中华人民共和国国家标准
GB/T14926.54-2001
实验动物 血凝抑制试验
Laboratory animal-Haemoglutination inhibition test(HAI)
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前 言
本标准修订了GB/T14926.24-1994(实验动物小鼠肺炎病毒检测方法》中的血凝抑制试验方法,将其作为一个独立标准列出.
本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.
本标准起草单位:中国实验动物学会.
本标准主要起草人:贸争鸣.
中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.54-2001
实验动物血凝抑制试验
Laboratory animal-Haemoglutination inhibition test(HAI)
1范围
本标准规定了血凝抑制试验(HA1)所用试剂、器材和操作步骤等.
本标准适用于实验动物病毒抗体的检测.
2原理
某些病毒在一定的条件下,能够选择性的凝集某些动物红细胞.这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制.
3主要试剂与器材
3.1试剂
3.1.1血凝素抗原
血凝抗原除部分病毒(如痘类病毒)能与感染性颗粒分开外,大部分是与病毒的感染性颗粒相关联,凡培养于鸡胚或组织培养中的病毒及其抗原物质,经离心除去沉淀,均可用作血凝抑制试验的血凝素抗原,见GB/T14926.52-2001中表1、表2.
3.1.2红细胞悬液
洗三次,再悬于pH7.4PBS中. 根据不同病毒血凝所需敏感红细胞制备悬液.一般将血液保存于阿氏溶液内,使用前pH7.4PBS
3.1.3阳性血清
3.1.4阴性血清
3. 1. 5 PBS(0. 01 mol/L pH7. 4)
氯化钠 氯化钾 8g 0.2 g磷酸二氢钾 0.2g磷酸氢二钠(NaHPO12HO) 2.83 g蒸馏水 加至 1 000 mL
3.1.6阿氏溶液
葡萄糖 2.05 g枸橡酸钠 0.8 g构橡酸 0 055 g氯化钠 蒸馏水 0.42 g 100 mL115C,30min灭菌,保存于4C.
3.2器材