中华人民共和国国家标准
GB/T46452-2025
晴水合酶纯度和活性的测定
Purity and enzymatic activity determination ofnitrile hydratase
国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC387）提出并归口.
本文件起草单位：深圳市第二人民医院、江南大学、深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司、中国测试技术研究院、北京衍微科技有限公司、清华大学、河北省食品检验研究院、中国计量测试学会.
本文件主要起草人：顾大勇、崔文璟、周哲敏、李卫峰、张译文、周李华、王苗苗、李付龙、王怡、张、张岩、王旭、杨扬仲夫.
晴水合酶纯度和活性的测定
1范围
本文件描述了晴水合酶纯度和活性测定的原理、试剂和材料、仪器设备、样品制备、试验步骤、结果计算.
本文件适用于催化丙烯为丙烯酰胺的睛水合酶纯度和活性的测定.
2规范性引用文件
件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定文适用于本文件.
3.1
晴水合酶nitrilehydratase；NHase
注1：大部分NHase含有a两个亚基，-般以α：四聚体形式存在. 具有将晴类物质（如丙烯睛）催化为酰胺类化合物（如丙烯酰胺）的金属酶.注2：NHase活性中心含有不同的金属离子，一般分为铁型睛水合酶（Fe-NHase）和钻型晴水合酶（Co-NHase).
3.2
晴水合酶纯度NHasepurity
晴水合酶蛋白相对纯度.注：即腊水合酶检测灰度与样品强白总灰度的比值结果以百分比（%）表示.
3.3
腊水合酶比活性NHase sPecific activity
注：以酶的比活性单位（U/mg）来表示. 晴水合酶催化丙烯晴为丙烯酰胺的能力.
4缩略语
下列缩略语适用于本文件.Acr-Bis：亚甲基双丙烯酰胺（acrylamide-bisacrylamide)APS：过硫酸铵(ammonium persulphate)BSA;牛血清白蛋白(bovine serum albumin)LC：液相色谱（liquid chromatography)
Nhase：晴水合酶（nitrile hydratase)
