中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T4850-2017
出口食品中草铵麟及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法
Determination ofglufosinate-ammonium and metabolites residues in export foodLiquid chromatography-tandem mass spectrometry method
国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草
请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任.
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口.
本标准起草单位：中华人民共和国泉州出人境检验检疫局综合技术服务中心、中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中华人民共和国江西出人境检验检疫局、福建省高建发茶叶有限公司、泉州市洛江泉岩茶业有限公司、福建农林大学.
木标准主要起草人：黄伙水、韦航、翁城武、邹强、林永辉、刘正才、林春澄、荣杰峰、李亦军、孙威江、杨方.
出口食品中草铵麟及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法
1范围
谱-质谱/质谱检测方法， 本标准规定了出口食品中草铵麟及其代谢物N-乙酰基草铵麟、3-（甲基麟基）丙酸残留量的液相色
本标准适用于茶叶、稻谷、大豆、玉米、柑橘、苹果、桃、葡萄、香蕉、木瓜、番茄、胡萝卜、马铃薯、洋葱、开心果、菜籽油中草铵膜及其代谢物N-乙酰基草瞬、3-（甲基膜基）丙酸残留量的检测和确证，
2规范性引用文件
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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
样品中的草铵鳞及其代谢物N-乙酰基草铵麟、3-（甲基麟基）丙酸用水提取，经二氯甲烷和C固相萃取小柱净化，用液相色谱-质谱/质谱法，电喷雾负离子模式电离（ESI-），基质外标法定量，
4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为二次超纯水.
4.1乙睛：色谱纯 4.2无水乙酸铵：色谱纯.4.3氨水：25%，色谱纯.4.4二氯甲烷，色谱纯.4.5乙酸铵水溶液（1mmol/L.pH=11）：准确称取0.07708g的无水乙酸铵溶解于适量水中，用氨水4.6草铵麟标准物质（Glufosinate ammonium，GLU，CAS号：77182-82-2.分子式：CH：NO.P)：纯度 调节pH=11.用水定容至1000mL，>97.5%.4.83-（甲基腾基）丙酸标准物质（3-methylphosphinicopropionicacid，MPP，CAS号：15090-23-0，分子 度≥98.5%.式：CH O P)：纯度≥98.0%4.9草铵麟、N-乙酰基草铵麟（NAG）、3-（甲基腾基）丙酸（MPP）标准储备溶液（1.0mg/mL）：精确称取50mg的草铵腾和NAG、MPP标准品，用水溶解并定容至50mL，存放于聚乙烯或聚丙烯塑料瓶中.低于5℃保存.
4.10草铵麟、N-乙酰基草铵麟（NAG）、3-（甲基腾基）丙酸（MPP）标准中间溶液（1.0μg/mL）：取一定
SN/T4850-2017
量的草铵腾标准储备溶液（4.9）.用水稀释成1.0μg/mL.存放于聚乙烯或聚丙烯塑料瓶中，低于5℃保存.
4.11Ca固相萃取柱：500mg，6mL柱.使用前用5mL甲醇、5mL水活化.
4.12滤膜：0.22μm，水相.
5仪器和设备
5.1液相色谱串联质谱仪：配有电喷雾（ESI）离子源.
5.2粉碎机.
5.3组织将碎机.
5.5高速离心机，转速不低于12000r/min.
5.6固相萃取装置.
5.7超声清洗器.
5.8分析天平：感量0.1mg和0.01g.
5.9pH计.
5.10移液器：1mL.5ml.
5.11螺旋盖聚丙烯离心管：50ml
5.12圆孔第：2.0mm.
6试样制备与保存
6.1试样制备
6.1.1茶叶和粮谷类
取有代表性样品约200g.用粉碎机粉碎并通过2.0mm圆孔籍，混匀，装人洁净容器内，密封并标识.
6.1.2水果蔬菜类
取有代表性样品500g，将可食部分切碎后（不可水洗）.用组织鹅碎机将样品加工成浆状，混匀，装
人洁净容器内，密封并标识.
6.1.3植物油类
植物油类液体样品混匀备用.
6.2试样保存
水果、蔬菜类试样在一18C保存.茶叶、谷物类试样、植物油类液体样品常温保存.
7测定步骤
7.1待测样品溶液的制备
7.1.1样品提取
称取均质好的试样茶叶1g（精确至0.01g）.植物油、谷物、水果蔬菜5g（精确至0.01g），置于2
50mL具塞聚丙烯离心管中，移液器准确加人10mL水，10mL二氯甲烷，充分涡旋振荡10min，超声提取10min.以12000r/min离心5min，收集上清液，待净化.
7.1.2样品净化
取样品提取液5mL加人已经活化了的C固相萃取柱中，弃去前3mL流出液，收集后2mL流出液，过0.22μm水相滤膜，滤液供液相色谐-质谱/质谱检测.
7.2基质混合标准工作溶液的制备
分别置于50mL具塞聚丙烯离心管中，加人适量混合标准溶液，其余按照7.1步骤操作完成，制成草铵 称取5个均质好的阴性样品茶叶1g（精确至0.01g），植物油、谷物、水果菜5g（精确至0.01g），麟、N-乙酰基草铵麟、3-（甲基麟基）丙酸含量均为0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.2pg/mL、0.5pg/ml、1.0μg/mL的基质标准溶液.
7.3测定
7.3.1液相色谐参考条件
液相色语参考条件如下：
a）色诺柱：NH2P-502D柱，150mm×2.0mm，粒度5pm或相当者；b）柱温：35℃；d）进样量：5μl; c）流速：0.25ml/mine）流动相：流动相A；1mmol/L乙酸铵水溶液（pH=11）（4.5），流动相B，乙晴.推荐梯度洗脱程序见表1，不同仪器洗脱条件可能不同.
表1流动相梯度洗脱程序表
步骤 梯度时间/min 0 动相A/% 25 流动相BH（乙晴）/% 752 2 25 753 2.01 80 204 6 80 205 6.01 25 756 10 25 5
7.3.2质谱/质谱参考条件
质谱/质谱参考条件如下：
a）离子源：电喷雾离子源（ESI）：b）扫描方式：负离子模式扫描： c）监测模式：多反应监测（MRM）：d）雾化气、干燥气、碰撞气均为高纯氮气；使用前应调节气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求，详细条件参见附录A：e）喷雾电压、雾化气压力、干燥气温度、干燥气流速、源内碎裂电压、碰撞能量应优化至最优灵敏 度，参考条件和定性离子对、定量离子参见附录A.
