中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 1390-2004
香蕉细菌性枯萎病菌检疫鉴定方法
Methods for quarantine and identification of Raistonia solanecearum(Smith) Yabuuchi et al race 2
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前 盲
本标准由国家认证认可监督管理费员会提出并回口. 本标准的附录A.附录B和附录C为资料性附录.本标准起草单位:中华人民共和国广州出人境检验检疫局, 本标准主要起事人:张传飞、钟器强、起立装、司装保标,本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准,
香蕉细菌性枯病菌检疫鉴定方法
1范围
本标准适用于香美,大票,妈尾病等密主植物之果实、吸芽、试管苗和英德紧螺材科的登蕉相需性枯基病面检疫鉴定,
2范性到用文
下列文件中的条款通过本标准的引用新成为本标准的条款,凡是统目期的引用文件,其随后的修改单(不包括霜润的内客)或修订版均不运用于本标查-然真,减励根握本畅准达成协试的各方研究 是否可使用这查文作的最新板本,凡是不理日期的引用文作,其能新取本造用于本标准.
GB/T4789 28一1994食品卫生微生物学验晚录色法、培费基和试列
3凉理
香高照菌性爽角黄的分类地位学名Raiatnfe rolemarreram(Smith)Yebuochi etal rece 2.册名 Paudmowes nlaracenen E. F. Smith raoe 2 病需英文名 Mako diseast of banana 成者 Bscterial wit of benana,病菌我属于原核生物界Procaryotes.薄登相贵门 Gmcilicvtes.Ralmoniaceee 科,Ralvaia IA.
香死理菌性格要病菌在寄生感图、度状持点、地养性状及生物学特性等方面,不网于近似肿,也不同干背桔置价其他生理小种或生物型是波病算的道定款属(参无附录A.附录B)
4仅器和试剂
4.1仪基.具
4.1.10小件用器具,场养目、酒糖灯、试管、费联片、盖装片、楼种价、楼种环、移级券、白登盘、烧杯、记 号笔,小蜀刀、错子、刀片等、
4.2优别
4.2.1TTC培养基(参见附录C). 4.2.2 B5%ZB(C H 0) 4.2.3次K(NCIO) 4.2.4元菌水,
5买验室检验
5.1α状检室
硬,色变码,干案,如果发现上述任例一种直状,应及时用解别刀向到开病株级蒸基部,检查其唯管 首先应看植样是否基第,检查植株的根基时黑等各个部位、时片是否变黄,折检,来实是青质地变京地织是否变强色、病部受挑压后是否有菌腔溢出,妇果是则应进一步分真炖化图带.
本病症状易与香票巴马菱育病(FaurinezyrporiamE.sp.cuenis)提,国前省通管是栋上群的三叶地叶先褪球黄化真后者世位是下样老叶先发所、频事无菌然、为害不产生妈也于腐的病最,
5.2图的分离的化
5.2.1分高:采用选带性TTC培养基川平板划线肽减解释分离续分高项密,特病组织时成3mm见 方的小块-先用70%乙醇漫泡305,携出后用0.3%次塞脱情掺康处理5min.再用无菌水济洗两次,最后把病组织置放在洁净的载载片上梅硬,静置20.用接降环商取计液在TTC平板上划线.35℃-37℃ 下场养2d一4d后,检查井降选墙养基上的菌路,青精遗在TTC上特征,无近病力或放病力很雾的首高为保红色,放病性菌落为建质状、白也或中央特须红的白色,
5.2.2面种纯化:采用平板划线法.即用灭面的够种针针头糖取TTC上可疑的致病性密逐后,在TTC平板上多次划线纯化-在35T~37℃服度下墙要2d~4d,移&单个菌塞后进一多扩大累据.
5.3第兰氏染售区度(可省降本步源)
本兰氏院性反度-签GB/T 4789.2819H中的2.2建行实段.
5.4致病性测试
5.4.1刻优物
测试植物除香斯外,还应在马钟署,番苑,爆草,提子、要五种植物中任选两种,香無核类病黄属于2号小种,资生专化性编,只为害香病不为害其继因试提指.
5.4.2换种方法
针期植株的上部幼叶或(假>塞基部.注射法采用注射器在每株植物的蒸基部注射10=L左右的接种 提抑采用针到加理射的方造.用酒考的院上菌最为24旅度为10'c/nL的图总得后,提种旅度10'cfw/mL,衍性对肌用光面水代容接种液,
续神后的植标置致在26℃-35℃晶度下-元在100%相对提度保蛋24h~48h.然后转移到80%左在的驱对湿度下,每天在7000[x~10 0001x下光所增靠16h.暗室培著8h.奖种74后开始获察症 状,接种后心d不表现症状的视为不发费、植桥表现出要期,在(假)蒸盖部旗切属出现妈变北有盖整湿
6盗定特征
6.1业状特点
港督来病客,病修银基基部横切密可见组职变梅,提压病部有污白色唐能溢品.
6.2病原重的培养特征
在T丁C养基上产生自色.贴技元爱时黑落菌播鼠色不为除红电.
6.3致病性特征
7幅果判定
凡症状、运养特征及致病性持征均与第6意所述内容相考会的,鉴定为香寒细菌性枯要病图.
智9
妥保存.
新菌种在TTC场养基上(35℃-37℃下)增养24h后用针刮取组菌,放人装有灭著水的须毒填填管中,封口后室甚或低温4C下保存(离种的致病力数年不会表失),遇种保存时间至少一年,对敬 废弃的首外应缴灭括理.