中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 4777-2017
Determination of anthraquinone residues in tea for exportGC-MS/MSmethod
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任.本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口. 本标准起草单位：浙江省检验检疫科学技术研究院、中华人民共和国上海出人境检验检疫局.本标准主要起草人：谢文、陆勋元、黄超群、陈丽、申屠炎、楼成杰、于卓然、邓晓军、谢韵第.
出口茶叶中葱醒残留量的检测方法 气相色谱-质谱/质谱法
1范围
本标准规定了出口绿茶、红茶、普洱茶、乌龙茶中9.10-蕙醒残留量的气相色谱-质谱/质谱法测定方法.
本标准适用于绿茶、红茶、普洱茶、乌龙茶中9.10-葱醒残留量的定量测定和确证.
2规范性引用文件
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
试样用正已烷-丙酮混合溶剂均质后提取，提取液浓缩后，再用弗罗里硅土柱净化，采用气相色谱质谱/质谱仪检测和确证，内标法定量.
4试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，所用水为符合GB/T6682规定的一级水.
4.1正已烷：色谱纯.
4.2丙酮：色谱纯.
4.3乙醚：色谱纯，
4.4氯化钠.
4.5无水硫酸钠：650C灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，于密封瓶中备用.
4.6弗罗里硅土：粒度75pm~150pm（100目~200目）.650C灼烧4h.使用130℃活化4h在干燥器内冷却至室湿，加2%的水脱活，备用.
4.7正已烷-丙酮（11.体积比）：取等体积的正已烷和丙酮混合均匀. 4.8正已烷-乙醚（82，体积比）：取正已烷和乙醚（82，体积比）混合均匀.
4.99，10-葱醒、9 10-葱醒-D8标准物质（Anthraquinone，CAS：84-65-1.C，H OAnthraquinone-D8，CAS:10439-39-1)：纯度大于或等于99%.
4.10标准储备溶液：准确称取适量标准物质（4.9），用丙酮配制成0.4mg/mL.的标准储备液，于0℃~4℃冰箱内避光储存，有效期6个月.
4.11葱醒-D8标准储备溶液：准确称取适量标准品（4.9）.用丙酮配制成0.4mg/mL的标准储备液，于0℃~4C冰箱内避光储存，有效期6个月.
4.12标准中间液的配制：准确移取标准储备液适量（4.10），用丙酮配制成10μg/mL的标准溶液；准确移取标准储备液适量（4.11），用丙酮配制成0.2pg/mL的标准溶液于0℃~4℃冰箱内避光储存，有效1
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期3个月.
4.13标准工作溶液的配制：根据需要将标准中间溶液（4.12）用丙酮稀释成适当浓度的标准工作溶液. 4.14净化柱：200mm×15mm（内径）玻璃柱.底部垫约5mm高脱脂棉和约10mm高无水硫酸钠，10g弗罗里硅土（4.6），用正已烷湿法装柱，顶端加约10mm高无水硫酸钠，弃去淋洗液（在使用前需先做淋洗曲线）.
4.15微孔滤膜：0.22μm，有机相型.
5仪器和设备
5.1气相色谱-质谱/质谱仪：配有（EI）离子源.5.3涡旋混合器. 5.4均质器.5.5离心机：最大转速4000r/min5.6旋转蒸发仪.5.7粉碎机.
5.2分析天平：感量0.0001g和0.01g.
6试样制备与保存
取代表性样品约250g，经粉碎机粉碎并全部通过20目圆孔筛，混匀，装人洁净容器内密封，并标明标记
在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化.
7测定步骤
7.1提取
3min.将上层提取溶液转移人浓缩瓶中，用20mL正已烷-丙酮（4.7）清洗均质器刀头，并将此提取液倒 正已烷-丙酮（4.7）.以10000r/min均质0.5min，加人2g氯化钠，涡旋1min，以4000r/min离心入残渣中，涡旋1min.以4000r/min离心3min，合并提取液，在45C以下水浴减压浓缩至近干，待净化.
7.2净化
用3mL正已烷溶解残渣，并转移至净化柱（4.14），再用50mL正己烷-乙醚（4.8）混合溶剂，流速为0.22μm滤膜（4.15），供气相色谱-质谱/质谱仪测定.
7.3测定
7.3.1气相色谱-质谱/质谱条件
7.3.1.1色谱柱：HP-5MS.30m（长度）×0.25mm（内径）×0.25pm（膜厚），或相当者.7.3.1.2程序柱湿：100C保持1min，以20℃/min的速率升温至300℃，保持10min.7.3.1.3载气：氮气，纯度≥99.999%，流速1.0mL/min.
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7.3.1.4进样口温度：300℃. 7.3.1.5进样方式：不分流进样，1min后开阀7.3.1.6进样量：1l.7.3.1.7电离方式：EI7.3.1.8电离能量：70eV.7.3.1.9离子源温度：280℃7.3.1.10 7.3.1.11测定方式：选择反应监测模式（SRM）. 接口温度：300℃.7.3.1.12监测离子对：见表1.
表1定性离子对、定量离子对、碰撞气能量（CE）、采集时间窗
化合物名称 监测离子（m/z） 碰撞气能量 (CE)/V208 0/180 0 10葱醒-D8 208.0/151.7 215 9/188.0 30 10注：“”为定量离子对.
7.3.2定量测定
根据试样中被测物的含量，选取响应值适宜的标准工作溶液进行分析.标准工作液和待测样液中葱醒的响应值均应在仪器线性响应范围内.在上述色谱条件下葱限的参考保留时间8.6min，标准溶液的选择反应监测色谱图参见附录A中图A.1.
7.3.3定性测定
在上述实验条件下，样品中待测物质的保留时间，与标准溶液的保留时间偏差在士0.5%之内：化合物的质谱定性离子至少应包括一个母离子和两个子离子，且样品中定性离子的相对丰度与标准品溶液对应的定性离子的相对丰度比进行比较，偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在被测物.
表2相对离子丰度最大客许误差
>50 >20~50 >10~20 10允许的相对偏差/% 相对离子丰度/% ±20 ±25 ±30 ±50
7.4空白试验
除不加试样外，均按上述操作步骤进行.
7.5结果计算和表述
用色谱数据处理机或按式（1）计算试样中葱醒的残留量，计算结果应扣除空白值：
式中：
X 试样中葱醒的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）：
