚氰胺）迁移量的测定
1范围
本标准规定了食品接触材料及制品（三聚氰胺甲醛树脂及其成型品）三聚氰胺迁移量的测定方法.本标准适用于食品接触材料及制品（三聚氰胺甲醛树脂及其成型品）三聚氰胺迁移量的高效液相色谱法检测.
2原理
行迁移试验，浸泡液处理后所得试液采用高效液相色谱法检测，并换算为三聚氰胺特定迁移量，根据食 将食品接触材料及制品（三聚氰胺甲醛树脂及其成型品）与食品模拟物接触，在特定浸泡条件下进品类别，按照GB31604.1选择对应的食品模拟物以及迁移试验条件（时间、温度）.食品模拟物为水，4%（体积分数）乙酸，10%、20%、50%～95%（体积分数）乙醇时，浸泡液作为试液直接进样；食品模拟物为植物油时，对浸泡液萃取处理后所得试液直接进样，利用高效液相色谱法测定试液中的三聚氰胺含量，按照GB5009.156的规定确定迁移试验的浸泡液体积和试样接触面积，依据公式换算为三聚氰胺特 定迁移量（迁移物析出量）.
3试剂和材料
器具应避免使用塑料材质. 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.试验中容器及转移
3.1试剂
3.1.1水性、酸性、酒精类、油性食品模拟物：所用试剂依据GB31604.1的规定. 3.1.2氢氧化钠（NaOH）.3.1.3二水合磷酸二氢钠（NaHPO2HO）.3.1.4异丙醇[（CH）CHOH].3.1.5甲醇（CHOH）：色谱纯.3.1.7乙晴（CHCN）：色谱纯. 3.1.6异辛烷[（CH）CHCHC（CH），].
3.2试剂配制
3.2.2氢氧化钠溶液（100g/L)：称取10g氢氧化钠溶解在100mL水中. 3.2.1水性、酸性、酒精类、油基食品模拟物：按GB5009.156规定配制.3.2.3磷酸二氢钠缓冲溶液（o.005mol/L，pH=6.5）：称取0.780g二水合磷酸二氢钠，用900mL水溶解，用100g/L氢氧化钠溶液（3.2.2）调整其pH至6.5，之后用水定容至1000mL.
GB 31604.15-2016
3.2.4异丙醇溶液（100mL/L)：量取10mL异丙醇溶解在100mL水中.
3.2.5甲醇-水混合液（11）：量取100mL的甲醇加人到体积为100mL的水中.
3.3标准品
3.3.1三聚氰胺（CHN ）（CAS号：108-78-1)：纯度≥99%
3.4标准溶液配制
3.4.1三聚氰胺标准贮备溶液（1000mg/L)：准确称取三聚氰胺标准品50mg，精确到0.1mg于 50mL容量瓶中，加人40mL水，在水浴（温度为70C）中超声15min~30min，使三聚氰胺能够充分水定容.
3.4.2三聚氰胺标准中间液（100mg/L)：吸取5.00mL三聚氰胺标准贮备溶液于50mL容量瓶中，用
3.4.3食品模拟物标准工作溶液的制备
3.4.3.1水性、酸性、酒精类食品模拟物标准工作溶液
分别准确吸取三聚氰胺标准中间液（3.4.2）0mL、0.125mL、0.250mL、1.25mL、2.50mL于25mL容量瓶中，用水性食品模拟物定容，其中三聚氰胺的浓度分别为0mg/L、0.500mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L，采用同样方式，分别用酸性、酒精类食品模拟物配制同样浓度系列的三聚氰胺标准工作溶液.
3.4.3.2油性食品模拟物标准工作溶液
分别准确称取5g（精确到0.01g）油性食品模拟物（精制玉米油或橄榄油）.置于5个25mL具塞玻璃试管中，用可调移液器分别移取0μL、25.0μL50.0pL、250μL、500μL三聚氰胺标准中间液（3.4.2）至试管中，得到油性食品模拟物标准工作溶液，其中三聚氰胺的浓度分别为0mg/kg、0.500mg/kg、 1.00 mg/kg、5.00mg/kg、10.00 mg/kg.往每个试管中加人 5.0 mL异辛烷(3.1.6)混匀，再加人5.0 mL异丙醇溶液（3.2.4），将试管放在70C恒温水浴中超声萃取30min，然后离心分层.吸取下层水溶液1 mL~2mL，通过0.22μm的有机相微孔滤膜过滤后所得试液供高效液相色谱仪进样测定用.
3.5材料
有机相微孔滤膜：0.22μm.
4仪器和设备
4.1高效液相色谱仪：配置紫外吸收检测器或发光二极管阵列检测器.4.2涡旋振荡器.4.3超声恒温水浴.4.5分析天平：感量0.0001g和0.01g. 4.4离心机：转速大于4000r/min.
5分析步骤
5.1食品模拟物试液制备
5.1.1食品模拟物浸泡液的制备
根据三聚氰胺甲醛树脂及其成型品的预期用途和使用条件，按照GB5009.156及GB31604.1的要求，选择对应的食品模拟物以及迁移试验条件进行迁移试验，可以得到食品模拟物浸泡液，如果食品模 拟物浸泡液不能马上进行下一步试验，应将食品模拟物浸泡液于0℃～4C冰箱中避光保存.
在食品模拟物浸泡液温度与室温一致后，进行下一步试液的制备.
5.1.2食品模拟物试液的制备
5.1.2.1水性、酸性、酒精类食品模拟物试液
准确称取迁移试验后得到的水性、酸性、酒精类食品模拟物浸泡液约1mL，通过0.22μm的有机相微孔滤膜过滤后所得试液供高效液相色谱仅进样测定用.
5.1.2.2油性食品模拟物试液
准确称取5g（精确到0.01g）迁移试验后得到的油性食品模拟物浸泡液，置于25mL具塞玻璃试管中，加人5.0mL异辛烷混匀，再加人5.0mL异丙醇溶液，将试管放在70C恒温水浴中超声萃取 30min，然后离心分层.吸取下层水溶液1mL～2mL，通过0.22μm的有机相微孔滤膜过滤后所得试液供高效液相色谱仪进样测定用.
5.1.3空白试液的制备
拟物按照5.1.2.2的操作，过滤后所得为空白试液. 未与食品接触材料或制品试样接触的水性、酸性、酒精类食品模拟物按照5.1.2.1操作，油性食品模
5.2仪器参考条件
a）色谱柱：氨基柱，柱长250mm，柱内径4.6mm，粒度5μm，或同等性能的色谱柱.b）流动相：乙晴-磷酸二氢钠缓冲溶液（7525，体积比）. c）流速；1.0mL/min.d）柱温：室温.e）进样量：20pl.f）检测波长：230nm.g）时间：20 min.
5.3标准工作曲线的制作
按照5.2所列仅器参考条件，对标准工作溶液进行检测，测定相应的峰面积.以三聚氰胺浓度为横坐标，以对应的峰面积为纵坐标，绘制食品模拟物标准工作曲线，得到线性方程.
5.4食品模拟物试液的测定
按照5.2所列仅器参考条件，对食品模拟物试液进行检测，以保留时间定性，以峰面积定量，根据标准工作曲线得到待测试液中三聚氰胺的浓度.同时对空白试液进行检测.
