中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 4426-2016
出口食品加工卫生表面取样技术方法
Methods for sampling techniques from surfaces in the food Industry for export
stuffs-Horizontal methods for sampling techniques fromsurfaces using contact plates and swabs MOD)
（ISO 18593:2004，Microbiology of food and animal feeding
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口.本标准由中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中华人民共和国山东出人境检验检疫局负责起草. 本标准主要起草人：郑晶、郑麟毂、陈舒奕、陈俊玉、雷质文、吴文凡、黄菁菁、陈彬、林杰、黄晓蓉.
出口食品加工卫生表面取样技术方法
1范围
本标准适用于食品及食品原料生产环境的卫生表面取样.
本标准规定了使用接触板或拭子对食品工业环境（和食品加工车间）的表面取样技术方法.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验黄落总数测定
SN/T0330出口食品微生物学检验通则
3取样说明
3.1由于本方法并非可靠定量及不可复测，结果仅可用于趋势分析
3.2将含有适当琼脂培养基的接触板（或玻片）紧贴于测试表面 培养后，根据生长菌落的计数结果评估表面的污染程度.
3.3使用拭子方法，应先标记（如采用模板）被检测区域的指定表面后拭子放人含有灭菌稀释液或中和液的试管或瓶子中，用手摇匀. 如果表面采用灭菌的湿润布料或海绵 再擦拭.擦拭后折断拭子柄，将擦拭，取样后应储存于定量的稀释液中（如100mL稀释液用于 的取样面积）.
3.4在实验室，将原液按相关微生物计数标准述的步骤对微生物进行计数，必要时原液可进一步10倍稀释.培养时间和温度依据被测微生物的类型而定.
3.5使用选择性培养基时，应进行相应的确证试验.通过计算确认菌的数量，得出每平方厘米或每个拭子目标菌的菌落形成单位.
3.6取样之后，必要时对表面进行清洁和消毒，清除取样过程中在取样表面残留的营养物质的痕迹.
4中和液
更多相关信息见目标微生物检测或计数相关国家标准.
预计有消毒剂残留的情况时，稀释液和接触板培养基中应加入适当的中和剂来消除消毒剂对微生物生长的抑制效果.
中和液的基础一般为缓冲蛋白陈水、盐陈或其他适当的稀释液（如四分之一浓度林格氏液、pH7.5磷酸盐缓冲液、1g/L.蛋白陈溶液）.
5仪器设备和玻璃器Ⅲ
5.1总则
仅器设备和玻璃器Ⅲ一般要求见SN/T0330.如果有相同规格的一次性用品，可允许替代重复使
SN/T 4426-2016
用的最璃器Ⅲ.
5.2接触板
上应形成半月形凸起状.根据采样表面的种类，使用不同直径或面积的接触板. 用于表面采样直径65mm塑料碟，含有定量琼脂培养基（根据目标微生物来选择），琼脂在接触板
注：可使用其他任何能接触到取样表面的设备（含有培养基的活动或用定容器），如玻片（5.3）.
5.3玻片
合成玻片（7cm²~10cm²）.单面或双面覆盖一层生长培养基（根据目标微生物面定）.
5.4拭子
装在试管或封套中，带棉花或合成材料（如藻酸盐或人造纤维）的拭子，柄易于折断.拭子应采用独立灭菌包装.所用材料应证实不含抑菌物质.
注：对于某些类型的表面，取样后残留的棉繁会污桑这些表面的内部零件.
5.5布料
湿润、灭菌的编织材料，不含抗菌物质，独立包装于灭菌塑料袋中，用于大面积表面取样（≥100cm²）.
5.6海绵
湿润、灭菌、平整的方形海绵，不含抗菌物质，独立包装于灭菌塑料袋中，用于大面积表面取样(≥100 cm²).
5.7容器
如瓶子、试管或烧瓶，适用于灭菌和储存培养基、稀释液、中和剂等.
5.8冰盒
具隔热性，在样品运输至实验室途中能使样品保持低温.
5.9刻度吸管
广口吸管，标称容量1mL.分度值0.1ml，或100pL~1000pL可调移液器.
5.10混匀器
用于混合试管中的液体.
5.11螺动式均质器或平摇式均质器
以螨动（蠕动式均质器）或振动（平摇式均质器）方式，用无菌塑料袋制备初始悬浊液.
5.12培养血
直径65mm塑料培养皿.
5.13pH计
读数0.01pH单位，在25C±1C时测量精度达到±0.1pH单位.24
5.14模板
由耐腐蚀材料制成（如一块中空面积为20cm²～100cm²的不锈钢薄片），易于清洁和灭菌.
6取样方法
6.1总则
实验室接收的样品应为表面的典型测试样，运输和储存过程中不得被更换，不含有消毒剂残留.
板评估消毒清洁程序的效果前，等待一段时间. 消毒剂通常按接触消毒时间为5min~15min的效果进行配制.根据消毒规范，在用拭子或接触
由于消毒剂种类繁多，没有一种中和剂能够中和种类的消毒剂，不同类型消毒剂可用相应的中和剂进行中和.一般情况下，山梨糖醇酐单油酸酯溶液和卵磷脂溶液可用于中和残留的消毒剂（如季铵化合物、两性霉素）.硫代硫酸钠溶液可用于中和含卤素基团的消毒剂.过氧化氢酶可用于中和含过氧化氢的消毒剂.
大部分情况下，可按表1中成分配制中和剂.配制蛋白陈（1g/L）溶液或氯化钠（8.5g/L）溶液，121C灭菌15min.作为中和剂的溶剂.
表1大部分情况下可用的中和剂
成分 浓度山梨糖醇酐单油酸酯 那磷脂 30 g/L 3 g/l.硫代硫酸钠 5 g/LL-组氨酸 1 g/l 皂角苷 30 g/L
6.2接触板法
接触板或玻片从运输容器中取出后，将带有琼脂的一面稳固的按压于测试表面，避免发生位移，在接触时间10s，压力相当于500g的情况下效果最佳，接种完毕后立即收好接触板或玻片，放回运输容器中.
6.3拭子或布料/海绵法
6.3.1拭子法
去除无菌包装后，将拭子末端浸人含稀释液的试管，在试管壁上挤压拭子末端以去除多余水分，拭子末端在待测表面20cm²~100cm²面积内快速移动，同时用拇指和食指按正确角度来回旋转拭子.将拭子放人含有稀释液的试管，并用无菌方式将柄剪断.
6.3.2布料/海绵法
打开装有布料或海绵的塑料袋或容器，用灭菌手术钳或带有灭菌手套的手取出布料或海绵，用稀释液充分湿润.在潮湿表面取样，则不必进行上述步骤.
从两个相互垂直方向对选择的表面进行取样，布料或海绵的每个面采用一个方向.取样后将布料或海绵放人灭菌容器中，加人稀释液并盖好，保证布料或海绵保持湿润.
