GH
中华人民共和国供销合作行业标准
GH/T1114-2015
蜂胶中阿替匹林C的测定方法 高效液相色谱法
Methodfor the determination of artepillin Cin propolis-High-performance liquid chromatography
中华全国供销合作总社 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由中华全国供销合作总社归口. 本标准由浙江大学提出.本标准起草单位：浙江大学、蜂乃宝本铺（南京）保健食品有限公司.本标准主要起草人：胡福良、张翠平、刘嘉，
引言
本文件的发布机构提请注意，声明符合本文件时，涉及本文件相关的专利（ZL201310075055.4）的使用.
本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场.
联系方式获得： 就专利授权许可进行谈判，该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案.相关信息可以通过以下
专利持有人：浙江大学.
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请注意除上述专利外，本文件的某些内容仍可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任.
蜂胶中阿替匹林C的测定方法 高效液相色谱法
1范围
本标准规定了高效液相色谱法测定蜂胶中阿替匹林C的方法.本标准适用于蜂胶中阿替匹林C的定性和定量测定.本标准的检出限为0.024mg/g.定量限为0.080mg/g.
2规范性引用文件
件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1酒神菊属型蜂胶Baccharis-typepropolis以酒神菊属（Baccharis）为主要植物来源的蜂胶. 巴西绿蜂胶（俗称）
3.2dodaddod以杨属（Populus）为主要植物来源的蜂胶.
3.5-二异戊烯基-4-羟基肉桂酸，分子结构式见图1.
相对分子质量为300.40，是一种2，4，6-三取代苯酚类物质.
阿替匹林C存在于Baccharis、Relhania和Flourensiaheterolepis等植物中，特别是在巴西东南部的BaccharisdracunculijfoliaDC.中大量存在，被认为是巴西绿蜂胶的特征性成分.
图1artepillinC的分子结构
4原理
试样经85%乙醇超声提取、离心、过滤、定容，用0.45um有机系滤膜过滤后得澄清液，用反相高效液相色谱仪经紫外检测器在310nm处检测阿替匹林C，外标法定量，根据保留时间和峰面积进行定性和定量.
5试剂与材料
除非另有规定，试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中一级水的规定要求.
5.1甲醇：色谱纯.5.2无水乙醇：分析纯.5.41%乙酸溶液（体积分数）：量取10mL乙酸（5.3）倒人加有900mL水的容量瓶中，用水定容于1000mL， 5.3乙酸：分析纯.经0.45μm游膜过滤，5.5阿替匹林C标准品：纯度≥98%，CAS：72944-19-5.5.7阿替匹林C标准工作液：吸取适量1.0mg/mL的标准储备液（5.6），用甲醇溶液（5.1）分别稀释成 容量瓶中，加甲醇溶液（5.1）使其溶解并定容至刻度，混匀，于4C冰箱保存，保存期不超过6个月.现用现配.
5.8滤膜：0.45μm有机系滤膜.
6仪器与设备
6.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器.6.2粉碎机，6.3超声波清洗器. 6.4离心机.6.5分析天平：精确至0.0001g.
7试样制备与保存
从待测蜂胶样品中取出约50g，密封，并做标记，于一18C冷冻保存.取出冷冻贮存的试样20g~30g，迅速用粉碎机粉碎，过40目筛.
8操作步骤
8.1试样溶液的制备
准确称取0.25g蜂胶试样，精确到0.01g，用5mL85%乙醇超声提取15min（25kHz，功率为50W)，然后在离心机上以4000r/min的转速离心15min，取上清液置于50mL容量瓶中，重复提取离心3次，合并上清液，用85%乙醇定容至50mL，经0.45μm滤膜（5.8）过滤，滤液用于液相色谱测定.
