LS
中华人民共和国粮食行业标准
LS/T6112-2015
Inspection of grain and oils-Detection of zearalenone in grain-Rapid quantitative method ofcolloidal gold technique
国家粮食局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009及GB/T20001.4-2001给出的规则起草.
本标准由国家粮食局提出.
本标准由全国粮油标准化技术委员会（SAC/TC270）归口.
本标准负责起草单位：山西粮食质量监测中心，
本标准参与起草单位：北京博欧实德生物技术有限公司、北京市粮油食品检验所、辽宁省粮油检验监测所、中粮集团东北区域实验室、新疆粮油产品质量监督检验站、山东省粮油检测中心.
本标准主要起草人：王恒、宋泽伟、李华、郭健、崔国华、李慧娟、马宏、崔国有、王培.
粮油检验粮食中玉米赤霉烯酮测定 胶体金快速定量法
1范围
本标准规定了玉米赤霉烯酮的胶体金快速定量检测方法的原理、试剂、材料、仪器设备、样品制备、样品测定与结果表述.
本标准适用于小麦、玉米和大米等拍食及其制品中玉米本霉烯酮的铁速定量检测.
方法检测限为5 kg.
2规范性引用文
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所存的修改单）适用于本文件.
GB5491粮食、油料检验托样、分样法GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T2740-2008 实验宣质量控制规范 食品理化检测
3原理
酮含量相关.用读数仅测定检测条上检测线和质控线颜色保浅，根据颜色深涉和读数仪内置曲线自动 试样提联液中医米赤霉爆酬与检测条中胶体金微粒发生呈色反应，颜色深涉与试学中玉米素霉烯计算出试样中玉来赤霉烯酮含量.
4试剂
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB 6682中三级水的要求，
4.1确释缓冲液：由玉米赤霉烯酮胶体金检测条配套提供，或按照产品使用说明书配制，
4.2试样提取液：70%（体积分数）甲醇溶液.
5仪器设备及材料
实验室常规仪器、设备及材料.
5.2粉碎机：可使试样粉碎后全部通过20目筛.
5.1天平：分度值0.01g，
5.3离心机：转速不低于4000r/min.
5.4涡旋振荡器.
5.5孵育器：可进行45C恒温（控温精度士1C）孵育，具有时间调整功能.
5.6读数仪：可测定并显示胶体金定量检测条的测定结果.
LS/T 6112-2015
5.7ROSA玉米赤霉烯酮胶体金快速定量检测条”：需冷藏储存，具体储存条件参照使用说明；技术要求见附录A
5.8针头式滤器：滤膜材质规格为RC15，孔径0.45μm.
5.9滤纸：采用Whatman2V（或等效）滤纸.
6样品制备
6.1扦样与分样
按照GB5491执行.
6.2样品处理
6.2.1取有代表性的样品500g，用粉碎机（5.2）粉碎至全部通过20目筛，混匀.
6.2.2准确称取10.00g试样于100mL具塞锥形瓶中，加人20.0mL试样提取液（4.2），密闭，用涡旋振荡器（5.4）振荡1min~2min，静置后用滤纸（5.9）过滤，或取1.0mL~1.5mL混合液于离心管中，用离心机（4000r/min）（5.3）离心1min.取滤液或离心后上清液100gL于另一离心管中，加人1.0mL稀释缓冲液（4.1），充分混匀待测.如样品为小麦，需将稀释后的混合提取液用针头式滤器（5.8）过滤， 即为待测溶液.
注：不同厂家玉米赤霉烯酮胶体金快速定量检测条所用的样品处理方法可能不同，应按照检测条使用说明中规定的样晶处理方法进行操作.
7样品测定
7.1将胶体金检测条（5.7）从冷藏状态（2C~8C）取出放置至室温.将孵育器（5.5）预热至45℃.将 检测条（5.7）平放在孵育器（5.5）凹槽中，打开加样孔.
7.2准确移取300L待测溶液（6.2.2），加人检测条加样孔中，关闭加样孔及孵育器（5.5）盖.
7.3孵育5min后，取出检测条（5.7）观察C线（质控线）和T线（检测线）显色情况，若出现下述情况， 视为无效检测.
a）C线不出现；b）C线出现，但弥散或严重不均匀； c)C线出现，但T或T线弥散或严重不均匀，
7.4选择读数仪（5.6）玉米赤霉烯酮检测频道并设定基质为00（MATRIX00），开始样品测定，测定需在2min内完成，读数仪（5.6）自动显示样品中玉米赤霉烯酮的含量.
按照7.1~7.4进行测定，其中基质设定为01（MATRIX01）. 若读数仪显示“350”，需移取300L待测溶液于离心管中，加人1.0mL稀释缓冲液后混匀后，
注：不同厂家孵育器和读数仅的使用方法可能有所不同，应按照产品使用说明的规定进行操作.
8结果表述
试样中玉米赤霉烯酮含量由读数仪自动计算并显示，单位为微克每千克（μg/kg）.
9重复性
在同一实验室，由同一操作者使用相同仪器，按相同的测定方法，并在短时间内对同一被测试对象相互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值大于其算术平均值20%的情况不超过5%.
LS/T 6112-2015
附录A
（规范性附录）
胶体金快速定量检测条性能评价要求
本附录参照GB/T27404-2008的要求，规定了胶体金定量检测试纸条的技术性能要求，用于对胶体金快速定量检测类产品的技术性能进行验证，以确认其适用于本方法，
A.1准确度
分别用接近于标准最高允许限量（60ug/kg）和本方法线性范围内适当含量水平的3个实物标准样品，计算检测条检测结果与实物标准样品的偏差，3个浓度水平的偏差均应控制在一20%~20%之间，
A.2精密度
分别用接近于本方法检测限（5μg/kg）、标准最高允许限量（60μg/kg）和本方法线性范围内适当含量水平的3个实物标准样品，每个浓度水平测定不低于6次，计算检测条批内变异系数，变异系数应小于20%，
A.3检测限
用阴性样品按本方法进行平行测定（一般不少于20次）所得平均值加3倍标准偏差，其结果应小于或等于产品灵敏度标示值.
A.4批间稳定性
采用60pg/kg左右浓度水平的实物标准样品，不得低于6个批次，每个批次测定不低于2次，批内测定取平均值，计算检测条批间变异系数，变异系数应≤20%.
A.5质控
阳性质控样品的检测结果应在50pg/kg~350pg/kg范围内，表明本检测条质量合格. 按照产品说明要求，检测检测条自带的阴性质控和阳性质控样品，阴性质控的检测结果小于5pg/kg，
