中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 4851-2017
出口水产品中甲基汞和乙基汞的测定 液相色谱-电感耦合等离子体质谱法
Determination of methyl mercury and ethyl mercury in aquaticproductsfor export-HPLC-ICP/MSmethod
国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任.本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口.本标准主要起草人：庞艳华、金雁、董振霖、肖珊珊、王玉萍、高鹭、孙瑶、王楠.
出口水产品中甲基汞和乙基汞的测定 液相色谱-电感耦合等离子体质谱法
1范围
本标准规定了水产品中甲基汞和乙基汞的液相色谱-电感耦合等离子体质谱法.本标准适用于出口鱼类、贝类、甲壳类等水产品中甲基汞和乙基汞的测定.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用千，仅注日期的版本适用于本文
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
样品中的甲基汞和乙基汞经过提取液萃取，离心过滤后，用液相色谱仪对汞的各种形态进行分离，并直接导人电感耦合等离子体质谱仪测定，外标法定量.
4试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.
4.2浓氨水.
4.3甲醇，色谱纯.
4.4L-半胱氨酸盐酸盐，生化试剂.
4.5乙酸铵.
4.6氨水溶液（体积分数50%）：准确量取50mL氨水（4.2），级慢倒人50mL中，混匀.
4.7L-半胱氨酸溶液（10g/L）：准确称取1.0gL-半胱氨酸盐酸盐（4.4），用水溶解稀释定容至100mL.4.8提取溶液（5mol/L盐酸，0.1%半胱氨酸盐酸盐）称取0.1gl-半胱氨酸盐酸盐（4.4）.用水溶解，缓 慢加人41.66mL盐酸（4.1）.用水稀释定容至100ml.
4.9流动相（10mmol/L乙酸铵，0.1%L-半胱氨酸盐酸盐，5%甲醇，pH=7.0）：称取0.771g乙酸铵节pH至7.0.加水稀释定容至1000mL.
4.10氯化甲基汞标准品：CHCIHg，CAS号115-09-3，纯度大于98%.
4.11氯化乙基汞标准品：CHCIHg.CAS号107-27-7，纯度大于98%
4.12甲基汞标准储备液（100μg/mL.以Hg计）：准确称取0.0125g氯化甲基汞（4.10），加少量甲醇（4.3）溶解，稀释定容至100mL，于0℃C~4C冰箱中可保存六个月.或使用有证标准溶液，
4.13乙基汞标准储备液（100μg/mL，以Hg计）：准确称取0.0135g氯化乙基乘（4.11），加少量甲醇（4.3）溶解，稀释定容至100mL，于0℃~4℃冰箱中可保存六个月.或使用有证标准溶液.
SN/T 4851-2017
4.14混合标准使用液（500ng/mL，以Hg计）：准确移取甲基汞标准储备液（4.12）和乙基乘标准储备液（4.13）各0.50mL，用水稀释定容至100mL.使用时现配.4.15针头过滤器：0.45pm，尼龙滤膜.
5仪器和设备
5.1高效液相色谱仪.5.2电感耦合等离子体质诺仪（ICP-MS）.5.3电子天平：感量分别为0.001g和0.0001g. 5.4超声波清洗器.5.5离心机.5.6水浴振荡器.5.7高速冷冻离心机.5.8组织捣碎机.
6样品制备与保存
试样应于一18℃以下保存. 取可食部分，用碎机打成匀浆，均分成两份作为试样，分别装人洁净的容器内，密封并标明标记.
7分析步骤
7.1提取
匀，在室温下超声萃取1h~2h，期间振摇数次.于4C下以8000r/min转速离心15min，准确移取 称取样品1.0g~2.0g（精确到0.001g），置于15mL离心管中，加人10mL提取溶液（4.8），涡旋混2mL上清液至15mL离心管中，缓慢逐滴加人约1.5mL的50%氨水溶液（4.6），调节pH至6~7.用水定容至5mL，再于4℃下以8000r/min转速离心10min，取上清液过0.45μm滤膜，备用，供液相色谐-电感耦合等离子体质谱仪进行分析，
7.2测定
7.2.1液相色潜参考条件
液相色谱参考条件如下：
a）色谱柱：C柱，长150mm，内径4.6mm，粒度5μm，或相当者；c）柱温：30C；e）进样量：50μL.
b）流动相：10mmol/L乙酸铵0.1%L-半胱氨酸盐酸盐5%甲醇（4.9）；d）流速：1.0mL/min;
7.2.2电感精合等离子体质谱仪条件
仪器参考工作条件及参数：参见附录A.1
7.2.3工作曲线
2 分别移取混合标准使用液0mL.0.1mL、0.2mL.0.5mL、1.0mL.2.0mL、5.0mL于一组50mL
容量瓶中，各加人2.0mL.1-半胱氨酸盐酸盐溶液（4.7）.用水定容至刻度，得到甲基汞和乙基汞的浓度（以Hg计）分别0.0μg/L、1.0μg/L、2.0 μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、50.0μg/L的混合标准工作液.以标准工作液中目标化合物的浓度为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线.
7.3定量测定
依次对混合标准溶液系列、空白溶液和试样溶液进行测定，以其标准溶液峰的保留时间定性，用标准工作曲线对试样进行定量.甲基汞、乙基汞标准样品色谱图参见图B.1.
7.4平行试验
按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定.
7.5空白试验
除不加试样外，均按上述操作步骤进行.
8结果计算和表述
试样中甲基乘（或乙基录）的含量（mg/kg）的计算见式（1）：
（1）
式中：
X. 试样中甲基汞（或乙基汞）的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； 试样溶液中甲基汞（或乙基汞）的浓度，单位为微克每升（μg/L）；ca 空白溶液中甲基汞（或乙基汞）的浓度，单位为微克每升（μg/L）；V 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）：最终样品溶液所代表试样的质量，单位为克（g）.计算结果保留两位有效数字.
9测定低限、回收率和精密度
9.1测定低限
本方法对甲基汞和乙基汞的测定低限分别为0.02mg/kg、0.05mg/kg.
9.2回收率
在三种不同基质样品中各添加三个水平的甲基汞、乙基汞，回收率结果见表1.
表1方法回收率数据表
甲基汞样品名称 加水平 回收率范围 添加水平 乙基汞 回收率范围mg/kg % mg/kg %0.02 79.4~94.6 0.05 71.7~90 5鱼类 0 25 87 5~98.6 0.25 82.3~91 50 50 90 5~100.2 0 50 82 9~94 2
