中华人民共和国国家标准
GB 11895-89
水质苯并(a)芘的测定 乙酰化滤纸层析荧光分光光度法
Water quality-Determination of benzo（a)-pyrene-Acetylated paper chromatographywith fluorescence spectrophotometricmethod
国家技术监督局 发布
中华人民共和国国家标准
水质苯并（a）花的测定 乙酰化滤纸层析荧光分光光度法
GB 11895-89
Water quality-Determination of benzo(a)-pyrene-Acetylated paper chromatographywith fluorescence spectropbotometric method
1主题内容与适用范围
本方法现定了测定水质中苯并（a）芘（以下简称B（a）P）的方法.
本标准适用于饮用水、地面水、生活污水、工业废水，最低检出浓度为0.004g/L，
注意：B（a）P是一种由五个环构成的多环芳烃，它是多环芳烃类的强致瘤代表物.基于B（a）P的强致癌性，按本标准方法分析时必须戴抗有机溶剂的手套，操作应在白瓷盘中进行（如溶液转移、定容、点样等）.室内应免阳光直接照射，通风良好.
2原理
水中多环芳经及环已烷可溶物经环已烷萃取（水样必须充分摇匀），萃取液用无水硫酸钠脱水、浓缩，面后经乙酰化滤纸分离.分离后的B（a）P用荧光分光光度计测定.
3试剂
除另有说明外，分析时均使用分析纯试剂和蒸馏水.
3.1B（a）P标准溶液的配制：称取5.00mg固体标准B（a）P于50mL容量瓶中（因B（a）P是强致癌物，为了减少污染，以少转移为好），用少量苯溶解后，加环已烷至标线，其浓度为100g/mL.将此贮备液用 环已烷稀释成10ug/mL的标准使用液，避光于冰箱中.
3.2乙酰化滤纸的制备：把15×30cm的层析滤纸15至20张卷成高15cm的圆简状，逐张放入1000mL高型烧杯中.杯壁与靠杯的第一张纸间插入一根玻聘棒，杯中间放一枚玻璃熔封的电磁搅拌铁芯.在通风短中，沿杯壁慢慢倒入乙酰化剂（由苯乙酸酐浓硫酸=750mL250mL0.5mL混合配制成），磁力恒温搅拌器的温度保持55士1C，连续反应6h.取出乙酰化滤纸，用自来水漂洗3~4次，再 用蒸馏水漂洗2~3次，晾干，次日用无水乙醇浸泡4h后，取出乙酰化滤纸，晾干压平，备用.
3.3环已烷，重蒸，用荧光分光光度计检查：在荧光激发波长367nm，狭缝10nm；荧光发射狭缝2nm，波长405nm应无峰出现.
环已烷后备用，
4仪器
常用实验室设备和下列仪器.4.1备有紫外激发和荧光分光的荧光分光光度计，光程为10mm的石英比色皿.4.2紫外分析仪（带365nm或254nm的滤光片）. 4.3康氏振荡器，4.4磁力恒温搅拌器.4.5立式离心机，转速为4000：/min.4.6分液漏斗，1L、3L、100mL，活塞上禁用油性润滑剂，活塞直接用水或有机溶剂润滑即可.4.7锥形瓶，250mL，具磨口玻璃塞. 4.8恒温水浴锅.4.9层析缸，4.10具磨口塞刻度离心管，5ml.4.12分析天平，感量0.01mg. 4.11点样用玻璃毛细管（自制）.
5样品保存
水样应贮于玻璃瓶中并避光，当日（24h内）用环已烷萃取，环已烷萃取液放入冰箱中保存.
6步骤
6.1样品和标样的预处理
6.1.1清洁水和地面水萃取
康氏振荡器上每次振荡3min，取下放气，静置半小时，待分层后，将两次环已烷萃取液收集于具塞锥形 取充分混匀的清洁水样2000mL放入3000mL分液漏斗中.用环已烷萃取两次，每次用50mL，在瓶中，弃去水相部分.
6.1.2工业废水的萃取
取混匀的工业废水样1000mL，放入1000mL分液漏斗中.每次用50mL环己烷萃取两次，在康氏振荡器上每次振荡3min，取下放气，静置半小时，待分层后，将两次环已烷萃取液收集于具塞锥形瓶中， 弃去水相部分.
6.1.3脱水、浓缩
在（上述）环己烷萃取液中加入无水硫酸钠（约20~50g），静置至完全脱水（约1~2h），至具塞锥形缩：如果颜色不深则全部浓缩，在温度为70~75C用KD浓缩器减压浓缩至近干，用苯洗涤浓缩管壁三 瓶底部无水为止.如果环已烷萃取液颤色比较深，则将脱水后环已烷定容至100mL，分取其一定体积浓次，每次用3滴，再浓缩至0.05mL，以备纸层析用，
6.1.4纸层析分离
在乙酰化滤纸30cm长的下端3cm处，用铅笔画一横线，横线两蹦各留出1.5cm，以2.4cm的间冷风吹干.每支浓缩管洗两次，每次用一滴苯，全部点在纸上，将点过样的层析滤纸挂在层析缸内架子 隔将标准B（a）P与样品浓缩液用玻璃毛细管交叉点样，点样班点直径不超过3~4mm.点样过程中用上，加入展开剂（甲醇乙醚蒸馏水=441（体积比））.直到滤纸下端浸入展开剂1cm为止.加盖，用透明胶纸密封.于暗室中晨开2~4h.取出层析滤纸，在紫外分析仅照射下用铅笔圆出标样B（a）P班
点以及样品中与其高度（&值）相同的紫蓝色斑点范围.
剪下用铅笔圈出的斑点，剪成小条、分别放入5mL具塞离心管中.在105~110C烘箱中烘10min3000r/min的速度离心2min.上清液留待测量用. （亦可在干操器中或干净空气中晾干）.在干燥器内冷却后，加入丙酮至标线.用手振荡1min后，以
6.2测定
将标准B（a）P班点和样品斑点的丙酮洗脱液分别注入10mm的石英比色Ⅲ中，在激发、发射狭缝分别为10mm、2nm，激发波长为367mm处，测其发射波长402nm、405nm、408nm处的荧光强度F.
7结果的表示
用窄基线法按下列公式计算出标准B（a）P和样品B（a）P的相对荧光强度，再计算出B（a）P的含量C（用相对比较计算法）.
FenP相对荧光强度PF 2
式中：C-水样B（a)P含量，ug/L；M--标准B（a)P点样量，ug；Fs-标准B（a）P的相对荧光强度； Fma样品班点的相对荧光强度；--水样体积，L；R--环已烷提取液总体积与浓缩时所取的环已烷提取液的体积之比值，
8精密度与准确度
8.1精密度
五个实验室自行配制的含有B（a）P近似0.2g/L的焦化废水的精密度见表1.
表1精密度
实验室编号 x CV，%1 0.230 6.92 0. 199 0.213 13.0 8.03 4 0.202 6.65 0. 179 4.2
8.2准确度
两种工业废水的加标回收率见表2、表3.
表2焦化废水加标回收结果
实检室编号 CV.%1 107.0 6.92 93 3 8.6
续表2
实验室编号 ，%3 121. 0 13.04 99.0 6.673.3 4.2
表3沥青废水加标回收结果
实验室编号 ，%1 79.8 442 83.0 123 81.4 7.64 93.3 6.2
