中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 4526-2016
出口水产品中有机硒和无机硒的测定 氢化物发生原子荧光光谱法
Determination of organic selenium and inorganic selenium in aquatic productsfor export--Hydride generation atomic fluorescence spectrometry method
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口.本标准起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局、浙江工商大学.本标准主要起草人：鲁丹、张虹、俞琰垒、徐庆兵、郭利攀.
出口水产品中有机硒和无机硒的测定 氢化物发生原子荧光光谱法
1范围
本标准规定了出口水产品中总晒和无机晒的氢化物发生原子荧光光谱测定方法，有机晒由总晒减去无机晒得到，
本标准适用于出口水产品中有机硒和无机硒的测定，
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件，
GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备 GB5009.93食品安全国家标准食品中晒的测定（第一法氢化物原子荧光光谱法）GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法原理
水产品中的晒以不同的化学形式存在，包括无机硒和有机硒.试样中无机硒经（1十1）盐酸水浴条件下振荡提取，与有机晒分离，用氢化物发生原子荧光光谱法测定无机硒含量.有机晒含量由总硒含量减去无机硒含量得到.
4试剂和材料
除非另有规定，本方法所使用的试剂均为优级纯，实验用水应符合GB/T6682中规定的一级水.4.1盐酸（p=1.19g/mL）.4.2盐酸（11）：吸取50mL盐酸（4.1）缓慢加人40ml水中，冷却后用水定容至100ml4.3盐酸（298）：吸取2mL盐酸（4.1）缓慢加人80ml水中，冷却后用水定容至100ml4.5硬氢化钠（10g/L）：称取10.0g硼氢化钠溶于氢氧化钠（4.4）中，用氢氧化钠（4.4）定容至1 000 ml 4.6铁氰化钾（100g/L）：称取10.0g铁氰化钾溶于水中，用水定容至100mL，摇匀.4.7硒标准储备液（1000pg/mL）：各元素标准溶液按GB/T602方法配制，或直接使用市售有证国家 标准溶液.4.8硒标准应用液（1.0μg/ml）：由硒标准储备液（4.7）以盐酸（4.3）逐级稀释而成.4.9环已烷.4.10正辛醇.4.11氢气：纯度≥99.99%.
5仪器和设备
5.2恒温水浴振荡器.5.3电热板.5.4组织捣碎机.
5.1原子荧光光度计，附硒空心阴极灯.
6分析步骤
6.1试样制备
取代表性样品约500g，取其可食部分切碎后，用搞辞机将样品打虚浆状，混勾，装人洁净容器，密
封，标明标记.
6.2试样保存
试样于-18C下保存.
6.3总的测定
总硒的试样制备按6.1执行，测定按GB5009.93食品中晒的测定（第一法氢化物原子荧光光谱法）进行.
6.4无机晒的测定
6.4.1试样处理
盐酸（4.2）定容至25mL，混匀，置于60-C恒温水溶中200r/min振荡浸提18h.取出冷却至室温，再经 称取2.5g试样（6.1）（精确到0.01g）置于25ml.具塞刻度试管中，加人盐酸（4.2）20.00mL，并用人5 ml.环已烷（4.9）萃取，收集水相于烧杯中.准确吸取4.00ml.水相于10mL具塞刻度试管中.置于部水浴中20mim.取出冷却至室温，分别加人1.0mL铁
脱脂棉过滤.将滤液倒人分液漏斗中，加氯化钾（4.6）、3滴正辛醇（4.10），用水定容至10ml，哲匀待测
6.4.2空白试验
除不称取试样外，均按上述步骤6.4.1进行.
6.4.3标准系列溶液的配制
分别准确吸取硒标准应用液（4.8）0 00mL、0 050mlL、0.200mL、0.400mL、0.60mL、1.00mL于50mL容量瓶中，分别加人10mL盐酸（4.1）、5.0mL铁氰化钾（4.6）、3滴正辛醇（4.10），用水稀释并定容至刻度，摇匀待测，晒标准系列溶浓度见表1.
表1硒标准系列溶液
单位为微克每升
晒标准系列溶液浓度0 1 00 4 00 8 00 12.0 20.0注：标准系列溶液中晒的具体浓度可根据仪器的灵敏度及样品中硒的实际含量作适当调整.
6.4.4测定
6.4.4.1仪器工作条件
选择适当的仪器工作条件或参照表A.1.
6.4.4.2标准曲线
以盐酸（4.3）为载流、硼氢化钠（4.5）为还原剂，测定空白溶液的荧光强度后，按顺序由低到高分别测定晒系列标准工作溶液的荧光强度，根据荧光强度和对应的元素浓度绘制硒标准曲线.
6.4.4.3待测试液测定
按顾序依次对空白试验溶液、试样待测溶液进行测定.若测定结果超出标准曲线的线性范围，应将试样稀释后再测定.
7结果计算
7.1无机晒
按式（1）计算试样中无机硒含量：
（1）
式中：X一试样中无机硒的含量，单位为毫克 试样提取液测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）： 每千克mg/kg）iC1 试剂空白测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）：试样质量，单位为克（g）：f-f=25ml.×10 ml/4 ml
以重复性条件下获得的两次独支测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字.
7.2有机硒
按式（2）计算试样中有机硒含量：
（2）
式中：
X：一试样中有机硒的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；X一试样中无机硒的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）. 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字.
X-试样中总语含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
8测定低限和回收率
本方法无机硒的测定低限（LOQ）为0.01mg/kg.
本方法无机硒的回收率范围为：鱼肉84.8%~93.5%；虾肉85.7~92.8%；蟹肉85.1%~93.4%.
