中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.32-2001代替GB/T14926.32-1994
实验动物
大鼠冠状病毒/延泪腺炎病毒检测方法
Laboratory animal-Method for examination ofrat corona virus(RCV)/sialodacryoadenitis virus (SDAV)
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前 言
本标准是对GR/T14926.32-1994(实验动物大鼠冠状病毒/延润腺炎病毒检测方法》的修订.由于大鼠冠状病毒和延泪腺炎病毒与小鼠肝炎病毒有交叉抗原,因面删除原标准中4.1玻片抗原的制备方法,增加了3.1.2的抗原片制备方法.
本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.本标准起草单位:中国实验动物学会.本标准主要起草人:贺争鸣. 本标准于1994年1月首次发布.
中华人民共和国国家标准
实验动物 大鼠冠状病毒/延泪腺炎病毒检测方法
GB/T 14926.32-2001代静GB/T 14926.32-1994
Laboratory animalMethod for examination ofrat corona virus(RCV)/sialodacryoadenitis virus (SDAV)
1主题内容与适用范围
本标准规定了大鼠冠状病毒/延泪腺炎病毒(RCV/SDAV)的检测方法、试剂等.本标准适用于大鼠RCV/SDAV的检测.
2引用标准
下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用面构成为本标准的条文,本标准出版时,所示版本均为有效.标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.
GB/T14926.51-2001实验动物免疫酶试验 GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验
3原理
小鼠肝炎病毒(MHV)与RCV/SDAV有密切的抗原关系,根据免疫学原理,采用MHV抗原检测大鼠血清中RCV/SDAV抗体.
4主要试剂和器材
4.1试剂
4.1.1.1特异性抗原
用MHV感染DBT或L929细胞,当病变达~时收获,冻融三次或超声波处理后,低速离心去除细瓶碎片,上清液再经超速离心浓缩后制成EIISA抗原.
4.1.1.2正常抗原
DBT或L929细胞冻融破碎后,经低速离心去除细胞碎片面获得的上清液.
4.1.2抗原片
MHV接种DBT或L.929细胞1~2d后,病变达~时用胰酶消化分散.PBS洗涤,涂片.室温干燥后,冷丙酮固定10min,一20C保存.
4.1.3阳性血清
MHV抗原免疫SPF大鼠所获得的抗血清.